198836. lajstromszámú szabadalom • Liposzómák képzésére alkalmas készítmény
9 HU 198836 B 10 Az arginin-só oldatát a péphez adjuk, és 40 °C hőmérsékleten 1/2 órán ót, vagy addig, amíg enyhén zavaros oldatot kapunk, melegítjük. 3. példa Nagy mennyiségű üzemi gél- és liposzóma készítés i) Gél készítése: 50 g tojás foszfatid port (20. típus, Ashai Chemicals) adunk 20 g olajsavhoz (USA gyógyszerkönyvi minőség). A keverés után fehér pépet kapunk, amelyet 4 °C hőmérsékletre lehűtünk, és finom porrá őriünk. Ezt a port 20 g arginin és 500 g desztillált, ionmentesitett viz oldatához adjuk. A keveréket spatulával keverjük, miközben az oldatot mintegy 35 °C hőmérsékleten tartjuk, így segítve a foszfolipidek hidratálását. Ezt a gélt 4 °C hőmérsékleten tároljuk, vagy fagyasztjuk, és később hidratáljuk. ii) Liposzómák készítése: Az előzőekben készített, fagyasztva tárolt gélt szobahőmérsékletre melegítjük. Ez után 2 liter foszfáttal pufferolt konyhasó-oldatot (pH 7,4) adunk hozzá. Fehér, átlátszatlan liposzóma oldat képződik. 4. példa Liposzóma-képzés a gélből Homogén pépet készítünk 1,0 g dipáimitoil-foszfatidil-kolinból (DPPC) és 400 mg olajsavból. Ezután 300 mg arginint összekeverünk 10 ml foszfáttal pufferolt konyhasó-oldattal, 45 °C hőmérsékletre melegítjük, és a DPPC/olajsav péphez adjuk, így liposzómák képződnek. 5. példa Pre-liposzóma gél 1 gramm dipalmitoil-foszfatidil-kolint (DPPC) összekeverünk 400 mg olajsavval, hogy homogén pépet kapjunk. 300 mg arginint 2 ml vízzel oldódásig keverünk 45 °C hőmérsékleten. Az arginin oldatot összekeverjük a DPPC/olajsav péppel mintegy 45 °C hőmérsékleten, igy viszkózus gélt kapunk. A gélt foszfáttal pufferolt konyhasó-oldattal hígítva liposzómák képződnek. Koleszterint tartalmazó liposzómák 15 mg koleszterint összekeverünk 100 mg dipalmitoil-foszfatidil-kolinnal (DPPC) igy homogén port. kapunk. Ezután 23 mg okíjsavat adunk a porhoz és alaposan összekeverjük, így homogén pépet nyerünk. 30 mg arginint adunk 10 ml foszfáttal pufferolt konyhasó-oldathoz, 40 °C hőmérsékletre melegítjük, és hozzáadjuk a DPPC/koleszterin/olajsav péphez. A keveréket 40 °C hőmérsékleten keverve liposzómákat kapunk. 6. példa 7. példa Palniitinsavat tartalmazó liposzómák 250 mg dipalmitoil-foszfatidil-kolint (DPPC) összekeverünk 25 mg palmitinsavval, így egységes port kapunk. Ezután 80 mg olajsavat összekeverünk ezzel a porral, és 45 °C hőmérsékleten tartjuk állandó keverés mellett, amíg egységes ■ pép keletkezik. 100 mg arginint feloldunk 25 ml desztillált, ionmentesitett vízzel, és 45 °C hőmérsékleten, és addig keverjük, amíg egységes, homogén gél keletkezik. A gélt foszfáttal pufferolt konyhasó-oldattal tízszeresére hígítva liposzómák képződnek. 8. példa Tzosztearinsavat tartalmazó liposzómák 100 mg dipalmitoil-foszfatidil-kolint összekeverünk 50 mg izosztearinsavval, így egységes, homogén paszta képződik. Arginin-oldatot készítünk 50 mg arginint 2,0 mg desztillált, ionmentesitett vízben feloldva, és ezt hozzáadjuk az izosztearinsavas péphez, és 45 °C hőmérsékleten melegítjük. A keveréket addig kevertetjük, amíg tiszta gél képződik. Ebből liposzómákat foszfáttal pufferolt konyhasóoldattal való hígítással állítunk elő. 9. példa Oleoil-treonint tartalmazó liposzómák 125 mg dipalmitoil-foszfatidil-kolint és 75 mg oleoil-treonint összekeverünk és 40 °C hőmérsékleten melegítve pépet képezünk. Ezután 2 ml desztillált, ionmentesitett vizet adunk hozzá állandó keverés közben 40 °C hőmérsékleten. Tiszta gél képződik, amelyet foszfáttal pufferolt konyhasóoldattal hígíthatunk (pH 5) liposzómák előállítása céljából. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 7
