198215. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a TAN-749 antibiotikummal rokon szerkezetű vegyületek előállítására
37 HU 198215 B 38 400 mg 46a. vegyületet 14 ml 2 n hidrogén-klorid-oldatban oldunk, és az elegyet 3 órén keresztül szobahőmérsékleten tartjuk. A reakcióelegyet 350 ml HP-20 töltetű oszlopon kromatografálva tisztítjuk, az eluálást 10%-os 5 vizes metanollal végezzük. Az egyesített frakciókat liofilizálva 250 mg 46b. vegyületet kapunk, színtelen por formájában. IR-spektrum Oux (KBr) cm*1: 1690, 1650, 1530; 10 Elemanalizis eredmények a C16H29N7O3 • ■ 2HC1 • HíO összegképlet alapján: számított: C = 41,73%, H = 7,26%, N = 21,39%; talált: C = 41,73%, H = 7,49%, N = 21,13%. 15 45. példa (2. reakció vázlat) 10,7 g 17. vegyületet 100 ml diklór-metánban oldunk, és az oldathoz 6,0 g WSC-t adunk. 1 óra múlva a reakcióelegyet vizzel 20 mossuk, és vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk. Az oldatot csökkentett nyomáson koncentráljuk, és a koncentrátumot 250 g szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, az eluálást etil-acetát és 25 hexán 5:1 térfogatarányú elegyével végezzük. 10 g 47. vegyületet kapunk, színtelen, tűs kristályok formájában, olvadáspontja 156-157 °C. IR-spektrum (KBr) cm*1: 30 3310, 1733, 1680, 1535; Elemanalizis eredmények a C17H26N2O5 öszszegképlet alapján: számított: C = 60,34%, H = 7,74%, N = 8,28%; talált: C = 60,59%, H = 7,52%, N = 8,00%. 35 46. példa (3. reakció vázlat) A. 250 mg 47. vegyület 10 ml diklór-metánnal készült oldatéhoz 0,6 ml trimetilén-diamint adunk, és az elegyet Bzobahómérsékle- 40 ten 1 órén keresztül keverjük. Az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradókhoz 50 ml vizet adunk, és a vizes oldat pH-ját 1 n hidrogén-klorid-oldattal 2,0-re állítjuk, majd 25 ml etil-acetáttal mossuk. A 45 vizes fázishoz 1 n nátrium-hidroxid-oldatot adva a pH-t 5,5-re állítjuk, majd az oldatot kb. 40 ml-re koncentráljuk. A koncentrátumot 20 ml kb. 150-290 um szemcseméretű Diaion HP-20-szal töltött oszlopon kromatogra- 50 fáljuk. Az oszlopot 80 ml vízzel mossuk, majd 60 ml 50%-os vizes metanollal és 100 ml 50% metanolt tartalmazó 0,005 n hidrogén-klorid-oldattal frakcionéltan eluáljuk. Az egyes frakciókat nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással analizáljuk, mozgó fázisként 55% metanolt tartalmazó 0,01 mól/1 koncentrációjú foszforsavoldatot (pH 3) használunk. Az egyetlen csúccsal rendelkező frakciókat öszszegyűjtjük és koncentráljuk, majd liofilizáljuk. 278 mg 48a. vegyületet kapunk, hidrogén-klorid-só formájában, fehér porként. Elemanalizis eredmények a C20HÍ6N4O5 • HC1 • ■ 0,5H20 összegképlet alapján: számított: C = 52,73%, H =8,38%, N = 12,47%, Cl = 7,76%; talált:' C = 52,45%, H = 8,36%, N = 12,23%, Cl = 7,74%. B. 240 mg 48a. vegyület 2 ml trifluor-ecetsawal készült oldatát 30 percen keresztül szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, és a maradékot éterrel kezeljük. A kapott fehér f>ort 60 ml vízben oldjuk, és 20 ml Amberlite IRA-402-vel (Cl* típus) töltött oszlopon étfolyatjuk. Az oszlopot vizzel mossuk és eluáljuk. A mosófolyadékot és eluátumot egyesítjük és koncentráljuk, majd liofilizáljuk. 207 mg 48b. vegyületet kapunk, di(hidrogén-klorid)-só formájában, fehér porként. IR-spektrum (KBr) cm"1: 3260, 2930, 1645, 1550; Elemanalizis eredmények a CisH2sN403 • • 2HC1 • 0,5H2O összegképlet alapján: számított: C = 46,18%, H = 8,07%, N = 14,39%, Cl = 18,17%; talált: C = 45,69%, H = 7,92%, N = 14,21%, Cl = 17,98%. 47. példa A találmány szerinti eljárással előállított vegyúletből kapott új TAN-749-származék (48b. vegyület) TAN-749-hez \nszonyltott nagyobb stabilitásét az alábbiakban bizonyltjuk. Az 1. vegyület 2 mg/ml koncentrációjú vizes oldatát azonos térfogatú 0,1 raól/1 koncentrációjú foszfát-pufferrel (pH 2, 5, 7 és 9) hígítjuk. Az egyes oldatokat 80 °C-on 4 órán keresztül rázzuk, majd az oldatot nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással analizáljuk, töltetként YMC-Pack A-312-t (Yamamu-a Chem. Láb., Japán), mozgó fázisként 15% metanolt tartalmazó 0,01 mól/1 koncentrációjú foszfát-puffért (pH 3) használunk. A fenti vizsgálatot a 48b. vegyülettel megismételjük. Az eredményeket a 3. táblázatban ismertetjük. 3. táblázat: TAN-749A (1. vegyület) és származéka (48b. vegyület) stabilitásának összehasonlítása Vegyület száma Idő (óra) Kimutatható maradék (%) pH 2,0 pH 5,0 pH 7,0 pH 9,0 1. 0 100 100 100 100 0,5 102 102 96 70 1,0 105 104 90 46 21
