199160. lajstromszámú szabadalom • Eljárás GnRh antagonista ciklusos dekapeptidek előállítására
199160 érés délutánja. Külön nőstény patkánycsoportot alkalmazunk kontrollként, amelyeknek nem adagolunk peptidet. Minden kontroll patkány peteérése bekövetkezik a proestrous estéjén; a kezelt patkányok azon számát jegyezzük fel, amelyek peteérése ugyancsak bekövetkezik. Minden találmány szerinti eljárással előállított peptid akkor tekinthető jelentősen hatásosnak, amennyiben igen •alacsony dózisban hatásosan megakadályozna a nőstény patkányok ovulációját, és minden egyes peptid tökéletesen hatásosnak tekinthető 500 mikrogramm dózis alkalmazásakor. Valamennyi, az I. táblázatban felsorolt peptid elfogadható koncentrációban in vitro hatásosan blokkolja a GnRH indukált LH kiválasztást. Ezek közül több peptid in vivo hatásosabb, mint a standard összehasonlító anyag. Valamennyi peptid alacsony dózis esetében megakadályozza a nőstény patkányok ovulációját. Például az in vivo vizsgálatban az 1. számú peptid 10 pg-os dózisa esetében 10 patkány közül csak 7 esetében következik be ovuláció. A 2. számú peptid esetében 10 pg dózis alkalmazásakor 10 •patkányból 9 esetében, 50 pg dózis alkalmazásakor 10 patkány közül 0 esetében történt ovuláció. Az 5. számú peptid esetében 50 pgos dózis alkalmazása esetén 9 patkányból 2 esetében történt ovuláció. Amennyiben az aktív hatóanyagot tabletta formában kívánjuk adagolni, és gyógyszerészetileg elfogadható hígítóanyagokat, mint például kötőanyagokat, például tragakantot, búzakeményítőt vagy zselatint; dezintegráló anyagot, például alginsavat; és kenőanyagot, például magnézium-sztearátot tartalmazhat. Amennyiben folyadék formált alakot adagolunk, a gyógyszerészetileg elfogadható hígítóanyag édesítőanyagot és/vagy ízesítőanyagot tartalmazhat, valamint intravénás adagolás esetében izotóniás só-oldatot, íoszfát-puffer-oldatokat és hasonlókat alkalmazhatunk. A gyógyszerészeti készítmények általában a peptidet megfelelő, szokásosan alkalmazott, gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyaggal együtt tartalmazzák. A szokásos dózis körülbelül 10 pg—2,5 mg/kg testsúly intravénás adagolás esetében; de az orális dózisok magasabbak, beleértve, hogy a vegyületek ciklusos volta lehetővé teszi az előnyösebb orális adagolásukat. Az ezekkel a peptidekkel végrehajtott kezelés a más GnRH antagonisták esetében alkalmazott kezeléshez hasonlóan történik, olyan alkalmas hordozóanyag alkalmazásával, amelyben a peptid oldódik. A peptidek az emlősöknek intravénásán, szubkutan, intramuszkulárisan, orálisan, perkután, például intranazálisan vagy intravaginálisan adagolhatok, abból a célból, hogy a megtermékenyítést megakadályozzuk és/ /vagy a gonadotrop aktivitást reverzibilisen csökkentsük, és így például a korai pubertást kezeljük, vagy a vegyületeket ilyen csökkentésre alkalmazzuk sugárkezelés vagy ke13 8 moterápia során. A vegyületek ugyancsak alkalmasak szteroid-függő tumorok kezelésére. A hatásosan alkalmazható dózis függ az adagolás módjától és a kezelendő emlőstől. Bakteriosztatikus vízben készült oldat esetében a jellemző dózis körülbelül 0,1 — 2,5 mg/kg testsúly. Orálisan a peptid akár szilárd, akár folyékony formált alakban adagolható. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás az (I) általános képletű ciklusos dekapeptidek előállítására, anol az általános képletben Ac acetilcsoport, R, jelentése dehidro-Pro vagy ß-D-2-Nal, A jelentése klór- vagy fluoratom, és a benzolgyűrű 4-helyzetében áll, R3 jelentése D-3-Pal vagy D-Trp, R4 jelentése Cys, Asp, Glu, Orn vagy daP, R5 jelentése Tyr vagy Arg, R6 jelentése ß-D-2-Nal, D-Trp, D-3-Pal vagy D-Arg, és R10jelentése Cys, Asp, Orn, daP vagy D-Asp, azzal jellemezve, hogy egy (II) általános képletű közbenső termékről, ahol X2 jelentése hidrogénatom vagy a peptidkémiában ismert indol-nitrogén-védőcsoport, X3 jelentése hidrogénatom vagy Cys-csoport, vagy az oldalláncon levő aminocsoport vagy karboxilcsoport peptidkémiában ismert védőcsoportja vagy a két X3 kovalens kötést alkot, X4 jelentése hidrogénatom vagy a Tyr-csoport fenolos hidroxilcsoportjának peptidkémiában ismert védőcsoportja, X5 jelentése hidrogénatom vagy az oldalláncon levő guanidocsoport peptidkémiában ismert védőcsoportja, és X9 jelentése-OCH2-(gyanta) vagy-NH-(gyanta), ahol a „gyanta" előnyösen valamely, a peptidkémiában önmagában ismert metil-benzhidril-amin hordozógyanta, a jelenlevő X2—X9 csoportokat a peptidkémiában ismert módon eltávolítjuk és/vagy az X9 csoportban szereplő gyanta hordozóról a peptidet lehasítjuk, és az R4 és Rl0 csoport között még nem jelenlevő kovalens kötést oxidációval vagy hidrazid-módszerrel kialakítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan (I) általános képletű dekapeptidek előállítására, ahol R4 jelentése Asp vagy Glu és R10 jelentése daP vagy Orn, és R,, A, R3, R5 és R6 az 1. igénypontban megadott, azzal jellemezve, hogy megfelelően szubsztituált vegyületből indulunk ki. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan (I) általános képletű dekapeptidek előállítására, ahol R4 jelentése daP vagy Orn és Rio jelentése Asp, és R,t A, R3> R4 és R6 az 1. igénypontban megadott, azzal jellemezve, hogy megfelelően szubsztituált vegyületekből indulunk ki. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan (I) általános képletű dekapeptidek előállítására, ahol R4 és R|0 Cys, és R,, A, R3, R5 14 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 05
