198741. lajstromszámú szabadalom • Eljárás citorodin S származékok, valamint ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
3 HU 198741 B 4 aktivitását mutatja L1210 sejtekkel szemben. Az 5. ábra a citorodin S (CYT), a 11. példa szerinti citorodin S - MA204 immunkomplex (CYT-MA204, n=4), a 3. példa szerinti citorodin S - nyúl immunoglobulin - komplex (CYT-Rab IgG n=2), és CEA elleni monoklonális antitest (MA204) sejtnövekedést gátló aktivitásét mutatja Colo 205 sejtekkel szemben. A 6. ábra a citorodin S immunoglobulin-komplex és aklacinomicin immunoglobulin komplex sejt növekedést gátló aktivitást mutatja L1210 sejtekkel szemben. A találmány szerinti eljárással előállított (I) általános képletéi vegyületekben R3 jelentése előnyösen olyan fenti jelentésű csoport, amely az ismert 1-7 szénatomos oC-aminosavak, ß-, Y- és E-aminosavak maradéka, vagy a ß-, és £-tiolaminok maradéka. R1 és R2 jelentése előnyösen metilén-, etilén- vagy propiléncsoport. Az IgG immunoglobulin maradék egy immunoglobulin maradéka, amelyből n aminosavat eltávolítottunk. Az (I) általános képletben IgG magába foglalja azokat az immunoglobulin maradékokat is, amelyekben az immunoglobulinba bevezetett tiolcsoportok (-NH-CO-R2- -SH) némelyike megmarad. Ez azért lehetséges, mert a (IV) általános képletű tiolozott immunoglobulin nem minden tiolcsoportja reagál a citorodin S származékkal, és igy néhány tiolcsoport elreagálatlan marad, igy a kapott (I) általános képletű vegyületben n értéke kisebb lehet, mint a (IV) ill. (VI) általános képletű vegyületekben n’ értéke. Immunoglobulin maradékként előnyösek a rákos sejtekkel specifikusan kapcsolódó antitestek. Az 1/n érték azt mutatja, hogy hány immunoglobulin molekula kapcsolódik egy citorodin S molekulával. Ez az érték lehet 1/1— -1/15. Ez azt jelenti, hogy 1-15 citorodin S molekula kapcsolódik egy immunoglobulin molekulával. Az olyan (I) általános képletű vegyületek, melyekben X jelentése -NH2, -NHR3- -COOH, -NH-RZ-COO-CzHs, -NH-R^SH, (a), (g) vagy (f) általános képletű csoport, immunoglobulin-komplexek előállításához intermedier vegyületek, amelyek a citorodin S rákellenes aktivitáséval természetesen rendelkeznek, és önmagukban is alkalmazhatók rákellenes szerként. A rákellenes hatóanyag és az immunoglobulin komplexének előállításakor általában úgy járunk el, hogy a rákellenes hatóanyagot az immunoglobulinhoz valamely bifunkciós térhálósítószer, kondenzálószer vagy térköztartó molekula segítségével kapcsoljuk. A kapcsolódás valamely funkciós csoporton keresztül, például amino-, karboxil- vagy tiolcsoporton keresztül történhet. A citorodin S azonban nem tartalmaz ilyen funkciós csoportokat, igy kémiailag módosítani kell, hogy amino-, karboxil- vagy Liolcsoportokat tartalmazó származékot kapjunk. Ilyen citorodin S származék előállítása céljából, amely megtartja rákellenes aktivitását, a szacharid lánc oxocsoportját alakítjuk ét aminocsoporttá. Az oxocsoport redukcióját általában lítium-alumínium-hidriddel (LLAIH4), nátrium-bőr-hidriddel (NaBHí) stb. végezzük. Az antraciklingyűrűn levő oxocsoportot érintetlenül hagyó, a szacharid láncon levő oxocsoportot érintő szelektív redukcióhoz nátrium-ciano-bór-hidridet (NaBCNH3) vagy lítium-ciano-bór-hidridet (LÍBCNH3) alkalmazunk. Ha ilyen redukálószert alkalmazunk, ammóniumsó vagy aminocsoportot tartalmazó szerves vegyület jelenlétében, a szacharid láncon levő oxocsoport szelektív módon aminocsoporttá redukálódik, igy a megfelelő citorodin S származékot kapjuk. Közelebbről (II) képletű citorodin S-t alakítunk ét olyan (I) általános képletű citorodin S származékká, ahol X jelentése -NH2, -NH-R^COOIl, -NH-R2-COO-C2ll5, -NH-R^SH, oly módon, hogy alkálifém-ciano-bór-hidrid segítségével redukciót végzünk egy ammóniumsó vagy NH2-R3-COOH, NH2-Rl-SH, NH2-R2- -COOC2H5 általános képletű, aminocsoportot tartalmazó szerves vegyület jelenlétében. Ammóniumsóként alkalmazhatunk ammónium-acetátot, ammónium-propionétot vagy ammóniumkloridot. Aminocsoportot tartalmazó, fenti általános képletű szerves vegyületként például az ismertetett oC-aminosavak említhetők, igy például lizin, cisztein, továbbá a ß-, •g— és E-aminosavak, igy például K-amino-vajsav, amino-ecetsavak, például glicin-etil-észter, és a tiolaminok, mint például amino-etán-tiol. Alkálifém-ciano-bór-hidridként például litium- (vagy nátrium-) -ciano-bór-hidridet alkalmazunk, A reakciót úgy hajtjuk végre, hogy a citorodin S-t és egy ammóniumsót vagy aminocsoportot tartalmazó szerves vegyületet vízzel elegyedő szerves oldószerben (például metanolban vagy etanolban) vagy olyan puffer-oldatban oldjuk, amely nem tartalmaz primer vagy szekunder aminokat, és amelynek pH-ja 8 (például foszfát- vagy borát-puffer vagy 2,4,6-trimetil-piridin-hidroklorid-puffer), majd az oldathoz alkálifém-ciano-bór-hidridet adunk szobahőmérsékleten vagy jeges hűtés közben. A reakcióelegyböl a terméket ismert módon nyerjük ki. Eljárhatunk például úgy, hogy a reakcióelegy pH-ját 8 értékre állítjuk, alkalmas szerves oldószerrel, például diklór-metánnal extraháljuk, ledesztilláljuk az oldószert, vagy preparativ HPLC-vel nyerjük ki a terméket. Az így előállított, citoi-odin S aminoszármazékokat, ahol X jelentése -NH2 egy (III) 5 13 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
