198098. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás penem származékok előállítására
3 198 098 4 Enzim Eredete Forgalmazó Lipáz Rhizopus SIGMA Chem, Co. Delamar St. Louis (USA) Lipáz Chromobactcrium TOYOJOZO Viscosum (Japán) Lipoprotein Lipáz Pseudomonas Sp. TOYOBO (Japán) Proteáz Streptomyces SIGMA Chem. Co. Proteáz Cacspitosus Rhizopus SIGMA Chem. Co. Az enzimeket 1-100 g/1, (II) általános képletú' észter, adott esetben kevés, 1 g kiindulási anyagra számítva legfeljebb 2 ml szénhidrogént tartalmazó vizes szuszpenziójához adjuk hozzá, amely szuszpenziót az alkalmazott enzimnek megfelelően célszerűen enyhén pufferolunk különböző pH-értékekre, azaz 5—9, előnyösen 6—8 közötti értékre. A reagáltatást 10—50 °C közötti, előnyösen 20— 40 °C közötti hőmérsékleten végezzük 0,5-48 órán át, szakaszos berendezésben vagy oszlopon, a reakcióelegyben jelenlévő enzim mennyiségétől függően, valamint az oldott formában vagy immobilí/áll formában jelenlevő enzim, és a reakcióclcgy ben jelenlevő szubsztrát mennyiségének arányától függően. A reakcióelegy pH-ját a kívánt értéken tartjuk alkálifém-hidroxid-oldat adagolásával. Az optimális körülmények mellett végrehajtott reakció hozama eléri, illetve meghaladja a 90%-ot. A reagáltatás befejeztével a reakcióterméket szokásos eljárásokkal nyerjük ki. A továbbiakban a találmányt nem korlátozó példákban mutatjuk be. 1. Példa kiindulási anyag előállítására (5R,6S}-2-bu tiril-oxi-metil-6- [1(R J-trimetilszilil-oxi-etil]-penem-3-karbonsav-aIlil-észter előállítása 4,27 g (3S,4R)-4-butiril-oxi-acctil-tio-3-[l(R)-trimetil-szilil-oxi-etil]-2-azetidinont 40 ml száraz tokióiban oldunk. Az oldathoz nitrogéngáz atmoszférában 10 °C hőmérsékleten 700 mg kalcium-karbonátot és 2,2 g allil-oxi-oxalil-kloridot adunk. Az elegyhez azonos hőmérsékleten 30 perc időtartam alatt 2,1 ml trietil-amint csepegtetünk. Az adagolás befejezése után az elegyet 10 percig 10 °C hőmérsékleten keverjük. Az elegyből a kalcium-karbonátot kiszűrjük, az oldatot vízzel 5%-os nátriumhidrogén-karbonáttal, majd ismét vízzel mossuk. Az oldatot nátrium-szulfáton szárítjuk, majd 20 ml-re bepároljuk, 47 ml trietil-foszfitot adunk hozzá, és 6 órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk. A reakcióelegyet 20 °C hőmérsékletre hűtjük, 3X 10 ml vízzel mossuk, majd nátrium-szulfáton szárítjuk. Az oldószer lepárlása után kapott nyers olajat szilikagélen kromatografálással tisztítjuk. Eluensként etiléter és hexán 3:7 térfogatarányú elegyét alkalmazzuk. így 50%-os hozammal 2,6 g tiszta (5R,6S)-2- butiril-oxi-metil-6-[l(R>trimetil-szilil-oxí-etil]-penem-3-karbonsav-allil-észtert nyerünk. NMR-spektrum (300 NI Íz, CDC1 0 5 (ppm):0,13 [911, s, Si(Cll3),], 0,95 (311, t, OCOCH2CH2CH.1), 1,25 (3H, d, CINCII), 1,7 (211, in, OCOCIIj- CH2CII,). 2,3 (211, t, OCOCII2CU2CII.O, 3,7 (111, dd, H—6), 4,2 (1H, m, H-8), 4,7 (2H, m, CH2-CH=CH2), 5,2-5,5 (211, m CH=CH2), 5,05-5,55 (2H, m, CH2OCO), 5,55 (1H, d, H-5), 5,9-6,0 (1H, m, CH=CH2). 2. Példa kiindulási anyag előállítására (5R,6S)-2-acetil-oxi-metil-6-[l(R)-trimetil-szililoxi-etil)-penem-3-karbonsav-allil-észter előállítása Az 1. referencia példa szerinti eljárással (3S.4R)-4- ac etoxi - acetil -tio -3-[ 1 -(R) -trimetil-szilil -oxi-etil j-2- azetidinonból kiindulva 48%-os hozammal tiszta (5R,6S)-2- acetil-oxi-metil-6-[l(R)-trimetil-szilil-oxietil]-penem-3-karbonsav-allil-észtert nyerünk. NMR-spektrum (300 NHz, CDCI3) 6 (ppm): 0,15 (911. s. Si(CIl,),. 1.28 (311. d. CINCII) 2.1 (311, s, COCII3) 3,72 (II), dd, J=2 Hz, 6 Hz, H-6), 4,21 (111, m, H-8), 4,65-4,80 (2H, m, COOCH2-CH=),5,05-5,55 (2H,m,CH2OCO), 5,25-5,5 (2H, m, CH=CH2), 5,55 (1H, d, J=2 Hz, H-5), 5,85-5,60 (III, m. CH=CH2). 3. Példa kiindulási anyag előállítására (5R,6S)-2-butiril-oxi-metil-6-[l(R)-tetrahidropiranil-oxi-etiÍ]-penem-3-karbonsav-álUl-észter előállítása Az 1. referencia példa szerinti eljárással (3S 4R)-4-butiril-oxi-acetil-tio-3-[ l(R)-tetrahidropiranil-oxieti:]-2-azetidinonból kiindulva 45%-os hozammal tiszta (5R,6S)-2-butiril-oxi-metil-6-[l(R)-tetrahidropiianil-oxi-etil]-pencm-3-karbonsav-al!iI-észtert állítunk elő. NMR (300 MHz, CDCI3) 5 (ppm): 0,95 (3H, t, J =6,7 Hz, COCH2CH2CH3), 1,30-1,37 (311, m, CH3-CH), 1,42-1,90 (6H, m.CFNCHjCHj tetraliidropiranil csoportból), 1,67 (2H, m, COCH2CH2CH3), 2,32 (2H, t, COCH2CH2CH3), -3,4-3,9 (2H. m, OCH2 tetraliidropiranil csoportból), 3,8 (III, m. II 6), 4,05 4,2 (III, m, H-8), 4,6-4,85 (311 :COOClI2-ClI = és CH tetraliidropiranil csoportból), 5,05— 5,5 (2H, m, CH2OCO), 5,2-5,42 (2H, m, CH=CH2), 5,6 (1H, m, H-5), 5,85-6,0 (1H, m,CIl=CH2). 4. Példa kiindulási anyag előállítására (5R,6S)-palmitoil-oxi-metil-6-[l(R)-terc-butildimetil-szilil-oxi-etií]-penem-3-karbonsav-allilészter előállítása A kiindulási anyagok előállítását bemutató 1. példában leírt módon járunk el, de (3S,4R)4-palmitoil-3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
