198510. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nor-kolánsav származékok és hatóanyagként ezen vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 2 A találmány tárgya eljárás új nor-kolánsav-származékok, és hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására. A találmány közelebbről az (1) általános képletű aminogl ükozid-szteroidok - a képletben R, jelentése hidroxilcsoport, & R2 jelentése hidrogénatom, vagy Rt és Rj együtt kémiai kötést jelentenek, R3 jelentése D- vagy L-sorozatba tartozó amino-dezoxi-, amino-didezoxi- vagy amino-tridezoxi-hexopiranozil-csoport, és R4 jelentése hidroxilcsoport, R5 jelentése hidrogénatom vagy R4 és R5 együtt kémiai kötést jelentenek - előállítására vonatkozik. A fenti hexopiranozilcsoport például 2-amino-2-dezoxi-hexopiranozil-, 3-amino-3-dezoxi-hexopiranozil-, 3-amino-3,6-didezoxi-hexopiranozil-, 3-amino-2,3,6-tridezoxi-hexopiranozil- vagy 4 amino-2,4,6-tridezoxi-hexopirazonil-csoport lehet, a D- vagy L-sorozatból. Az (1) általános képletben a hullámos vonal azt jelenti, hogy a szubsztituensek vagy a hidrogénatomok a gyűrűrendszer síkja fölött, vagy az alatt helyezkedhetnek el, ezáltal különböző abszolút konfigurációjú, optikailag aktív izomer formákat képezhetnek. Az optikailag aktív formák előállítása akár racemát, akár tiszta optikai antipódok formájában, a találmány tárgykörébe tartozik. A racemátokat ismert módszerekkel választhatjuk szét. Előnyösen úgy járunk el, hogy a racém elegyet optikailag aktív vegyillettel reagáltatva diasztereomereket állítunk elő. Optikailag aktív vegyületként például D- vagy L-borkősavat, D- vagy L-diacetil-borkősavat, D- vagy L-dibenzoil-borkősavat, D- vagy L-mandulasavat, D- vagy L-almasavat, D- vagy L-tejsavat, vagy különféle optikailag aktív kámforszulfonsavakat, például 0-kámfoiszulfonsavat használhatunk. Az optikailag aktív (1) általános képletű vegyületeket természetesen úgy is előállíthatjuk, hogy kiindulási anyagként optikailag aktív vegyületeket használunk. A glükozidos kötés a- vagy 0-kötés lehet. A találmány értelmében az (1) általános képletű vegyületeket úgy állíthatjuk elő, hogy egy (II) általános képletű nor-kolánsav-származékot — a képletben R4 és R5 jelentése a fent megadott — egy D- vagy L-sorozatba tartozó, védett amino-dezoxi-, amino-didezoxi- vagy amino-tridezoxi-hexopiranóz 1-halogén-származékával kondenzálunk, majd a kapott vegyidet védőcsoportjait eltávolítjuk. A védőcsoport eltávolítását előnyösen bázissal végezzük. A kondenzálást előnyösen megfelelő szerves oldószerben — például kloroformban, metilén-kloridban, benzolban, toluolban, acetonitrilben vagy nitro-metánban - végezzük, katalizátor jelenlétében. Katalizátorként előnyösen ezüst-oxidot, -karbonátot vagy -trifluor-metán-szulfonátot, Fetizon-reagenst [Celite szűrési segédanyagra (Aldrich) felvitt ezüst-karbonát, lásd M. Fetizon és M. Golfier: C. r. hebd. Séanc. Acad. Scie. Paris, 267(C), 900 (1968)], higany-danidot vagy -bromidot használunk. A reakciót célszerűen dehidratálószer — például drierit vagy molekulaszűrő - jelenlétében játszatjuk le, vagy azeotrópos desztillálóit végzünk, a reakdóhőmérséklet -5 és 100 2 °C között változhat. A reakdóidő tág határok között változhat, általában 1-8 óra elegendő a reakaó lejátszódásához. A védőcsoport eltávolítására használt bázis előnyösen nátrium-, kálium- vagy bárium-hidroxid vagy -metoxid, vagy trietil-amin lehet. Areakdót szobahőmérsékleten játszathatjuk le, a reakdóidő néhány óra és néhány nap között változhat. A fenti eljárás eredményeként általában olyan (1) általános képletű vegyületet kapunk, amelynek képletében Rj jelentése hidroxilcsoport és R2 jelentése hidrogénatom. A fenti vegyületeket dklizálással olyan (1) általános képletű vegyületekké alakíthatjuk, amelyek képletében Rí és R2 együtt kémiai kötést jelentenek, laktongyűrűt képezve. A dklizálást hidrogén-kloridban, pH 1—2 értéken, szobahőmérsékleten végezhetjük, a reakdóidő 3-5 óra lehet. A kiindulási vegyületként használt (11) általános képletű nor-kolánsav-származékok és az amino-dezoxi- vagy amino-tridezoxi-hexopiranózok ismert vegyületek, vagy ismert módon előállíthatok. Az (1) általános képletű aminoglükozid-szteroidok spedfikusan gátolják az ouabain (G-strofantin) kötődést anélkül, hogy a (Naí-K*)-ATP-áz-aktivitást gátolnák, fenti hatásuk következtében gyógyászati készítmények hatóanyagaként használhatók, magas vérnyomás kezelésére. (1) általános képletű aminoglükozid-szteroidok ouabaint helyettesítő képességének vizsgálata a spedfikus ouabain-kötő (Na+-K*)-ATP-áz receptorokon, a (Na+-K*)-ATP-áz enzimaktivitás gátlása nélkül, in vitro A (Na^-K’j-ATP-ázban feldúsult mikroszoma-frakdót kutyavese külső velőjéből állítjuk elő Jorgensen [Biochem. Biophys. Acta 356, 36-52 (1974)] módszere szerint. A 0,5 pg proteint tartalmazó, részlegesen tisztított enzimet 110 pl, 3 mmól/1 MgCl2-ot, 3 mmól/1 EGTA-t, 80 mmól/1 Hepes-puffert (pH 7,4) és 2 mmól/1 Y2 -P32sATP-t tartalmazó elegyben 37 °C-on 15 percen keresztül inkubáljuk, növekvő koncentrádóban összehasonlító vegyületként ouabain vagy aminoglükozid-szteroidok jelenlétében. A reakdót 10% végkoncentrádóban 0,1 mól/1 koncentrádójú hideg perklórsav hozzáadásával leállítjuk, és hozzáadunk 0,5 ml 20 vegyes%-os aktívszén-szuszpenziót. A szuszpenziót centrifugáljuk és a felülúszóban lévő 3 2 p, mennyiségét folyadékszdntilládós számlálóval mérjük [Mall F. és munkatársai: Biochem. Pharm. 33(1). 46—53 (1984)]. A különböző koncentrádóban jelenlévő aminoglükozid-szteroidok és az ouabain hatását a teljes (Na+-K,)-ATP-áz %-os gátlásában fejezzük ki, és kiszámítjuk az ICS 0 értékeket. Az (1) által óios képletű vegyületek a fenti vizsgálatban inaktívaknak bizonyultak. b) (3H)-ouabain kiszorítása emberi vörösvértestekből A vizsgálatot Erdmann E. és munkatársai [Arzneim Forsch. 34(11), No. IC, 1310 (1984)] módszere szerint végezzük. 198.510 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
