198741. lajstromszámú szabadalom • Eljárás citorodin S származékok, valamint ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 198741 B 2 A találmány tárgya eljárás citorodin S származékainak, különösen citorodin S immunoglobulin-komplexeinek, valamint ezeket tartalmazó gyógyszerkészítményeknek az előállítására. A találmány szerinti eljárással előállított citorodin S származékok szelektíven hatnak rákos sejtekre és így rákellenes szerekként alkalmazhatók. A 60-48 994 számú japán szabadalmi leírásból ismeretes, hogy a citorodin S a Streptomyces Y-ll 472 (DSM 2658 számon letétbe helyezve) által termelt nyers citorodin-elegy savas kezelésével állítható elő, és rákellenes aktivitással rendelkezik. Bár a citorodin S jelentős rákellenes aktivitással rendelkezik, mégis szükség van olyan szerek kifejlesztésére, amelyek szelektíven hatnak a rákos sejtekre és biológiailag hozzáférhetők. Kutatásokat folytattunk olyan citorodin S származékok kifejlesztésére, amelyek a rákos sejtekre nézve szelektivitásban felülmúlják a citorodin S-t, igy találtuk a citorodin S immunoglobulin-komplexeket, amelyek megtartják a citorodin S rákellenes aktivitását. A találmány tárgya tehát eljárás (I) általános képletű citorodin S származékok valamint ezeket tartalmazó rákellenes gyógyszerkészítmények előállítására. Az (I) általános képletben X jelentése -NH2, -NH-R3-C00H, -NH-R1--SH, -NH-R^COOCHz-Od (a), (f), (g),-NH-R^CO-NH-dgGh/n vagy -NH-R3--C0-NH-(IgG)i/n általános képletű csoport, ahol R1 1-4 szénatomos alkiléncsoportot jelent, R2 1-5 szénatomos alkiléncsoportot jelent, R3 1-7 szénatomos, adott esetben tiovagy aminocsoporttal helyettesített alkiléncsoportot jelent, IgG immunoglobulin maradékot jelent, n egész számot képvisel, értéke 1-15. A találmány értelmében úgy járunk el, hogy egy (II) általános képletű citorodin S-t alkélifém-ciano-bór-hidriddel redukálunk ammóniumsó jelenlétében. A kapott citorodin S származékot, ahol X jelentése -NH2, kívánt esetben (III) általános képletű maleimiddel reagáltatjuk, ahol R2 jelentése a fenti, igy olyan (I) általános képletű citorodin S származékot kapunk, ahol X jelentése (a) általános képletű csoport, és kívánt esetben ezt tovább reagáltatjuk egy (IV) általános képletű tiolozott immunoglobulinnal, ahol R2 és IgG jelentése a fenti, és n’ jelentése egész szám, értéke 1-20, így olyan (I) általános képletű citorodin S származékot kapunk, ahol X jelentése -NH-RZ-CO-NH-UgGh/n. A találmány szerinti eljárás ezen változata [a) eljárás] szerint előnyösen olyan (I) általános képletű citorodin S származékot állítunk elő, ahol X jelentése (g) általános képletű csoport. Olyan (I) általános képletű vegyületek előállítására, ahol X jelentése -NH-R’-SH vagy (f) általános képletű csoport, ahol R1 jelentése 1-4 szénatomos alkiléncsoport, R2 jelentése 1-5 szénatomos alkilén-csoport, IgG jelentése immunoglobulin maradék és n egész szám, értéke 1-15, egy (II) általános képletű citorodin S-t alkálifém-ciano-bór-hidriddel redulálunk egy NHz-R^SH általános képletű vegyület jelenlétében, ahol R1 jelentése a fenti és így olyan (I) általános képletű citorodin S származékokat kapunk, ahol X jelentése -NH-R^SH, és kívánt esetben a terméket egy (V) általános képletű immunoglobulin-maleimidáttal reagáltatjuk, ahol R2 és IgG jelentése a fenti, és n' egész szám, értéke 1-20. így olyan (I) általános képletű citorodin S származékot kapunk, ahol X jelentése (f) általános képletű csoport. [ b) eljárás] A találmány szerinti eljárás ezen változata szerint előnyösen olyan (I) általános képletű vegyületeket állítunk elő, ahol X jelentése (f) általános képletű csoport. A találmány tárgya továbbá eljárás olyan (I) általános képletű citorodin S származékok előállítására, ahol X jelentése -NH-R3-C00H, -NH-RZ-COO-CzHs, -NH-R3-CO-NH-(IgG)l/n vagy -NH-RZ-CO-NH-dgGh/n képletű csoport, ahol R2, R3, IgG és n jelentése a fenti. A találmány értelmében úgy járunk el, hogy egy (II) képletű citorodin S-t alkálifém-ciano-bór-hidriddel NH2-R3-COOH vagy NHz-RZ-COOCzHs általános képletű vegyület jelenlétében redukálunk, ahol R3 és R2 jelentése a fenti, és kívánt esetben a terméket egy (VI) általános képletű immunoglobulinnal reagáltatjuk, ahol IgG jelentése a fenti és n egész szám, értéke 1-15, így olyan (I) általános képletű citorodin S származékokat kapunk, ahol X jelentése -NH-R3-CO-NH-(IgG)i/n vagy -NH-RZ-CO-NH-dgGh/n. [c) eljárás] A találmány tárgya továbbá eljárás rákellenes gyógyszerkészítmények előállítására, amelyek hatóanyagként (I) általános képletű vegyületeket tartalmaznak. Az 1. ábra az 1. példa szerint előállított citorodin S aminoszármazékának tömegspektrumát mutatja. A 2. ábra a 3. példa szerinti citorodin S - immunoglobulin-komplex (n=5) és a citorodin S oszlopkromatográfiás elúciós mintáját mutatja 280 nm-nél. A baloldali csúcs a komplexhez, a jobboldali pedig az el nem reagált citorodin S-hez tartozik. A 3. ábra a 3. példa szerinti citorodin S - immunoglobulin-komplex (n=12) UV spektrumát mutatja. A 4. ábra a citorodin S (CYT) és a 3. példa szerinti citorodin S - nyúl immunoglobulin-komplex (n=7, CYT Rab IgG) sejtnövekedést gátló 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 f.O 65 3
