198215. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a TAN-749 antibiotikummal rokon szerkezetű vegyületek előállítására

29

HU 198215 B

30

láljuk, a maradékot vízben szuszpendéljuk, és pH-jét 1 n hidrogén-kloriddal 2,5-re állítjuk, majd Amberlite XAD-2 tölteten oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk. A 3036-os vizes etanollal élűéit frakciókat egyesítjük, koncentráljuk és liofilizóljuk. 570 mg 33a. vegyületet kapunk, hidrogén-klorid formájában.

569 mg hidrogén-klorid-só formájában lévő 33a. vegyületet 3 ml trifluor-ecetsavban szuszpendálunk, és a szuszpenziót szobahőmérsékleten 1 órán keresztül keverjük. Az oldószert csökkentett nyomáson ledesztillóljuk, és a maradékot vízben oldjuk, majd Amberlite XAD-2 tölteten oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk. A vízzel és 536-os etanollal eluált frakciókat egyesítjük, koncentráljuk és liofilizáljuk. 390 mg 33b. vegyületet kapunk, di(trifluor-ecetsav)-só formájában. IR-spektrum \W (KBr) cm’1:

3290, 1670, 1545, 1200;

Elemanalizis eredmények a C23H40N6O6F6 •

• 2CF3COOH • H2O összegképlet alapján:

számított: C = 43,67%, H = 5,97%, N = 11,32%; talált: C = 43,25%, H = 6,21%, N = 11,02%.

32. példa

295 mg 1. vegyület 8,0 ml dimetil-formamiddal készült oldatához 97 mg szorbinsavat és 0,149 ml trietil-amint adunk. Az elegyhez jeges hűtés közben 116 mg HOBT-t és 178 mg DCC-t adunk, majd 30 percen keresztül keverjük. Az elegyet szobahőmérsékleten 20 órán keresztül továbbkeverjük, majd a dimetil-formamidot csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékhoz 20 ml vizet adunk, és pH-ját 1 n hidrogén-klorid-oldattal 1,9-re állítjuk. Az elegyet 12 ml etil-acetáttal háromszor moBSuk. A vizes fázis pH-ját 1 n nátrium-hidroxid-oldattal 6,4-re állítjuk, majd csökkentett nyomáson kb. 1 ml térfogatra koncentráljuk. A koncentrátumot 20 ml, 150- -290 |im szemcseméretű Diaion HP-20-szal töltött oszlopon kromatografáljuk, az eluálást 100 ml vízzel, 60 ml 20% metanolt tartalmazó vízzel, 100 ml 50% metanolt tartalmazó vízzel, majd 100 ml 50% metanolt tartalmazó 0,01 n hidrogén-klorid-oldattal végezzük, 20 ml-es frakciókat szedünk. Az egyes frakciókat nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással analizáljuk, mozgó fázisként 25% acetonitrilt tartalmazó 0,01 mól/1 koncentrációjú foszfát puffert (pH 3,0) használunk. Az egyetlen csúccsal rendelekező frakciókat egyesitjük és koncentráljuk, majd liofilizáljuk. 190 mg 34. vegyületet kapunk, hidrogén-klorid-só formájában, fehér porként. Elemanalizis eredmények a C12H33N5O4 • HC1 •

• 3,0H2O összegképlet alapján:

számított: C = 49,45%, H = 7,90%, N = 13,73%, Cl = 6,96%;

talált: C = 49,44%, H = 7,33%, N = 14,14%,

Cl = 6,95%.

IR-spektrum Cw (KBr) cm-1:

3290, 1640, 1540,;

UV-spektrum (H2O):

X«I = 263 nm (E“ = 852); xH-NMR-spektrum (90 MHz, DzO)6:

1,91 (2H, m), 2,06 (6H, ml, 2,70 (2H, d J = 7 Hz), 2,85 (2H, t, J = 7 Hz), 3,52 (2H, dx2, J = 4, 6 Hz), 3,74 (2H, t, J = = 7 Hz), 3,97 (1H, m), 4,67 (1H, m), 6,3 (tH, m), 7,32 (1H, dm, J = 15 Hz), 7,75 (1H, dd, J = 15, 10 Hz).

33. példa

307,3 mg 8. vegyületet, 103 mg szorbinsavat és 0,16 ml trietil-amint dimetil-formamidban oldunk. Az elegyhez jeges hűtés közben 124 mg HOBT-t éB 189 mg DCC-t adunk, egymás után. A reakcióelegyet 30 percen keresztül keverjük, majd szobahőmérsékleten 16 órán keresztül továbbkeverjük. A reakcióelegyet koncentráljuk, 25 ml híg hidrogén-klorid-oldattal pH 1,8 értékre állítjuk, majd háromszor 13 ml etil-acetáttal mossuk Az elegy pH-ját 1 n nátrium-hidroxid-o.dattál 6,7-re állítjuk. Az elegyet koncentráljuk és a koncentrátumot 20 ml 150- -290 pír szemcseméretű Diaion HP-20 tölteten oszlopkroraatográfiásan tisztítjuk, az eluálást 100 ml vízzel, 60-60 ml 10, 20, és 50%-os vizes metanollal és 60 ml 50% metanolt tartalmazó 0,01 n hidrogén-klorid-oldattal végezzük, egymás után, 20 ml-es frakciókat szedünk. Az egyes frakciókat nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással analizáljuk, mozgó fázisként 26% acetonitrilt tartalmazó 0,01 mói/1 koncentrációjú foszfát-puffért (pH 3,0) használunk. Az egyetlen csúccsal rendelkező frakciókat egyesítjük ób koncentráljuk, majd liofilizóljuk. 302 mg 35. vegyületet kapunk, hidrogén-klorid-só formájában, fehér porként.

Elemanalizis eredmények a CziH3:N504 • HC1 •

• 1,5H20 összegképlet alapján: számított: C = 51,79%, H = 8,49%, N = 14,38%, Cl = 7,28%;

talált: C = 51,58%, H = 8,51%, N = 14,10%,

Cl = 7,48%.

IR-spektrum \lmax (KBr) cm-1:

3290, 3080, 2930, 1620, 1550, 1430; UV-spektrum (H2O):

Xm&x = 262 nm (E« = 600);

Hl-NMR-spektrum 90 MHz, DzO)é:

1,07 (3H, t, J = 6 Hz), 1,51,51 (4H, m),

1,86 (4H, m), 2,04 (3H, d, J = 5 Hz), 2,47 (2H, t, J = 6 Hz), 2,70 (2H, dx2, J = 6, 7 Hz), 2,87 (2H, t, J = 6 Hz), 3,41 (2H, dx2, J = 4, 7 Hz), 3,74 (2H, t, J = 7 Hz),

3,9 (1H, m), 4,65 (1H, m), 6,12 (1H, d, J 15 Hz), 6,50 (2H, m), 7,34 (1H, dm, J = 15Hz).

34. példa

186 mg mono(hidrogén-klorid)-só formájában lévő 35. vegyületet 100 ml 0,003 mól/1 koncentrációjú foszfót-pufferben (pH 7,0) oldunk. Az oldathoz 10 g Pseudomonas acidovarans IFO 13582 sejtet adunk, és az elegyet

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

17