198079. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hidrofób cisz-platina-komplexek előállítására és liposzómába történő beépítésére
15 198 079 16 V. táblázat (folytatás) Készítmény IDS0 (mikro g/ml)1 1 2 3 Átlag 5 DMPC; DMPG 7:3—PT 1,9 2,0 0,9 1,6 DMPC : DMPG 7 :32 10,0--10 !CDDP IDso =0,1 míkrog/ml, 2ID50 = a PT mikrog/ml értékeiben kifejezve, amenynyit az üres liposzóma 1D50 koncentráclőjá- 15 nál kellett volna kapszulázni. 11. példa 20 L-PT in vivo antitumor aktivitása L1210 egér leukémia ellen, ahol a PT ciklopentén-karboxilátoracém-DACH A CDDP, hidroxi-propil-cellulózban szuszpendált PT, DMPG, DMPG-PT, DMPC : DMPG = 7:3 és DMPC : DMPG = 7 : 3—PT in vivo antitumor aktivitását vizsgáltuk L1210—BDFi egér modellben (25). BDFi egereket forgalomba hozza Charles River (Washington, MA). 6-8 darab, 18-22 g testsúlyú egérből álló csoportokat ip indukáltunk 1 • 106 L1210 leukémia sejttel a 0. napon. Az L1210 sejteket DBA2 egerekben tartottuk fenn, hetenként passzálva az egyes kísérletek között. Az L-PT készítményeket ip injektáltuk 0,1—0,3 ml mennyiségben a tumor inokulálása után 24 órával. Az adagolást kétféleképpen végeztük: egyetlen injekció az 1. napon vagy többszörös injektálás az 1., 5. és 9. napon. A CDDP-t olyan dózissal alkalmaztuk, amely az előzetes kísérletekben a maximális antitumor aktivitását mutatta. A PT, DNPG-PT és DMPC : DMPG = 7 :3-PT dózisa 3,125—50 mg/kg volt (közel LDl0 érték). A klinikai viselkedést és a túlélési időt határoztuk meg, míg az összes állat el nem hullott. Az eredményeket T/C% értékekben fejeztük ki (a kezelt egerek közepes túlélési ideje/a kontroll egerek túlélési idejeX 100), és megadtuk a hosszan túlélők számát. A 30, illetve 60 napnál hosszabb ideig élő egereket tekintettük hosszan túlélőknek az egyszeri, és a többszörös injektálási sorozatban. Az L—PT készítményeket a kísérlet napján frissen készítettük, steril körülmények között. Az első kísérletsorozatban a CDDP, szabad PT, DMPG-PT és DMPC : DMPG = = 7 :3—PT egyszeri ip adagolás hatását vizsgáltuk L1210 leukémia kezelésében. A szabad PT 12,5 mg/kg és 25 mg/kg dózissal kezelt egerek T/C% értéke összevethető volt a 10 mg/kg CDDP-vei kezelt egerek eredményével (162’ 178, három kísérlet átlaga), (1. VI. táblázat). 12,5 mg/kg, 6,25 mg/kg és 3,125 mg/kg DMPG- PT antitumor aktivitása összevethető volt a szabad PT és CDDP aktivitásával (átlag T/C % = 175 a 12,5 mg/kg-hoz, 158 a 6,25 mg/kg-hoz, 163 a 3,125 mg/kg-hoz), (1. VI. táblázat). DMPG-PT 25 mg/kg 25 30 35 40 45 50 55 60 65 vagy ennél nagyobb dózisa toxikus volt az L1210 leukémiás BDFV egerekre. 25 mg/kg, 12,5 mg/kg és 6,25 mg/kg dózisú DMPC : DMPG = 7: 3—PT-vel kezelt egerek T/C% értéke hasonló volt, vagy valamivel magasabb, mint a CDDP-vel, szabad PT-vel, és DMPG—PT-vel kezeiteké (átlag T/C % = 215 a 25 mg/kg-hoz, 178 a 12,5 mg/kg-hoz, 200 a 6,25 mg/kg-hoz), (1. VI. táblázat). DMPC: DMPG = = 7 :3~PT 50 mg/kg dózisa toxikus volt az L1210 leukémiás BDFi egerekre. Az üres, DMPG-ből és DMPC : DMPG = 7 :3-ból készült liposzómák a hatóanyagtartalmú Iiposzómákhoz hasonló dózisnál adagolva nem mutattak antitumor aktivitást (T/C% = = 105 a DMPG-re és 93 a DMPC :DMPG-re). Hosszan túlélő egyedek (egy, vagy kettő a hat egérből) a CDDP-vel, DMPG—PT-vel és DMPC : DMPG = 7 :3- mal kezelt csoportokban fordultak elő (1. VI. táblázat). Többszörös injektálás esetén a legmagasabb T/C% érték 253 volt a CDDP háromszori 7,5 mg/kg adagjához, 284 a szabad PT háromszori 12,5 mg/kg dózisához, 179 a DMPG-PT háromszori 6,25 mg/kg dózisához, és 403 a DMPC :DMPG = 7 :3 — PT háromszori 12,5 mg/kg dózisához. Hosszan túlélő egyed (egy a hatból) csak a DMPC : DMPG = 7 :3— PT-vel kezelt csoportban fordult elő (1. VII. táblázat). VI. táblázat CDDP szabad PT és L-PT in vivo antitumor aktivitása L1210 egér leukémia ellen i.p. adagolás esetén (1. napon) (a PT ciklopcntén-karboxilátoracém-DACH komplex) * 1 2 3 4 Csoport Készítmény4 szám % T/C Túlélők száma a 30.napon 1> 22 33 1. CDDP 10 mg/kg 167 _ 189(1/6) 2. Szabad PT 25 mg/kg — — 168 3. 12,5 mg/kg 173 136 179 4. DMPG-PT 25 mg/kg 100--5. 12,5 mg/kg 160 209 158 (2/6) 6. 6,25 mg/kg — — 158 7. 3,12 mg/kg-163 (2/6) 8. DMPC :DMPG 7 : —PT 25 mg/kg 213 200 232(1/6) (1/6) 9. 12,5 mg/kg 167 — 189(1/6) (1/6) 10. 6,25 mg/kg “ — 200 1 kontroll közepes túlélése = 7,5 nap 2 kontroll közepes túlélése = 11 nap 3 kontroll közepes túlélése = 9 nap 4Minden készítményt 0,1-0,3 ml mennyiségben i.p. adagoltunk az L1210 sejtek (1 • 106) i.p. inokulálása után 24 órával. 9
