198394. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szinergens vírus ellenes gyógyszerkészítmény előállítására
1 198 394 2 vid időn belül adagoljuk, hogy a kellő szmergens vírusellenes hatást elérjük. Eljárhatunk tehát úgy, hogy vírusfertőzés esetén emlősökben, az emlősnek adagolt vírusellenes vegyület vírusellenes aktivitását amely vírusellens vegyület káros anyaggá és/vagy vírus DNS-polimeráz inhibitorrá történő átalakulása egy vírus-indukálta enzimtől függ, oly módon fokozzuk, hogy az emlősnek a nukleozid transzport inhibitor hatásos, nem-toxikus, hatásfokozó mennyiségét adagoljuk a vírusellenes vegyület adagolásával egyidőben, előtte vagy utána. A találmány szerinti kombináció előnye az, hogy a vírusellenes vegyület adott dózisa esetén jobb vírusellenes hatást érhetünk el, mint a vírusellenes vegyületet önmagában alkalmazzuk, ezáltal javul a vegyület terápiás indexe. Így például a kombináció használható olyan esetekben, amikor egyébként viszonylag magas dózis lenne szükséges a vírusellenes vegyületből, és amikor toxicitási problémák adódnának. A kombináció kis dózisai lehetővé teszik, hogy a pácienseknek kényelmesebb legyen és kevesebb kellemetlenséget okozzon a vegyület alkalmazása. A találmány szerinti kombináció különösen alkalmas Herpes simplex 1 és 2 típusú fertőzés kezelésére vagy megelőzésére, de alkalmas más Herpes vírusfertőzés kezelésére is, így például Varicella zoster, Cytomegalovirus és Epstein-Barr vírus fertőzések esetén. Vírusellenes vegyületként (I) általános képletű — ahol R hidrocilcsoport, X oxigénatom, Y hidroxicsoport — vegyületet alkalmazhatunk, amely in vivo foszforileződik vírus-indukálta enzimek hatására. Ezek a vegyületek általában vírus eredetű kináz enzimek szubsztrátjai, amelyek foszforilezik a vegyületet először monofoszfáttá, amely ezután tovább foszforileződik (szintén kináz enzim hatására, amely lehet vírus- vagy sejt-eredetű) először difoszfáttá, végül trifoszfáttá, amely ezután a DNS-polimeráz inhibitoraként hat. Olyan vírusellenes vegyület alkalmazása, amely szelektíven foszforileződik inkább vírus eredetű enzimek által, mint sejt eredetű enzimek által, a foszforilezett anyag nagyobb koncentrációját eredményezi a fertőzött sejtekben, mint a nem fertőzöttekben és így szelektív vírusellenes aktivitást eredményez, Az is előnyös, ha olyan vírusellenes vegyületet alkalmazunk, amely nem csak vírus-DNS-polimeráz inhibitor, hanem a vírus DNS láncába beépülve lánc-terminátor is, és adott esetben a vírus-DNS-polimeráz iniaktivátora. Az acyclovir, ahogyan már említettük, vírussal kódolt timidin-kináz segítségével (de sejt timidinkináz segítségével semmilyen mértékben) monofoszfáttá alakul, amely sejtenzimek hatására difoszfáton keresztül trifoszfáttá alakul. Az acyclovir DNS lánc-terminátor is. Az acyclovir és más analóg vírusellenes nukleozidok hatásmechanizmusát Clerque ismerteti a ’’New Trends in Antiviral Chemotherapy!!, Archives Internationale de Physiologie et de Biochimie, 1979,87, (2), 353-395. oldalon. A találmány szerinti kombinációban alkalmazott vírusellenes vegyület az acyclovir. Az acyclovir helyett alkalmazható még a 9-[(2-hidroxil-(hidroxi-metil)-etoxil]-metil -guanin, valamint a fenti vegyületek olyan származékai, amelyek in vivo ezekké alakulnak, pl. 2-amino-9-[(2-hidroxi-etoxi)-metil]-metil-2,6-diamino-purin és 2-amino-9-[(2-hidroxi-etoxi)-metil]purin (ezek azonban nem képezik a találmány tárgyát). A fenti vírusellenes vegyületek például az 1 523 865 és 2 104 070 sz. nagy-britanniai szabadalmi leírás és a 108 285 sz. európai szabadalmi leírás szerinti módon állíthatók elő. Nukleozid-transzport inhibitorként bármely nem-toxikus nukleozid-transzport inhibitort alkalmazhatunk. Ilyen vegyületek a dilazep, tetrahidro-14-l,4-diazepin-l,4(5H)dipropanol-bisz (3,4,5-trimetoxi-benzoát dipiridamol, 2, 2’,2”,2”’-(4,8-dipiperidino-pirimido [5,4-d] pirimidin-2,6- diil-dimitrilo)-tetra etanol 6-[(4-nitro-benzol)-tioj-9-((3-D- ritofuranozil)-purin, papaverin, mioflazin, hexobendin és lidoflazin vagy ezek fiziológiailag elfogadható sói és észterei. Ezek a vegyületek kémiai szerkezet szempontjából változatosak, de mindegyik rendelkezik azzal a biokémiai hT aid on sággal, hogy nukleozid-transzport inhibitorok. Az említett nukleozid-transzport inhibitorok például a következő helyeken ismertetett módon állíthatók elő: 6-> 2-hidroxi-5-nitro-benzil)-tioinozin J. Med. Chem. (1975), 18, 968; 4- litro-benzil-tioguanozin Pharmacol. Ther. (1981), 12, 515; 6 -2-hidroxi-5-nitro-benzil)-tioguanozin J. Med. Chem. (1975), 18, 968; 6-benzil-tioinozin 3 074 929 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás; 2’ dezoxi-6-benzil-tioinozin (a vegyület új); A 2’-dezoxi-ó-benzil-tioinozint a következőképpen állítjuk elő: 1 g 6-benzil-tiopurint és 200 g 2’-dezoxi-inozint összekeverünk 0,1 1 10 mmól/l-es kálium-foszfát (pH=7,4) és 18 ml n-propanol elegyével. Az elegyhez hozzáadunk 100 egység tisztított purin-nukleozid-foszforilázt, és 35 *C-on keverjük. 21 nap múlva a szilárd fázist leszűrjük, és a szűrletet 35 ml Dowex-2-formájú gyantát tartalmazó oszlopon kromatografáljuk, miután a pH-t ammónium-hidroxiddal 10,5-re állítottuk. Az oszlopot vízzel eluáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük, az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a maradékot P-2 gyantát tartalmazó oszlopon (2,5x90 cm) kromatografáljuk, eluálószerként 30 térf % n-propanolt tartalmazó vizet használunk, így 0,351 g terméket kapunk monohidrát formájában. UV 7,4 pH-nál: 293 nm Elemanalízis a C17HlgN4S0s.H20 képletre: szímított: C 54,24 H 5,35 N 14,88 talált: 54,30 5,39 14,81 dipiridamol (807826 sz. nagy-britanniai szabadalmi leírás); dilazep (1107470 sz. nagy-britanniai szabadalmi leírás); hexobendin (3267103 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás); lidoflazin (1 055 100 sz. nagy-britanniai szabadalmi leírás), mioflazin (0068544 sz. európai szabadalmi leírás); papaverin (Popp. F.D. és McEwen W.E., J. Am. Chem. Soc. /1957/, 79, 3773-3777); 6-[ (4-nitro-benzil)-tio]-9-03-Z)-ribofuranozil)-purin (Brajeswar P., Chem. M.F., Paterson A.R.P., J. Med. Chem. /1975/, 18, No. 10. 968-973). Az ismert módon előállított” kifejezés a jelen találmány elsőbbségi napja előtt publikált eljárásokat öleli fel. A találmány szerinti eljárás értelmében a fenti kombinációt úgy állítjuk elő, hogy a fenti vírusellenes vegyületet egy nukleozid-transzport inhibitorral kombináluk, 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
