199152. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszfonát- és foszfonamid-endopeptidáz-inhibitorok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
199152 b) 3-[ [(S)-2-Amino-3-fenil-l-oxo-propil]-amino] -propánsav-benzil-észter-hidroklorid 13,65 g (32 mmól), az a) pont alatt leírtak szerint előállított benzil-észtert feloldunk 90 ml 1,5 N ecetsavas hidrogén-klorid oldatban, és 90 perc szobahőmérsékleten folytatott keverés után az oldószert vákuumban ledesztilláljuk. A maradékot diet il-éterben eldörzsöljük, aminek eredményeképpen a nyersterméket fehér, 169—175°C-on olvadó por formájában kapjuk. Tömege 11,45 g. Vékonyréteg-kromatográfiás R/-értéke: 0,52, szilikagélen, kloroform, metanol és ecetsav 6:1:1 arányú elegyében. Egy analitikai mintát acetonitrilből átkristályosítva, a kapott tiszta, tűkristályos 3- [ [(S)-2-amino-3-fenil-l-oxo-propil] -amino]-propánsav-benzil-észter-hidroklorid olvadáspontja 170,5—175°C. c) Dimetil-(fenetil-foszfonát) 18,5 g (100 mmól) fenetil-bromid és 43,4 g (350 mmól) frissen desztillált trimetil-foszfit elegyét nitrogéngáz atmoszférában, visszacsepegtető hűtő alatt, éjszakán át forraljuk. Az elreagálatlan trimetil-foszfitot vákuumban lepároljuk, majd a maradék elegyet 2 kPa-on, 105°C fürdőhőmérséklet mellett desztilláljuk. Az így visszamaradó anyag a nyerstermék, amelynek tömege 23,7 g. A tisztítást 37 g Merck 9385 kovasavgélen, eluensként petroléter és aceton 5:1 arányú elegyét használva, flash-kromatográfiával végezzük. A kapott dimetil-(fenetil-foszfonát) színtelen olaj, tömege 9,9 g. Szilikagél vékonyrétegen, petroléter-aceton 1:1 eleggyel kromatografálva, Rf=0,45. d) 3-[ [(S)-2- [ [(2-Fenil-etiI)-metoxi-foszfinil] -amino] -3-fenil-l-oxo-propii] -aminő] -propánsav-benzil-észter 1,81 g (5 mmól), a b) pont szerint előállított hidrokloridot 200 ml etil-acetát és 200 ml 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldat keverékével összerázzuk, a szerves fázist mossuk nátrium-klorid-oldattal, magnézium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. Ilyen módon 3- [ ](S)-2-amino-3-fenil-l-oxo-propil] -amino]-propánsav-benzil-észtert kapunk. 1,07 g (5 mmól) dimetil-(fenetil-foszfonát)-ot feloldunk 15 ml vízmentes benzolban, nitrogéngáz alatt hozzáadunk 1,09 g (5,25 mmól) foszfor (V)-kloridot, majd az elegyet 30 percen át szobahőmérsékleten, azt követően pedig 45 percig 60°C-on kevertetjük. Az oldószert vákuumban ledesztilláljuk, a maradékot vízmentes benzolban feloldjuk és vákuumban ismét bepároljuk. Az utóbbi művelet megismételve, nyers klór-foszfonát marad vissza. Az így kapott, hozzávetőlegesen 55 mmól klór-foszfonátot feloldjuk 8 ml vízmentes metilén-dikloridban, jégfürdőbe helyezzük, és nitrogéngáz alatt beadagoljuk a fenti, mintegy 5 mmól 3- - [ [ (S-2-amino-3-fenil-l-oxo-propil] -aminol - -propánsav-benzil-észter és 74 mg (0,5 mmól) 4- ( 1-pirrolidinil)-piridin 8 ml metilén-diklo- 10 17 riddal készült oldatát. Ezután becsepegtetünk 664 mg (5 mmól) etil-diizopropii-amint 8 ml metilén-dikloridban oldva, és a reakcióelegyet 1 óra hosszat hidegen, majd éjszakán át szobahőmérsékleten kevertetjük. Másnap az elegyet vákuumban betöményítjük, a maradékot feloldjuk 250 ml etil-acetátban, és az oldatot egymást követően mossuk 50— 50 ml 10%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, vízzel, 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, megint vízzel és végül nátrium-klorid-oldattal. Magnézium-szulfáton szárítva és vákuumban bepárolva 2,1 g sárga olajat kapunk. A termék tisztítását 137 g Merck 9385 szilikagélen flash-kromatográfiával végezzük. Az oszlopot petroléter és aceton 1:1 arányú elegyével eluálva, 1,15 g 3-[ I (S) -2- [ [ (2-fenil-etil)-metil-foszfinil] - -amino] -3-fenil-l-oxo-propil] -amino] -propánsav-benzil-észtert kapunk. Szilikagélen, petroléter-aceton 1:1 ejeggyel kifejlesztve a vékonyréteg-kromatogramot, R/=0,29. Csekély szennyezés foltja látható 0,50 Rf-értéknél. e) 3-[ [(S)-2-[ [(2-Fenil-etH)-metoxi-foszfinil] -amino] -3-fenil-l-oxo-propil] -aminő] -propánsav 1,1 g (2,2 mmól), a d) pontban leírtak szerint előállított benzil-észtert feloldunk 50 ml 96%-os etanolban, hozzáadunk 200 mg csontszenes palládiumkatalizátort, és 1 atmoszféra nyomáson egyenletes hidrogéngáz áramban az elegyet kevertetjük. 4 óra elteltével a katalizátort kiszűrjük egy cellulóz mikrofilter segítségével, majd a szurletet vákuumban bepárolva, 990 mg nyersterméket kapunk. A nyersterméket 50 g Merck 9385 szilikagélen, eluensként metilén-diklorid, metanol és ecetsav 50:1:1 arányú elegyét használva, flash-kromatográfiával tisztítjuk, amikor is 790 mg, részlegesen tisztított termékhez jutunk. Másodszor is flash-kromatografálva, ezúttal 79 g Merck 9385 szilikagélen, toluol és ecetsav 6:1 arányú elegyével végezve az eluálást, 610 mg 3-[[(S)-2-[[ (2-fenil-etil) - -metoxi-foszfinil]-amino] -3-fenil-l-oxo - propil]-amino]-propánsavat kapunk. Szilikagél vékonyrétegen, toluol-ecetsav 6:1 eleggyel kromatografálva, R/=0.12. f) 3-[[(S)-2-[](2-Fenil-etil)-hidroxi-foszfinil] -amino] -3-fenil-l-oxo-propil] -aminő] -propánsav dilítiumsója 580 mg (1,39 mmól), az e) pontban leírtak szerint előállított propánsav-származékot feloldunk 7 ml vízmentes metilén-dikloridban, nitrogéngáz alatt hozzáadunk 366 mg (1,8 mmól) bisz(trimetil-szilil)-acetamidot, és 2 óra hosszáig szobahőmérsékleten kevertetjük az elegyet, majd vákuumban bepároljuk. A maradékot feloldjuk 5 ml vízmentes metilén-dikloridban, 468 mg (3,06 mmól) (trimetil-szilil)-bromidot adunk hozzá, és éjszakán át hagyjuk az elegyet szobahőmérsékleten keveredni. Ezután beadagoljuk 789 mg (7,8 mmól) trietil-amin, 4,3 ml metanol és 1,08 ml víz elegyét, 30 percig szobahőmérsék-18 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
