198734. lajstromszámú szabadalom • Eljárás rezofurin szk-ok glikozidjainak előállítására, eljárás glikozidázok és szacharid láncokat hasító enzimek aktivitásának meghatározására és diagnosztikumok enzimek kimutatására
t HU 198734 B 2 mól) ecetsavanhidridben szuszpendálunk és lassan, a nedvesség kizárása mellett addig melegítjük (kb. 110 °C-ra), amíg a reakció megindul. Ezután jeges vízzel lehűtjük, amíg a reakció be nem fejeződik és végül, az átalakulás teljessé té- 5 telére még 1 órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk. A reakcióelegyet kb. 70 °C-ra hűtjük le és 4 liter jeges vízbe öntjük. 60 perces kevertetés után a felülúszót leöntjük és a maradékot 500 ml diklórmetánban oldjuk. A diklórmetános fázist 10 egymás után vízzel, telített NaHCOj oldattal és vízzel kirázzuk és Na2S04 fölött szárítjuk. Az oldószer vákuumban való ledesztillálása után a maradékot 1,5 liter 1:1 etanolüzopropanol elegyből, A-szén hozzáadása mellett átkristályosítjuk. 15 Kitermelés: 166,2 g (az elméleti 89,8%-a) színtelen kristály; Op.: 120-125 °C; [a]20D~ +123,5°; Vékonyréteg-kromatográfia: (Merck) szilikagél 60 lemezek toluol/aceton 7/4 Rf = 0,52. 'H-NMR (DMSO-d6): 1,8-2,2 (s, 51H, COOCH3), 3,8 - 5,5 (m, 35H, H-l - H-6). Irodalom: Herzfeld, Chem. Bér. 13, 1880, p. 267. Az előzőekben leírtak szerint a következő peracetil-/?-D-maltozidokat szintetizáljuk, a maltopentaóz helyett azonos mennyiségű maltózt, maltotriózt, maltotetraózt, maltohexaózt és maltoheptaózt alkalmazva. Cukor O.p. (°C) Kitermelés H2°d (CHCl3y%) Rf (szilikagél 60:0 toluol/aceton 7/4 maltóz 159-160 90 + 62,5 0,64 maltotrióz — 85 + 100,3 0,59 maltotetraóz — 88 + 109,7 0,56 maltopentaóz 120-125 90 + 123,5 0,52 maltohexaóz 140-145 91 + 130,0 0,49 maltoheptaóz 160 82 0,46 30 b) Hidroxi-u-D-peracetil-maltopentaozid 150 g (0,096 mól)*peracetiI-/J-D-maltopenlaozidot 200 ml absz. tetrahidrofuránban oldunk. Kevertetés közben az elegyhez adunk 33 ml (0,3 mól) benzilamint és 2 órán át szobahőmérsékleten, nedvesség kizárásával kevertetjük. Végül vákuumban szárazra pároljuk, a maradékot 400 ml diklórmetánban oldjuk és a diklórmetános fázist egymás után 400 - 400 ml 5 n sósavval, vízzel, telített NaHC03 oldattal és vízzel mossuk. A szerves fázist ezután Na2S04 fölött szárítjuk és A- szénnel visszafolyatás közben forrásig melegítjük. Az A-szén kiszűrése után a szűrletet vákuumban szárazra pároljuk. A termék további tisztítás nélkül felhasználható a következő lépésben. Kitermelés: 140 g (az elméleti 97%-a). Vékonyrétegkromatográfia: F254 szilikagél 60 (Merck toluol/aceton 7/4) Rf = 0,42. ‘H-NMR (DMSO-d6): 1,8-2,2 (s, 48H, COOCH3), 3,8-5,5 (m, 35 H, H-l - H-6), 5,7 (s, 1H, OH). Irodalom: B. Helferich, W. Portz, Chem. Bér. 86,604(1953). Az előbbi eljárással analóg módon a következő maltozideket állítjuk elő: Kitermelés Rf szilika-gél 60,(to-Cukor luol/aceton 7/4) maltóz 96% 0,45 maltotrióz 96% 0,40 c) Peracetil-maltopentaozil-q-D-triklór-acetimidát 75 g (0,05 mól) hidroxi-a-D-peracetil-maltopentaozidot és 25 ml (0,25 mól) triklór-acetonitrilt 150 ml absz. diklórmetánban oldunk. Az oldatot 0 °C-ra hűtjük le, kevertetés közben részletekben 1,5 g (0,055 mól) nátriumhidridet adunk hozzá és végül 2 órán át szobahőmérsékleten a nedvesség kizárása mellett kevertetjük. A felesleges nátriumhidridet üvegszűrővel távolítjuk el. A szűrletet kovasavgél oszlopon vezetjük át (60 Merck, kb. 200 ml, 0 6 cm) és 2 liter etil-acetáttal utána mossuk az oszlopot. A szűrletet A-szénnel visszafolyató hűtő alatt forrásig melegítjük, majd az A-szenet kiszűrjük és a szűrletet vákuumban szárazra pároljuk. Kitermelés: 72 g (az elméleti 87,5%-a) színtelen, habszerű termék. Vékonyréteg-kromatográfia: F254 szilikagél 60 (Merck) Rf« 0,58. 13
