199152. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszfonát- és foszfonamid-endopeptidáz-inhibitorok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
199152 létén kevertetjük a reakcióelegyet, majd vákuumban bepároljuk. A maradékot mintegy 3 ml vízben feloldjuk, átengedjük 30 ml AG50W-X8, lítium fázisban levő gyantával töltött oszlopon, majd vízzel eluáljuk az oszlopot. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítve és bepárolva 940 mg fehér, szilárd halmazállapotú anyagot kapunk. A nyersterméket ezután egy 2,5X20 cm-es HP-20 gyantával töltött oszlopon, 500 ml víz és 500 ml acetonitril elegyével lineáris grádienst alkalmazva az elúcióhoz, kromatografáljuk, amelynek eredményeképpen 432 mg 3- f f(S) -2-[[(2- -fenil-etil) -hidroxi-foszfinil] -amino] -3-fenil-l-oxo-propil] -amino] -propánsav dilítiumsót kapunk, 250°C felett olvadó, fehér, szilárd halmazállapotú anyagként, [a]D=-12,0° (c= =0,5, metanol). A szilikagélen, izopropil-alkohol-víz-ammónium-hidoxid 8:2:1 eleggyel kifejlesztett vékonyréteg-kromatogramon a termék foltjának 0,43 R/-értéknél található a magja, és Rf=0,55-nél nyomokban szenynyeződés jelentkezik. 7. példa 3- [ [( S)-2- [ [(2-Fenil-etil )-hidroxi-foszf inil ]-amino] -1-oxo-propil] -amino] -propánsav dilítiumsója a) fí-Alanin-metil-észter-hidroklorid 16 g (180 mmól) ß-alanint 400 ml metanolban szuszpendálunk, állandó keverés közben -10°C-ra hűtjük, és nitrogéngáz atmoszférában becsepegtetünk 42,8 g (360 mmól) szulfinil-kloridot, miközben a hőmérséklet -5 és -10°C között tartjuk. Az adagolás befejeztével az elegyet hagyjuk felmelegedni szobahőmérsékletre, majd éjszakára félretesszük. Másnap vákuumban bepároljuk az elegyet, a maradékot kétszer egymás után dietil-éterrel ledörzsöljük, és dekantáljuk, aminek eredményeképpen 24,7 g 102—105°C-on olvadó ß-alanin-metil-0szter-hidrokloridot kapunk. Szilikagél vékonyrétegen, n-butanol-ecetsav-víz 4:1:1 eleggyel kromatografálva, Rp=0,44, a foltnak csóvája van. b) 3-[](S)-2-[(terc-Butoxi-karbonil)-amino] -1-oxo-propil] -amino] -propánsav-metil-észter 8,38 g (60 mmól) ß-alanin-metil^szter-hidrokloridot feloldunk 75 ml vízmentes N,N-dimetil-formamidban, és egymás után beadagoljuk az alábbi reagenseket: 11,35 g (60 mmól) N-(terc-butoxi-karbonil)-L-alanin, 9,18 g (60 mmól) 1-hidroxi-benzotriazol *H20 és 7,76 g (60 mmól) etil-diizopropil-amin. A reakcióelegyet jégfürdőbe helyezzük, és nitrogéngáz alatt 12,38 g (60 mmól) diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá, majd hidegen kevertetjük 1 óra hosszat, és éjszakán át hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni. Ezután a reakcióelegyet meghigitjuk 150 ml dietil-éterrel, a keletkezett diciklohexil-karbamidot kiszűrjük, és a szűrletet vákuumban bepároljuk. A maradékot feloldjuk 500 ml etil-acetátban, és az oldatot mossuk 100—100 ml 10%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, víz19 zel, 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, ismét vízzel, majd végül nátrium-klorid-oldattal, magnézium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A fenti módon eljárva 16,4 g nyersterméket kapunk, amelyet 400 g Merck 9385 szilikagélen, petroléter és aceton 2:1 arányú eleggyel eluálva, flash-kromatográfiával tisztítunk. A tisztított 3-[[(S)-2-[(terc-butoxi-karbonil)-amino] -1-oxo-propil] -amino] -propánsav-metil-észter fehér, 73—76°C-on olvadó anyag, amelynek tömege 12,4 g. Szilikagélen, petroléter-aceton 2:1 eleggyel kifejlesztve a vékonyréteg-kromatogramot, R/=0,37. c) 3- [ [ (S)-2-Amino-l-oxo-propil] -amino] - -propánsav-metil-észter-hidroklorid 12,3 g (44,8 mmól), a b) pontban leírtak szerint előállított metil-észtert feloldunk 132 ml 1,7 N ecetsavas hidrogénklorid oldatban, majd a lombikot lezárjuk, és az elegyet szobahőmérsékleten 2,5 órán át kevertetjük. Az oldatot ezután vákuumban bepároljuk, a maradékot feloldjuk toluolban és ismét bepároljuk, majd a párlási maradékot dietil-éterrel eldörzsöljük. Ilyen módon 10,3 g 3-[[(S)-2-amino-l -oxo-propil] -amino] -propánsav-metil-észter-hidrokloridot kapunk, amely egy olaj. Szilikagél vékonyrétegen, kloroform, metanol és ecetsav 5:1:1 arányú elegyével kromatografálva, a termék R/ értéke: 0,15. 1) 3-[ [(S)-2-[[(2-Fenil-etil)-metoxi-foszfinil] -amino] -1-oxo-propil] -amino] -propánsav-metil-észter Hozzávetőlegesen 20 mmól, a 6. példa d) pontjában közöltek szerint előállított klór-foszfonátot feloldunk 32 ml vízmentes metilén-dikloridban, az oldatot jégfílrdőbe helyezzük, és nitrogéngáz alatt hozzáadunk 4,21 g (20 mmól), a c) pontban leírtak szerint kapott metil-észtert, valamint 296 mg (2,0 mmól) 4- ( 1 -pirrolidinil)-piridint 50 ml vízmentes metilén-dikloridban oldva. Az így nyert oldathoz ezután hozzácsepegtetjük 5,17 g (40 mmól) etil-diizopropil-amin 20 ml vízmentes metilén-dikloriddal készített oldatát, 1 óra hosszat hidegen kevertetjük az elegyet, majd éjszakán át hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni. Másnap a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, a maradékot 500 ml etil-acetátban feloldjuk, és mossuk 100 — 100 ml 10%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, vízzel, 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, újból vízzel, végül nátrium-klorid-oldattal, majd magnézium-szulfáton szárítjuk. Az oldatot vákuumban bepárolva 4,3 g nyersterméket kapunk, amelyet 325 g Merck 9385 szilikagélen, eluensként etil-acetát és metanol 20:1 arányú elegyét használva, flash-kromatográfiával tisztítunk. A tisztított 3- [ [ (S) -2- [ [ (2-fenil-etil) -metoxi-foszfinil] -amino] -1-oxo-propil] -amino] -propánsav-metil-észter olaj, amelynek tömege 2,5 g. Szilikagél vékonyrétegen, etil-acetát-metanol 10:1 eleggyel kromatografálva, R/=0,39. e) 3- [ [(S)-2-[ [(2-Fenil-etil)-hidroxi-foszfinil] -amino] -1-oxo-propil] -amino] -propánsav dilítiumsója 20 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 11
