198928. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tetrahidro-béta-karbolin származékok és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 198928 B 2 4. kísérlet Terápiás hatás CCLrgyel előidézett szubakut májkárosodással szemben Módszer: CCI4 és olívaolaj 1:1 arányú keverékét szubkután beadagoljuk hím Wistar patkányoknak (kor: 10 hét, súly: 200 - 230 g, egy csoport 5 patkányból áll), 1 ml/kg (CCI4 0,5 ml/kg) dózisban. Az adagolást folyamatosan végezzük, naponta egyszer, 4 napon át. Az utolsó CCI4 adagolás után 24 órával a vizsgálandó vegyület 0,5%os karboximetilcellulóz oldattal elkészített szuszpenzióját adagoljuk be orálisan az állatoknak, 100 mg/10 ml/kg dózisban, naponta egyszer, 4 napon át. 24 órával a vizsgálandó vegyület utolsó beadagolása után a vena cava inferior megnyitásával az állatokat elpusztítjuk és vérmintát veszünk. A májat azonnal eltávolítjuk. A vérből el- 5 különítjük a plazmát és a plazmában mérjük a GPT és GQT aktivitást. Ezenkívül az előbbiekhez hasonlóan mérjük a májban a Tg-t, Pl-t és Tch-t. Normál kontrollként olívaolajat adagolunk — 0,5 ml/kg dózisban — a CCI4 olívaolaj 10 elegy helyett, továbbá 0,5%-os karboximetilcellulóz oldatot adagolunk a vizsgálandó vegyület szuszpenziója helyett az előbbi dózisban. A CCI4 kontroll csoport CCI4-0S oldatot és 0,5% karboximetilcellulóz oldatot kap. 15 Az eredményeket az 5. táblázatban mutatjuk be. 5.táblázat Vizsgálandó vegyület CCI4 Normál csoport kontroll csoport GPT (K E.) 21,6i 5,6 58,1± 18,7 24,9± 1,3 GOT (K E.) 74,4± 11,6 128,1±33,8 79,4± 4,9 TG (mg/g) 36,0±5,5 75,7±6,0 9,3± 1,5 PL (mg/g) 38,8 i 1,0 36,0dt0,5 38,8± 1,1 Tch (mg/g) 3,95 i 1,0 4,81±0,12 2,92±0,15 Vizsgálandó vegyület: (lS,3S)-3-hidroximetil-l-metil-l,2,3,4-tetrahidro-beta-karbolin-2-ditiokarbonsavmetilészter 5. Kísérlet 35 Megelőző hatás a lipidperoxid képződéssel kapcsolatban 0,1 ml dimetilszulfoxidos oldatot — amely 3x10‘3M kísérleti vegyületet tartalmaz — hozzá- 40 adunk 2,4 ml 0,067M káliumfoszfát puffer oldat (pH 7,4) és 0,5 ml 10%-os patkányagy homogenizátum keverékéhez (a vizsgálandó vegyület végkoncentrációja ÍO^M). A keveréket 1 órán át inkubáljuk 37 °C-on, majd 1 ml 20%-os triklór- 45 ecetsav oldatot adunk hozzá és a tiobarbitursavas kolorimetriás módszerrel (J. Robak et al., Biochem. Pharmacol. 25, p. 2233, 1976) meghatározzuk a képződött lipidperoxid mennyiségét. A lipidperoxid képződésnek a vizsgálandó ve- 50 gyület által előidézett %-os gátlását a következő egyenlet szerint számítjuk ki: lipidperoxid képződés gátlása, % = 55 OD-diff. a vizsg. csőben*- (i------------------------------:--------------------)x!00 OD-diff. a kontr. csőben Megjegyzések: 60 *: a vizsgálandó vegyületet tartalmazó kémcső; **: a vizsgálandó vegyület oldata helyett azonos térfogatú dimetilszulfoxidot tartalmazó kémcső; OD-diff.-t a következőképpen számítjuk ki: (532 nm-n mért optikai sűrűség) — (600 nm-n mért optikai sűrűség) Az eredményeket a 6. táblázatban mutatjuk be. 6.táblázat A vizsgálandó vegyület száma A lipidperoxid képződés %-os gátlása 4. 94,4 6. 93,7 7. 93,6 9. 96,8 11. 91,9 12. 90,2 17. 93,1 18. 95,9 19. 94,1 21. 94,8 23. 96,2 24. 95,6 A vizsgálandó vegyületek azonosak az 1. kísérlettel kapcsolatban említettekkel. 8
