198215. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a TAN-749 antibiotikummal rokon szerkezetű vegyületek előállítására
25 HU 198215 B 26 21. példa 280 mg nátriumsó formájában lévő 20. vegyületet 140 ml 0,03 mól/1 koncentrációjú foszfát-pufferoldatban (pH 3) oldunk, és hozzáadunk 14 g Pseudomonas acidovorans baktériumsejtet, majd az elegyet 37 °C-on 20 órán át rázzuk. A reakcióelegyet centrifugáljuk, a kapott felülúszó pH-ját 7,0-re állítjuk, majd koncentráljuk. A kapott koncentrátumot 140 ml 150-290 /um szemcseméretű Diaion HP- 20 töltetű oszlopon kromatografáljuk, az eluálást 900 ml vízzel, és 500 ml 5%-os vizes metanololdattal végezzük. A kapott frakciókat nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással analizáljuk, mozgó fázisként 25% metanolt tartalmazó 0,01 mól/1 koncentrációjú foszforsavoldatot (pH 3) használunk. Az egyetlen csúccsal rendelekezó frakciókat egyesitjük és koncentráljuk. A koncentrátumot liofilizáljuk. 145 mg 25. vegyületet kapunk, fehér por formájában. Optikai forgatóképesség: [cCI^d = +10,3 ° (c = 0,48, viz) ElemanalizÍ8 eredmények a C11H22N2O5 öszszegképlet alapján: számított: C = 50,37%, H = 8,45%, N = 10,68%; talált: C = 49,91%, H = 8,54%, N = 10,57%. 22. példa 390 mg 21. vegyület 200 ml 0,03 mól/1 koncentrációjú foszfát-pufferoldatban (pH 7,0) szuszpendálunk. A szuszpenzióhoz 40 g Pseudomonas acidovorans baktériumsejtet adunk, és az elegyet 37 °C-on órán át rázzuk. A reakcióelegyet centrifugáljuk, a felülúszó pH-ját 7,0-re állítjuk, majd koncentráljuk. A kapott koncentrátumot 140 ml 150- -290 pm szemcseméretű Diaion HP-20 töltetű oszlopon kromatografáljuk, az eluálást. 700 ml vízzel és 700 ml 5%-os vizes metanololdattal végezzük, 140 ml-es frakciókat szedünk. A kapott frakciókat nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással analizáljuk, mozgó fázisként 25% metanolt tartalmazó 0,01 mól/1 koncentrációjú foszfátoldatot (pH 6,3) használunk. A21 egyetlen csúccsal rendelkező frakciókat egyesítjük és koncentráljuk. A kapott koncentrátumot liofilizáljuk. 94 mg 26. vegyületet kapunk, fehér por formájában. Optikai forgatóképesség: [oC]21»5» = +19,3 0 (c = 0,45, víz) Elemanalizis eredmények a C12H24N2O5 • ■ 0,5H2O összegképlet alapján: számított: C = 50,51%, H = 8,83%, N = 9,82%; talált: C = 50,53%, H = 8,71%, N = 9,82%. 23. példa 9,6 mg hidrogén-klorid-só formájában lévő 6. vegyületet 0,95 ml 1 n nátruim-hidroxid-oldatban oldunk, és az oldatot szobahőmérsékleten 60 órán át keverjük. A reakció befejeződése után a reakcióelegyet hígítjuk és nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással analizáljuk, mozgó fázisként 60% metanolt tartalmazó 0,01 mól/1 koncentrációjú foszforsavoldatot (pH 3) használunk. 3,8 mg 17. vegyületet kapunk, a fenti vizsgálat szerint. 24. példa 111 mg hidrogén-klorid-só formájában lévő 10. vegyületet 3,7 ml vízben oldunk, és az oldathoz 188 mg nátrium-hidroxidot adunk. A reakcióelegyet ezután 60 °C-on közel 16 órán át keverjük. A reakcióelegy pH-ját sósavoldattal 6,7-re állítjuk, vízzel 13 ml térfogatra hígítjuk és nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással kvantitative analizáljuk, mozgó fázisként 70% metanolt tartalmazó 0,01 mól/1 koncentrációjú foszforsavoldatot (pH 3) használunk. Vizsgálataink szerint 9 mg 25. vegyületet és 32 mg 20. vegyületet kapunk. 25. példa 443 mg di(hidrogén-klorid)-só formájában lévő 1. vegyület 5 ml nietanollal készült oldatához 86 pl 37%-os formaldehidoldatot adunk, és az elegyet 1 órán keresztül keverjük, majd hozzáadunk 0,5 ml ecetBavat és 95 mg rátrium-ciano-bór-hidridet. A reakcióelegyet 5 órán keresztül keverjük, majd éjszakén keresztül állni hagyjuk. A kapott elegyet csökkentett nyomáson koncentráljuk, és a koncentrátumot vízben oldjuk, majd Amberlite XAD-2 oszlopon kromatografálva tisztítjuk. \ vízzel élűéit frakciókat egyesítjük, és aktívszénnel, majd Amberlite IRA-401 (Cl~— -típus) gyantával töltött oszlopon átfolyatjuk, és a vizes oldatot koncentráljuk. A koncentrátumot liofilizálva 101 mg 27. vegyületet kapunk. di(hidrogén-klorid)-só formájában, fehér porként. IR-spektrum \>nax (KBr) cm-1: 1690, 1650, 1545, 1435; Elemanalizis eredmények a Ci6H2uN503 • 2HC1 összegképlet alapján: számított: C = 46,60%, H = 7,58%, N = 16,98%; talált: C = 46,60%, H = 7,29%, N = 16,78%. 26. példa 443 mg di(hidrogén-klorid)-só formájában lévő 1. vegyület 5 ml metanollal készült oldatához 154 pl trietil-amint adunk, majd 150 pl 37%-os formalinoldatot, és az elegyet 30 percen keresztül keverjük, a kapott elegyhez 0,5 ml ecetsavat és 126 mg nátrum-ciano-bór-hidridet adunk, és az elegyet 2 órán keresztül keverjük. Az így kapott elegyhez újabb 63 mg nátrium-ciano-bór-hidridet álunk, és 1 órán keresztül keverjük, majd egy éjszakán keresztül állni hagyjuk. A reakcióelegyet a 25. példában leírtak szerint feldolgozva 342 mg 28. vegyületet kapunk, di(hidrogén-klorid)-só formájában. IR-spektrum ^aut (KBr) cm"1: 1690, 1650, 1545; Elemanalizis eredmények a C17H31N5O3 • • 2HC1 ■ 0.5H2O összegképlet alapján: 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 15
