198964. lajstromszámú szabadalom • Eljárás glikopeptid-antibiotikumok és ezeket tartaalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 198964 B A találmány tárgya eljárás új, a vankomicin-csoportba tartozó, glikopeptid antibiotikumok előállítására, közelebbről eljárás az A82 846 antibiotikum, illetve ennek az A82 846A, A82 846B A82 846C jelű alkotórészeinek előállítására új mikroorganizmustörzsek segítségével. Noha napjainkban már számos antibiotikum áll rendelkezésünkre, új antibiotikumok feltalálása a. humán gyógyászat fontos igénye. A vankomicin például kereskedelmi forgalomból beszerezhető, eddig is sok ember életét megmentő, sikeres antibiotikum, ennek ellenére alkalmazása nem kivént következményekkel, például hallószervi- és vesekárosodással járhat. Ezért kívánatosak az olyan antibiotikumok, melyek a vankomicinhez hasonló aktivitásúak, de jobb farmakokinetikai tulajdonságokkal vagy gyengébb mellékhatással rendelkeznek. Feltaláltuk, hogy a Nocardia oreintalis NRRL 18 098, NRRL 18 099 vagy az NRRL 18 100 törzs süllyesztett, aerob tenyészete asszimilálható szénforrást, nitrogénforrást és szervetlen sókat tartalmazó táptalajon értékes glikopeptid antibiotikumokat termelhet. Ezeket a glikopeptid antibiotikumokat önkényesen A82 846 jelöléssel láttuk el. Az A82 846 antibiotikumok szerkezetét tekintve hasonló a vankomicinhez, de fokozottabb aktivitást mutat in vivo és in vitro a Gram-pozitiv baktériumokkal szemben, ezen kívül a farmakokinetikai vizsgálatok szerint félélettartalma hosszabb a vankomicinénél. Az A82 846 alkotórészek az alábbi fizikai és fizikai-kémiai tulajdonságokkal jellemezhetők: A82 846A Molekulatömeg: 1556. Tapasztalati képlet: C73Hs9NioOz6Cl FAB-MS (tioglicerin): M+l; mért: 1557, 5803; a C73H90N10O26CI képlet alapján számolt: 1557,5716 (4. ábra). UV (viz), \max: 281 nm (£=5052), lúgositéssal 300 nm-re tolódik. IR(KBr): 1716, 1655, 1611, 1586, 1552, 1504, 1410, 1340, 1310, 1230, 1212, 1132, 1066, 1028 és 1015 cm-1 (1. ábra). NMR (dimetil-szulfoxid): 7. ábra. pKa (viz): 4,7; 9,5; (66%, dimetil-formamid): 5,5, 6,8, 7,9, 9,4, 12,3. (Látszólatos móltömeg: 1542). A82 846B Molekulatömeg: 1590. Tapasztalati képlet: C73H8SN10O26CI2 FAB-MS (tioglicerin): M+l, mért: 1591, 5315; a C73H89N10O26CI2 képlet alapján számolt: 1591,5327 (5. ábra). UV (viz) liu: 280 nm (£=5192), lugositva eltolódik 300 nm-re. IR(KBr): 1656, 1586, 1562, 1504, 1403, 1264, 1230, 1135, 1105, 1065, 1023 és 1018 cm'1 (2. ábra). NMR (dimétil-szulfoxid): 8. ábra. pKa (viz): 4,65 és 9,5. A82 846C Molekulatömeg: 1552. Tapasztalati képlet: C73H90N10O26 5 FAB-MS (tioglicerin): M+Na, mért: 1545,5998; a C73ll9tNio026Na képlet alapján számolt: 1545,5925 (6. ábra). UV (víz), aku> 280 nm (£—5198), lngositassal 300 nm-re tolódik. 10 IR(KBr): 3600 —*3004 (széles), 2999, 2991, 2950, 1687-----»1650 (széles), 1585, 1570, 1509, 1503, 1453, 1449, 1402, 1212, 1130, 1102, 1060, 1032 és 1014 cm*1 (3. ábra). NMR.'dimetil-szulfoxid): 9. ábra. 15 pKa (viz): 4,6 és 9,4. \z A82 846A, A82 846B és az A82 846C komponensek 6 n sósavval végzett hidrolízise után az aminosavanalízis aszparaginsav jelenlétére utal, emellett két széles csúcs je- 20 lenik meg glicin nyommal. A két csúcs aktinoidin- és vankomicin - aminosavaknak látszanak megfelelni, mindkettő jelen van a vankomicin típusú glikopeptidekben. Az összehasonlító NMR vizsgálatok azt 25 mutatják, hogy az A82 846A, A82 846B és az A82 846C mindegyike tartalmazza az (1) képlet.ű új amino-cukrot, a 4-epi-vankózamint (3-met.il-akózamint). Az A82 846A szerkezeti képlete megfelel 30 a vankomicinénak (C66H75N9O24CI2), de egy klóratommal kevesebbet tartalmaz és egy vankczamin (C7H14NO3) típusú további aminocukor elemeit tartalmazza. Az A82 846B szerkezeti képlete megfelel 35 az A82 846A szerkezeti képletének, de az utóbbi egy hidrogénatomját klóratom helyettesíti. Az A82 846C szerkezeti képlete megfelel az A82 846A szerkezeti képletének, de az 40 utóbbi klóratomját egy hidrogénatom helyettesíti. Az A82 846 komponensek a glikopeptidek új csoportját képezik, melyre a vankomicin molekula általánosan jellemző, de attól a 45 klórtartalomban és egy további vankózamin alegységben különböznek. Az A 82 846 komponensek a (2) általános képlettel jellemezhetők. Az A82 846 komponensek cukorcsoport- 50 jainak abszolút konfigurációi még nincsenek meghatározva. Az A82 846 és az egyes kompoenesei, az A82 846A, A82 846B és az A82 846C savaddiciós sókat képezhetnek. Az antibiotikumok 55 mindezen származékai részét képezik a találmánynak. Az A82 846 sókat például felhasználhatjuk az antibiotikum elválasztásánál és tiszti tilsánál. Ezenkívül sóképzéssel megnövelhet'’) a vízben való oldhatóság. 60 Az A82 846 és az egyes komponensei, az járásokkal állíthatjuk elő. Példaként említhetjük azokat a sókat, amelyeket a szokásos sóképzö eljárások segítségével szerves vagy szervetlen savakkal 65 állítunk elő; ilyen savak például a kén-, só-, 2 3
