198964. lajstromszámú szabadalom • Eljárás glikopeptid-antibiotikumok és ezeket tartaalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
23 HU 198964 B 24 fertőződtek. A kezelési eljárás abban áll, hogy az élőlénynek az A82 846 anlibioLikum célnak megfelelő hatásos dózisát adjuk he. Az A82 846 antibiotikum hatásos dózisa általában 0,5-100 mg között van testtömeg kilo- 5 grammonként. Az aktiv vegyület előnyös dózisa 1-60 mg testtömeg kilogrammonként. Egy felnőtt ember napi dózisa általában 50 mg és 1 g között van. Az antibiotikumot bejuttathatjuk a szer- 10 vezetbe napi egyszeri dózisban vagy egy nap többszöri dózisrészletbe elosztva. A kezelést általában hosszabb időtartam alatt alkalmazzuk, mely kiterjedhet például néhány naptól kezdve hat hétre is. A bevitt dózis 15 vagy a bevitt összmennyiség különböző tényezőktől függ, ilyenek: a fertőzés természete és súlyossága, a beteg életkora, általános egészségi állapota és az antibiotikummal szembeni érzékenysége, a fertőzést okozó 20 mikroorganizmus vagy mikroorganizmusok. Az antibiotikumos kezelés alkalmas módja az intravénás infúzió. Az eljárásban az antibiotikum alkalmas, oldható sóját sterilen fiziológiás közegben, például 5%-os dextrózol- 25 dalban oldjuk, és a nyert oldatot lassan intravénásán infuzáljuk. Alternativ eljárásként az intravénás infúziónak .piggyback" módszerét is alkalmazhatjuk. A találmány szerinti eljárással előállított 30 vegyülelek alkalmasak továbbá: 1) az állatok - például szárnyasok, sertés, juh vagy szarvasmarha - tápanyag-hasznosításának fokozására; 2) hústermelésre nevelt állatok - például szárnyasok, sertés, juh vagy szarvas-35 marha - növekedésének meggyorsítására; 3) tejelő állatok tejtermelésének fokozására. A tápanyag-hasznosítás fokozására és a növekedés meggyorsítására megfelelő mennyiségű A82 846 antibiotikumot juttatunk be megfelelő40 eleségbe elkeverve az állatba. Ez a mennyiség 2-200 g között változik 1000 kg takarmányra számítva. Szarvasmarháknak például 12-3000 mg-ot adunk be naponként. Tejelő kérődzők tejtermelésének fokozásához test-45 súlykilogrammonként 0,04-16 mg antibiotikumot adunk be naponként orális adagolás esetében (ez egy állatra számolva napi 25- -5000 mg mennyiséget jelent). A találmány antibiotikumjait célszerüöO premix formájában forgalmazni, amely premix a hatóanyag mellett egy vagy több, az állattenyésztésben alkalmazható hordozóanyagot is tartalmaz. Az elmondottak szemléltetésére az aláb-55 biakban példákat adunk meg. Az A82 846 komponensek HPLC analízisére az alábbi rendszereket alkalmazhatjuk: a) kationcserélő gyantán: 65 oszloptöltet: Zorbax SCX(4,6x150 mm oszlop; a Zorbax oszlopok az É. J. du Pont de Nemours ol Co., Inc. termékei; Delaware 19 898 USA); elunna: gradiens elúció - A:B komponens arányt 5 perc alatt 4:1-ről 1:9-re változtatjuk, majd ezen eluálunk 15 percen át; A - metanol/0,lM nátrium-dihidrogén-foszfát, 1:9, B = metanol/0,9M nátrium-dihidrogén-foszfát, 1:9, áramlási sebesség: 225 nm; retenciós idők: A82 846 = 6,6 perc, A82 846B = 8,9 perc, A82 846C = 9,5 perc. b) fordított fázisú oszlopon: oszloptöltet: Zorbax ODS 14,6x150 mm oszlop); eluens: grádiens elúció - 1% ammónium-dihidrogén-foszfát/acetonitril rendszerben az arány 20 perc alatt 95:5-ről 50:50-re változik; áramlási sebesség: 1,0 ml/perc, detektálás: 225 mm, retenciós idők: A82 846A = 7,3 perc A82 846B 2 7,6 perc, A82 846C = 8,0 perc. 1. példa Az A82 846 antibiotikumot rázott lombikban vagy lankfermentorban termelhetjük az AK2 846 törzset tenyésztve. a) Rázott lombikos termelés: liofilizált vagy folyékony nitrogén alatt tartott Noeardia orientalis oltjuk be a kővetkező te p talajt: glükóz oldható keményítő élesztőkivonat enzimmel hidrolizált kazein* kalcium-karbonát ionmentes vízzel *NZ Amine A, Sheffield N. Y. USA. NRRL 18 098 törzzsel összetételű inokulum 1.0% 2.0% 0.5% 0.5% 0.1% 1 literre feltöltve Chemical Co., Norvich, Sterilizálás előtt a táptalaj kémhatását nátrium-hidroxid oldattal pH=7,5-re állítjuk be. 2,5% ugart adva e táptalajhoz ferde agart vagy agarlemezeket öntünk és ezeket oltjuk be a megnevezett törzzsel. A beoltott táptalajt 30 °C hőmérsékleten inkubáljuk 10-14 napig. A kinőtt tenyészetet steril eszközzel lekaparjuk, hogy kiszabaduljanak a spórák és széttöredezzen a micélium. A lekapart tenyészetnek kb. egynegyedével oltunk be 53 ml fenti összetételű folyékony inokulum táptalajt. A beoltott táptalajt 250 ml-es Erlenneyer lombikban, 30 °C hőmérsékleten rázatj ik 24-48 órán át. Az 5,08 cm kitérésű rázógep forgási sebessége 250 fordulat percenként. 0,5 ml Így kapott oltóanyaggal oltunk be 50 ml, alábbi összetételű termelő táptalajt: 14
