198091. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gangliczidszármazékok és az azokat hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
9 198 091 10 szerves oldószerekéi, így glikolokal, közelebbről etilén- és propilénglikolt. Ha oldószerként vizet használunk, rendszerint egy puffer is jelen van a készítményben. A sóoldat oldószerként igen előnyös. A készítmények két részből álló csomag formájában is elkészíthetők, amelyeket az alkalmazás előtt keverünk össze egymással. A fenti készítményben a gangliozid előnyösen fagyasztva szárított formában van jelen. A találmány szerinti eljárással előállított gyógyszerkészítményeket előnyösen parenterálisan alkalmazzuk. Gyakran szükséges lehet a GmiP monoszialogangliozidból egy adagot még a találmány szerinti eljárással előállított másik hatóanyagot is tartalmazó készítmény beadása előtt adagolni a kezelendő alanynak. Ezért a találmány szerinti gyógyszerkészítmény egy kiszerelési formájában egy csomag előnyösen legalább egy egységdózis GmiP monoszialo-gangliozidot, és legalább egy egységdózis találmány szerinti eljárással előállított, másik hatóanyagot is tartalmazó gyógyszerkészítményt tartalmaz, a két egységdózis egyértelmű jelzéssel van ellátva, és használati utasítás is van mellékelve az adagolás helyes sorrendjének biztosítására. A találmány szerinti eljárással előállított gyógyszerkészítmények és a Gm>P monoszialo-gangliozidok bakteriális, virális, protozoonos és gombás fertőzések, valamint tumorok megelőzésére és kezelésére használhatók emlősökben, különösen emberben. A találmány szerinti eljárással előállított gyógyszerkészítmények, és a GmiP gangliozidok előnyösen a bakteriális, virális, protozoonos és gombás fertőzések megelőzésére, és a tumorok szóródásának megakadályozására használhatók, emlősök esetén. A találmány értelmében az emlősök bakteriális fertőzésének kezelésére vagy megelőzésére a kezelendő alanynak antibaktcriálisan hatásos, nem-toxikus mennyiségű Gm«,P monoszialo-gangliozidot adunk. A virális fertőzések kezelésére és megelőzésére a kezelendő emlősnek antivirálisan hatásos, nemtoxikus mennyiségű GM1P monoszialo-gangliozidot adunk. A gombás fertőzések megelőzésére és kezelése érdekében a találmány értelmében a kezelendő emlősnek gombaellcnes hatású, nem-toxikus mennyiségben adagoljuk a GmiP monoszialo-gangliozidot. A proíozoális fertőzések kezelésére és megelőzésére a GmiP monoszialo-gangliozidot protozoonellenes hatást kifejtő, nem-toxikus mennyiségben adagoljuk a kezelendő emlősnek. Végül az emlős tumorok megelőzése és kezelése érdekében a kezelendő alanyt tumorellenes hatást kifejtő, nem-toxikus mennyiségű GmiP monoszialoganglioziddal kezeljük. A találmány szerinti eljárással előállított GmiP monoszialo-gangliozidokat legjobb tudomásunk szerint gyógyászati célra eddig még nem használták, ezért azok gyógyászati alkalmazhatósága is a találmány oltalmi körébe tartozik. A találmányt közelebbről — a korlátozás szándéka nélkül — az alábbi példák segítségével kívánjuk ismertetni. /. páldu GmiP gangliozid előállítása (i) Ököragyból származó 1 kg friss szürkeállományt 3 1 acetonnal homogenizálunk, majd a kapott szuszpenziót vákuumban szűrjük. A maradékot 1 liter acetonnal összekeverjük, és homogenizáljuk, majd az előbbi módon szűrjük. Az acetonnal szárított por szilárd maradékát szobahőmérsékleten levegőáramban 18 órán át szárítjuk. Az acetonnal szárított por átlagos hozama 150-200 g/kg szürkeállomány. (ii) 19,2 g ököragybói nyert, eldörzsölt, acetonnal szárított port 2100 ml 1:1 arányú kloroform-metanol elegyhez adunk. Az elegyet 1 órán át erőteljesen rázzuk, majd szűrjük. A szűrlethez 1050 ml kloroformot és 625 ml 0,1 mól/1 koncentrációjú káliumklorid-oldatot adunk. Az elegyet egy órán át tovább rázzuk, majd egy éjszakán át állni hagyjuk. Az. állás közben elkülönülő kb. 1270 ml térfogatú felső fázist elválasztjuk, és Visking-csoben 15 °C-on 48 órán át diai Száljuk újradesztillált vízzel szemben. (iii) A dialízis utáni vizes oldatot fagyasztva szárítjuk, a fagyasztva szárított port újrades/,1 illáit vízben felvesszük és 48 órán át dializáljuk ismét. A vizes oldatot fagyasztva szárítjuk, és a kapott terméket szilikagél-oszlopon Svennerholm [Methods in Carbohydrate Chemistry 6, 464 —474] módszere szerint kromatografáljuk, az eluálást kloroform-metanol-víz eleggvel végezzük. A Gmi gangliozidokat tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és fagyasztva szárítjuk. A fagyasztva szárított terméket kétszer desztillált vízben felvesszük, és 110 cm hosszú, 9,5 cm átmérőjű Visking-csőben dializáljuk folyó csapvizzel szemben 15 °C-on, 48 órán át. Csapvíz helyett desztillált vízzel készített kalcimn-hidrogén-karbonát-oldatot is használhatunk, amelyben a kalciumion koncentráció közel 200 iug/ml. (iv) A monoszialo-gangliozid vizes oldatát a 3. ábrán bemutatott bepárlóval folyamatosan bepároljuk. Az ábra hivatkozási számainak jelentése: 1 hűtő (4°C), 2 lombik, 3 steril szűrő, 4 töltővezeték, 5 automatikus szelep, 6 visszatápláló szivattyú, 7 glicerinfürdő, 8 vákuumvezeték, 9 fotoelcktromos érzékelő, 10 szintszabályozó, 11 elektromos szonda, 12 hőmérséklet-szabályozórendszer, 13 nagy vákuum-szivattyú, 14 vákuumérő, 15 hőmérő, 16 leeresztő palack, 17 automata szelepszabályozó. A gömblombikba 200 ml vizes ganglio/.id-oldatot mérünk, a lombikot 67,5 °C-os 7 fürdőn melegítjük, 59,5 °C-os belső hőmérsékletet biztosítva. A vákuumban kídesztilláló vizet a 2 lombikból a 9 érzékelő, és az 5 automatikus szelep segítségével folyamatosan vizes gangliozid• oldattal pótoljuk. Az 5 automatikus szelepet úgy állítjuk be, hogy a 9 érzékelő jelzésének megfelelően ugyanannyi folyadékot adagoljon a lombikba, mint amennyi elpárolgott, és a 9 érzékelőn kondenzátum formájában áthaladt. Ily módon a vizes oldat teljes térfogatát 10-40-es részére csökkentjük. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
