198482. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4-(3H)-oxo-5,6,7,8-tetrahidropirido-(2,3-d)pirimidin származékok és ezen vegyületeket tartalmazó gyógyszerek előállítására
1 HU 198482 B 2 Ezeket a diasztereoizomereket mechanikus ütőn, például kromatográfiás módszerrel választhatjuk szét, mégpedig olyan eredménnyel, hogy egyik izomer sem tartalmazza a másikat, és optikai tisztaságuk nagyobb mint 95 %. Eljárhatunk úgy is, hogy az (I) általános képletú diasztereoizomer vegyületek keverékét egy aszimmetriás savval kezeljük, és így az (I) általános képletű vegyületekből sót készítünk. Ezután a kapott diasztereoizomer sókat egy vagy több ffakcionált kristályosítás útján szétválasztjuk, és a kationos csoportból a szabad bázist - legalább az egyik só esetében - úgy szabadítjuk fel, hogy a sót bázissal kezeljük, majd a védőcsoportokat lehasítjuk. A sóban jelenlevő kationt egy külön lépésben szabadítjuk fel a védőcsoportok lehasítása előtt vagy után, vagy pedig ezekkel párhuzamosan, abban az esetben, ha az ilyen csoportok bázikus körülmények között, például a lúgos hidrolízis körülményei között lehasadnak. Alkalmas aszimmetriás savak például a 10-kámfor-szulfonsav, kámforsav, a-bróm-kámforsav, mentoxi-ecetsav, borkősav, diacetil-borkősav, almasav, pirrolidon-5-kafbonsav és más, hasonlók egyes enantiomerjei. Az (I) általános képletű vegyületekkel (önmagukban vagy kombinációkban) daganatos betegségeket kezelhetünk, mégpedig olyanokat, amelyeket korábban metotrexáttal kezeltek. Ilyen daganatos betegségek például a korio-karcinóma, leukémia, a női emlő adenokarcinómája, a fejen és a nyakon előforduló bőrrák, az elszarusodó sejtes vagy kis-sejtes tüdőrák és különféle limfoszarkómák. így például jellemző modellkísérletekben (a hatás vizsgálata 72 órás kísérletben CCRF-CEM sejtsorokkal, egy, emberi T- sejtes eredetű leukémiával szemben) az N-[4-(N’-[2- amino-4(3H) -oxo-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[2,3-d]pirimidin-6-il-metil]-amino)- benzoil]-L-glutaminsav ICso-értéke 0,0052 - 0,0079 (ig/ml (2,2 x 10"7 mól) volt. E vegyület tiszta diasztereoizomerjeinek IC50- értékei: 0,0026 pg/ml, illetve 0,0027 jig/ml. Ugyanebben a kísérletben az N-[4-(N’-[2-amino-4(3H)-oxo-5,6,7,8-tetrahidro-pirido [2,3-d]pirimidin-6-il-metil]N’-formil-amino)-benzoil]-L-glutaminsav ICso-értéke 0,011 pg/ml volt. Másrészt ugyanebben a kísérletben az 5-deaza-fólsav viszonylag hatástalan volt. A találmány szerinti vegyületeket gombás megbetegedések és pikkelysömör kezelésére is használhatjuk. A jelen találmány szerinti vegyületeket orálisan (szájon át) vagy előnyösen parenterálisan (a gyomor- és bélrendszer megkerülésével), önmagukban vagy más daganatellenes szerekkel, szteroidokkal és más, hasonlókkal kombinálva adagolhatjuk a daganatos betegségben szenvedő, és ilyen kezelésre szoruló emlősnek. Az adagolás parenterális- útjai lehetnek a következők: intramuszkuláris (izomba való), intratekális (gerinccsatornába való), intravénás (vénába való) vagy intraarteriális (artériába való) adagolás. E vegyületeket nagyjából ugyanúgy adagolhatjuk, mint a metotrexátot, de a más hatásmód miatt a metotrexátnál szokásos dózisokhoz képest nagyobb dózisokban alkalmazhatjuk. Leukovorin-rescue (-mentés) nem szükséges. A dózisok nagyságát és az adagolás gyakoriságát az adott daganattól, a beteg állapotától és a kezelésre adott válaszreakciótól függően kell meghatároznunk, de a dózisok általában a következők: körülbelül 10 mg és körülbelül 100 mg közötti mennyiség naponta, 5-10 napon át, vagy pedig 250 - 500 mg egyszeri napi dózis, amelyet időnként, például 14 naponként megismételünk. Az orális gyógyszerformák dózisegységenként 1 - 10 mg hatóanyagot tartalmazó tabletták és kapszulák lehetnek. A parenterális célra olyan, izotóniás (a vérrel azonos ozmózisnyomású) konyhasó-oldattal készült elegyeket használhatunk, amelyekben 20 - 100 mg/ml hatóanyag van jelen. A találmány szerinti eljárást a továbbiakban - a találmány oltalmi körének szűkítése nélkül - példákkal szemléltetjük. 1. példa N-[4-(N'-[2-Acetamido-4(3H)-oxo-pirido[2,3-d]pi rimidin-6-il-metil]-aminó)-benzoil] -glutaminsav-dietil-észter 800 mg 2-acetamido-6-formil-4(3H)-oxo-pirido[2,3-d]pirimidin [Taylor és munkatársai, J. Org. Chem., 48, 4852 (1983)], 55 ml ecetsav és 1,2 g p-amino-benzoil-L-glutaminsav-dietil-észter elegyét 5 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Utána hozzáadunk 0,19 ml bór-hidrid : trietil-amin-komplexet, majd az elegyet 40 percig szobahőmérsékleten, és ezután 10 percig 60"C hőmérsékleten keveijük. Utána hagyjuk lehűlni, és az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A kapott maradékot feloldjuk 90 ml metanolban, és az oldatot megszűrjük. A kiszűrt szilárd anyagot 20 ml metanollal és 360 ml dietiléterrel mossuk. A szűrleteket egyesítjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot flash-kromatográfiás (gyors-kromatográfiás) módszerrel [lásd Still és munkatársai, J. Org. Chem., 43, 2923 (1978)] tisztítjuk, szilikagélen, eluensként kloroform és metanol 97 : 3 arányú elegyét használjuk, fly módon 1,08 g N[4-(N’-[2-acetil-amino-4(3H)-oxo-pirido[2,3-d]pirimi din-6-il-metil]-amino)-benzoil]-L-glutaminsav-dietilésztert kapunk. 2. Példa N-[4-(N’ -(2-Acetamido-4(3H)-oxo-5,6,7,8-tetrahid ro-pirido[2,3-d]pirimidin-6-H-metil]-amino)-benzoil] -L-glutaminsav-dietil-észter 340 mg N-[4-(N’-[2-acetil-amino-4(3H)-oxo-pirido[2,3-d]pirimidin-6-il-metil]-amino)-benzoil]L-gluta minsav-dietil-észter 80 ml metanol és 40 ml ecetsav elegyével készült oldatát beletesszük egy Adams-féle hidrogénező készülékbe, hozzáadunk 55 mg platinaoxid katalizátort, és az elegyet negyedórán át 4,2.105 Pa nyomáson hidrogénezzük. Utána a katalizátort kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékot szilikagélen, flash-kromatográfiás módszerrel tisztítjuk, oly módon, hogy kloroform és metanol elegyével gradiens eluciót végzünk, a két oldószer aránya 97 : 3-tól 95,5 : 4,5-ig változik. A kromatografálás során 20 ml térfogatú frakciókat szedünk. A 62 — 73. frakció egy mellékterméket tartalmaz, mégpedig a 2-acetil-amino-6-metil-4(3H)-oxo-pírido-[2,3-d]pirimidint. A 74 - 88. frakció 15,4 mg kívánt terméket, vagyis N-[4- (N’-[2-acetil-amino-4(3H)-oxo-5,6,7,8-tetrahidro-piri do[2,3-d]pirimidin-6-il-metil]-amino)benzoil]-L-gluta minsav-dietil-észtert tartalmaz. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
