199152. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszfonát- és foszfonamid-endopeptidáz-inhibitorok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
199152 son, egyenletes hidrogéngáz áramban, szobahőmérsékleten kevertetjük az elegyet. 2 óra elteltével a katalizátort eltávolítjuk oly módon, hogy az oldatot egy cellulóz mikroszűrőn átszűrjük, majd vákuumban bepároljuk, aminek',eredményeként 1,45 g nyersterméket kapunk. A tisztítást 140 g Merck 9385 szilikagélen flash-kromatográfiával végezzük, metílén-diklorid, metanol és ecetsav 30:1:1 arányú elegyével végezve az eluálást. A kapott 3- - [ [ (S) -2- [ (benzil-metoxi-foszfinil)-oxij -3-fenil-l-oxo-propil]-amino]-propánsav egy olaj, amelynek tömege 1,28 g, szilikagél vékonyrétegen, kloroform-metanol-ecetsav 30:1:1 eleggyel kromatografálva, R/=0,23. Kisebb mennyiségű szennyezés jelentkezik R/=0,32- nél. d) 3-[ [(S)-2-[(Benzil-hidroxi-foszfinil)-oxi] -3-fenil-l-oxo-propil] -amino] -propánsav dilítiumsója 1,0 g (2,47 mmól), a c) pont alatt leírtak szerint kapott terméket feloldunk 10 ml acetonban, telítjük trimetil-aminnal, és éjszakán át, leforrasztott csőben, 80°C-on tartjuk az elegyet. A trimetil-amin feleslegének eltávolítása végett a csövet egy vízsugárszivattyúhoz csatlakoztatjuk, majd a reakcióelegyet vákuumban betöményítjük, és a visszamaradó anyagot 100 ml etiKacetát és 100 ml 0,1 N sósav keverékével összerázzuk. A szerves fázist elválasztjuk és- mossuk nátrium-klorid-oldattal, magnézium-szulfáton megszárítjuk, végül bepároljuk, aminek eredményeképpen 460 mg nyersterméket kapunk. További anyagmennyiség kinyerése végett a vizes fázist nátqum-kloriddal telítjük, háromszor 25 ml etil-acetáttal extraháljuk, majd az extra ktumokat egyesítve magnézium-szulfáton megszárítjuk és bepároljuk. Ilyen módon még 200 mg nyersterméket kapunk. Megismételve az eljárást további 170 mg nyersterméket különítünk el, amelyet azután az előzőekkel egyesítve, egy 2,5X20 cm-es, HP-20 gyantával töltött oszlopon kromatografálunk. Az eluálást 500 ml víz és 500 ml acetonitril 0-tól 100%-ig terjedő grádiensével végezzük, aminek eredményeképpen 720 mg részlegesen tisztított terméket kapunk. Az anyagot két részre osztjuk és mindkettőt feloldjuk metanolban, annyi vizet adunk hozzá, hogy még éppen oldat maradjon, majd hozzáadunk 1,84 ml (3,86 mmól) 2 N lítium-hidroxid-oldatot. A lítiumsókat külön-külön ugyanazon a HP-20 oszlopon kromatografáljuk 500 ml víz és 500 ml acetonitril elegyével, ismét grádienseiúciót alkalmazva. Ezután a terméket tartalmazó frakciókat mindkét kromatografálásból egyesítjük, vízben oldjuk, mikroszűrőn átszűrjük és liofilizáljuk. Az így nyert fehér, szilárd termék a 3- [ [.(S)-2- [ (benzil-hidroxi-foszfinil)-oxi] -3-fenil-l-oxo-propil] -amino] -propánsav dilítiumsója, amelynek tömege 623 mg, és amely 108-tól kezdődően 250°C-ot meghaladó hőmérsékleten olvad. [a]D=-31,0° (c=0,5, metanol). Szilikagél vékonyrétegen, kloroform-metanol-ecetsav 6:1:1 eleggyel kromato-11 grafálva, R/=0,35. Csekély mennyiségben tartalmaz szennyezést, amelynek R/-értéke 0,02. 4 példfl 3- [ [(S)-2- [ [(4-Fenll-batil)-hidroxi-foszfinil] - -oxij -3-fenil-l-oxo-propil] -amino] -propánsav a) (4-FenÍ)-butil)-foszfinsav 60 g (0,566 mól) nátrium-foszinát-H20 600 ml vízmentes etanolos szuszpenziójához 15 ml tömény kénsavat, 25,0 g (0,189 mól) 4- fenil-l-butént és 3,0 g 2,2’-azo-bisz(izobutironitri!) -t adunk, majd a kapott elegyet 6 óra hosszat visszacsepegő hűtő alatt forraljuk. Ezután további 2,0 g 2,2’-azo-bisz (izobutironitril)-t adunk az elegyhez, és még 16 órán át forraljuk visszacsepegő hütő alatt. Az elegyet lehűtjük és vákuumban bepároljuk, a maradékot felszuszpendáljuk 200 ml vízben, majd 50%-os nátrium-hidroxid-oldattal meglúgosítjuk és két részletben összesen 400 ml etil-acetáttal mossuk. A vizes fázist ezután tömény kénsavval megsavanyítjuk, etil-acetáttal extraháljuk, majd a szerves oldószeres oldatot mossuk telített nátrium-klorid-oldattal, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk, aminek eredményeképpen 34,5 g nyers (4-fenil-butil)-foszfinsavat kapunk. A fenti, 34,5 g nyers savat felvesszük 200 ml dietil-éterbén, és hozzáadunk 26,3 g (0,174 mól) 1-adamantil-amint 200 ml dietil-éterben oldva. A fehér csapadékot szűrjük, dietil-éterrel mossuk és vákuumban megszárítjuk, aminek eredményeképpen fehér, 192—2Ö0°C-on olvadó kristályok formájában kapjuk a (4-fenil-butil)-foszfinsav 1-adamantil-amin-sóját. A fenti 1-adamantil-amin-só 2,72 g-nyi mennyiségét (7,9 mmól) 75 ml etil-acetát és 50 ml 1 N sósav keverékével összerázzuk, az etil-acetátos oldatot mossuk 1 N sósavval és telített nátrium-klorid-oldattal, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A kapott sárga olaj (4-fenil-butil)-toszfinsav, amelynek tömege 1,46 g. b) 3-[[(S)-2-[[(4-Fenil-butil)-foszfinil]-oxi] -3-fenil-l-oxo-propil] -amino] -propánsav-benzil-észter 1,46 g (7,37 mmól) (4-feniI-butiI) -foszfinsav és 1,46 g (6 mmól) 3- [ [ (S) -3-fenil-2-hidroxi-l-oxo-propil] -amino] -proplnsav-benzil-észter 25 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készült oldatához 1,61 g (7,8 mmól) diciklohexil-karbodiimidet és 73 mg (0,06mmól) (dimetil-amino)-piridint adunk. A reakcióelegyet argongáz atmoszférában, szobahőmérsékleten, 80 percen át kevertetjük, majd megszűrjük. A szűrletet vákuumban betöményítjük és a visszamaradó anyagot feloldjuk 150 ml etil-acetátban. Az etil-acetátos oldatot egymást követően mossuk 5%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, vízzel és telített nátrium-klorid-oldattal, nátriumszulfáton szárítjuk és bepároljuk, aminek eredményeként 12 7 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
