198172. lajstromszámú szabadalom • Javított eljárás aminosav- és peptid-aril-amidok előállítására
7 198 172 8 4. példa 74NTM-bem ii oxi-karbonil-L-lizü amino}~4-metilkurnarin előállítása 1. lépés: 7-(N2-t-butil-oxi-karboml-N6-benzil-oxíkarbonihL-lizil-3í»ino)-4-metil-kumarin 7.6 g (0,02 mól) N2-t-butil-oxJ-karbonil-Né benzil-oxi-karboníl-L-lizint [G. W. Anderson és A. C. McGregor: J. Am. Chem. Soc. 79, 6180—6183 (1957)], 3,5 g (0,02 mól) 7-amino-4-meíii kumarint és 1,9 ml (0,022 mól) foszfor-trikloridot reagáltatünk 40 inl plridinbcn (víztartalom <0,2%) 0,5 órán át -15 °C-on és 3 órán át 15—20 °C-on, majd a reakcióelegyet bepároljuk. A maradékot feloldjuk 50 ml etil-acetátban, mossuk háromszor 10 ml 1 n sósavval és háromszor 10 ml vízzel, nátrium-szulfáton szárítjuk, majd bepároljuk. A maradékot feloldjuk 20 ml etil-acetátban és dietil-éíerrel (kb. 50 ml) kristályosítjuk. 8,6 g (80%) cím szerinti terméket kapunk. Op.: 138-140 °C R* = 0,80-0,85. íajp = —21,3° (c = 1, metanolban). Elemzési eredmény a C^HasC^Nj (537,59) kép-: ietre vonatkoztatva: számított: C% = 64,79; H%=6,56; N%=7.82; talált: C% = 64,85; H% = 6,5; N%=7,75. 2. lépés: 7'(N6-benzil-oxi-karbonil-L-lizil-amino)-4-metil-kumarin 8.06 g (0,015 mól) 7-(N2-t-butil-oxi-karbonil-N6- benzil-oxi-karbonil-L-lizil-amino)-4-metil-kumarint (4. példa, 1. lépés) az 1. példa 2. lépésében leírt módon átalakítunk. 5,8 g (88%) cím szerinti terméket kapunk. Op.: 149-150 °C. R? = 0,3-0,4. [a]p = —6° (c ~ 1, dimetilformamidban). Elemzési eredmény a C24H27O5N3 (437,48) képletre vonatkoztatva: számított: C% = 65,89; H%=6,22; N%=9,60; talált: C% = 66,15; H% = 6,5; N%=9,75. 5. példa 7-{N2-Benzil-oxi-karbonil-L-glutam-5-il-amino)-4- metil-kumarin-hemihidrát előállítása 1. lépés: 7-(N2-benzil-oxi-karbonil-l-meíil-észter- L-glutam-5-il-amino)-4-metil-kumarin 1,75 g (0,01 mól) 7-amino-4-metil-kumarint feloldunk 10 ml piridinben (víztartalom <0,2%) és — 15 °C-on hozzáadunk 0,87 ml (0,01 mól) foszfortriklorídot, valamint 2,95 g (0,01 mól) N2-benzi! oxikárbonil-L-glutaminsav-l-metil-észtert [G. H. L. Nefkens és R. J. F. Nivard: Rec. Trav. Chim. 83, 199— 207 (1964)] 10 ml piridinben oldva. A re akció elegye t keverjük 0,5 órán át -15 ’C-on és 2 órán át 15— 20 °C-on, majd bepároljuk. A maradékot feloldjuk 50 ml etil-acetátban, mossuk háromszor 10 ml 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és háromszor 10 ml vízzel, majd betöményírjük kb. 10 ml térfogatra. A kapott szuszpenziót 10 ml etil-acctát ás i0 ml dieiil-áter elegyével hígítjuk, szűrjük, kétszer 10 ml dietil-éterrel mossuk és szárítjuk. 3,2 g (70%) cím szerinti terméket kapunk. Rf = 0,60-0,65. 2. lépés: 7-(N2-benzil-oxi-karl)Oíü!-L-glutani-5-iiamino)-4-metil-kumarin-hemi!iidrát 2,26 g (0,005 mól) 7-(N2-benzil-oxi-karbonil-lmetil-észter-L-glutam-5-ii-amino)-4-inetil-kumarint (5. példa, 1. lépés) szuszpendálunk 20 mi metanolban, hozzáadunk 6 ml 2n nátriuni-hidroxidot, és keverjük 4 órán át szobahőmérsékleten. A reakcióelegyet 50 ml vízzel hígítjuk, kétszer 20 ml ctii-acctáltal kirázzuk, ecetsawal semlegesítjük, és kb. 40 ml-re töményítjük. A kapott vizes oldatot 3 n sósavval pH = 3-ra savanyítjuk. A kivált anyagot kiszűrjük, vízzel mossuk és vákuum exszikkátorban szárítjuk. 1,8 g (82%) cím szerinti terméket kapunk. Op.: 126-128 °C. R? = 0,25-0,30. Í»)q — -11,1° (c = 1, dimetilformainidban). Elemzési eredmény a C23H72O7N2 ■ 1/2 H20 (*47,43) képletre vonatkoztatva: S/ámított: C%= 61,74; H% — 5.18; N%=6,26; talált: C% = 62,44; H%= 5,35; . N% = 6,2. A 7-(N2-benzil-oxi-karbonil-L-glutam-5-il-amino)-4- metil-kumarint az alábbiak szerint használjuk fel egy transzglutamináz-peptid-szubsztrátnak, a 7-(N2- benzil-oxi - karbonü-L-glutam-l -il-glicin -5-il-arnino)-4- metil-kumarínnak az előállítására: 0,9 g (0,002 mól) 7-(N2-benzil-oxi-karboni.i-L- glutam-5-il-amíno)-4-metii-kumarin-hemihidrátot (5. példa), 0,28 g (0,0022 mól) glicin-metil-észter-klórhi iratot, 0,31 ml (0,0022 mól) trietil-amint és 0,9 g (0,0036 mól) l-etoxi-karbonil-2-etcxi-l,2-dihidrokinolint reagáitatunk 4 ml dimetilformamidban 20 °C kerüli hőmérsékleten 20—24 órán át, majd a reakcióekgyet bepároljuk. A párlási maradékot feloldjuk 20 ml etil-acetátban, mossuk 10-10 ml I n sósavval, vízzel, 5 t.%-os nátrium-hidrogén-karbonáttal, és vízzel, majd nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A maradékot éterrel eldörzsöljük, szűrjük, éterrel mossuk és szárítjuk (0,9 g, op.: 192—194 °C, R? — = 0,85—0,95). Az így kapott terméket az 5. példa 2. lépésében leírt módon elszappanosítjuk arányos mennyiségű oldószerek és reagensek felhasználásával. 0. 8 g (80%) cím szerinti terméket kapunk. Op.: 197-199 °C. [a]p = —6,5C (c = 1, piridinben). Elemzési eredmény a C25H15O8N3■ H20 (513,49) képletre vonatkoztatva: számított: C % = 58,47; H%=5,30; N%=8,18; talált: C% = 58,8; H%=5,25; N%=8,2. 6. példa j\'2-Benzil-oxi-karbonil-L-glutaminsav-5-p-nitroimilid-hemthidrát előállítása 1. lépés: N2-benzil-oxi-karbonil-L-glutaminsav-l-metil-észter-5-p-nitro-anilid 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
