198493. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új pirazolo[3,4-d]-pirimidin származékok és az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 198493 B 2 Vegyület neve kitermelés % Olvadáspont (oldószer/elegy) (’C) a) 4-(N-allil-ciklohexil-amino)- l-(2,3-dihidroxi-propil)-1 H-pí razolo [3,4-d] p irimidi n b) 4-[N-(3-trifluormetil-benzil)-ciklopentil-amino]-l-(2,3-dihidroxi-propil)-lH-pirazoIo-[3,4-d]pirimidin c) 4-[N-(2,5-dimetil-benzil)-ciklopentil-amino]-l-(2,3-dihidroxi-propil)-lH-pirazoIo[3,4-d]-pirimidin d) 4-[N-(2-furil-metil]-ciklopentil-amino]-1 --(2,3-dihidroxi-propil)-lH-pirazolo[3,4-d]-pirimidin e) 4-[N-(tiofén-2-il-metiI)-ciklopentil-amino]-l-(2,3-dihidroxi-propil)-lH-pirazolo[3,4-d]-pirimidin f) 4-[N-(3-metoxi-benzil)-ciklo-pentil-amino]-l-(2,3-dihidroxi-propil)-lH-pirazolo[3,4-d]-pirimidin g) 4-[N-(3-metil-benzil)-ciklo-pentil-amino]-l --(2,3-dihidroxi- propil)-lH-pirazolo[3,4-d]-pirimidin h) 4- [N-(3-bróm-benzil)-ciklopentil-amino]-1--(2,3-dihidroxi-propil)-lH-pirazolo[3,4-d]-pirimidin i) 4-[N-(5-klór-2-metoxi-benzil)-ciklopentil-amino]-l(2,3-dihidroxi-propil)-lH-pirazolo-[3,4-d]pirimidin 38 olaj 33 122-123 (éter) 35 60-70 amorf (diklór-metán/metanol) 40 olaj 44 olaj 41 olaj hidroklorid: 175-176 (etil-acetát) 65 80-82 (éter) 51 107-108 (éter) 58 132-134 (éter) 5. példa 4-[N-(2£-Dimetil-benzil)-ciklopentil-amino]-l-(tet rahidro-furán-2-il)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin 7,8 g (35 mmól) 4-klór-l-(tetrahidro-furán-2-il)lH-pirazolo[3,4-d] pírimidin, 20,3 g (100 mmól) N(2,5-dimetiI-benzil)-ciklopentil-amin és 100 ml n-butanol elegyét 16 órán át visszafolyatás közben forraljuk. Ezután az elegyet bepároljuk, a maradékot vízben felvesszük, diklór-metánnal extraháljuk, az extraktumot híg ecetsavval, majd híg, vizes nátriumhidrogén-karbonát-oldattal mossuk, szárítjuk, bepároljuk, és szilikagéllel kromatografáljuk. Eluensként diklór-metán-metanol (98:2) elegyet alkalmazva 5,0 g cím szerinti terméket kapunk (kitermelés: 37 %), mely éterből történő eldörzsölés után 173-174 *C hőmérsékleten olvad. 6. példa Az 5. példában leírtak szerint eljárva, 4-klór-l(tetrahidro-furán-2-il)-l-pirazolo[3,4-d] pírimidin és a különböző szekunder aminok reakciójával az alábbi vegyületeket állítjuk elő: Vegyület neve kitermelés % Olvadáspont (oldószer/elegy) (*C) a) 4-(N-allil-ciklohexil-amino)-1 -(tetrahidro-furán-2-il)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin 29 olaj b) 4- [N-(2-furil-metil)-ciklopentil-amino]-1 --(tetrahidro-furán-2-il)-lH-pirazolo[3,4-d]pirimidin 33 85-87 (ligroin/éter) c) 4-[N-(tiofén-2-il-metil)-ciklopentil-amino]-1 --(tetrahidro-furán-2-il)- lH-pirazolo[3,4-d]-pirimidin 46 120-122 (éter) d) 4-[N-(3-bróm-benzil)-ciklopentil-amino]-1 --(tetrahidro-furán-2-il)-lH-pirazolo[3,4-d]-pirimidin 44 118-119 (ligroin) Kísérleti jelentés Passzív szenzibilizált tengerimalac-tüdőparenchima-csíkok antigén-okozott konstrikciójá nak gátlása in vitro(szerv-fürdő) A találmány szerinti vegyületeket in vitro a következőképpen vizsgáltuk: Pirbright fehér tengeri malacokét tarkóütéssel elkábítunk, és kivéreztetünk. A tüdőket in situ Krebspufferrel, pH=7,4, messzemenően vérmentesre öblít- 60 jük. Ezután kivesszük a tüdőt, csíkokra daraboljuk (20x4x4 mm) és a csíkokat 1 órán át, szobahőmérsékleten 1:50 hígításű homológ anti-ovalbumin-antiszérummal passzív-ra szenzibílizáljuk, majd Krebs-féle pufferrel egyszer mossuk. 65 Az antiszérumot előzőleg Davies szerint[Davies, G.E.,T.P.Johnstone, Quantitative studies on anaphylaxis in guinea pigs passzively sensitizes with ho- 55 mologous antibody. Inter. Arch.Allergy 41, 648-654 (1971)] ugyanabból a tengerimalac-törzsből állítottuk elő, olvabumin (2xkristályosított) ismételt injektálásával, komplett Freud-féle adjuváns hozzáadása mellett. Az antiszérumot alkalmazásáig -18'C-on hígítás nélkül tároltuk. Ezt követően a tüdőcsíkokat egyenként 10 ml-es vízfürdőkben 1,2 g-os előfeszítéssel izometrikus jelfogóra függesztettük. Ezután a fürdőket Krebs-féle pufferrel töltöttük
