198077. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált amino-alkanoil-amino-alkil-foszfonátok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
23 198 077 24 oldjuk 360 ml 2N lítium-hidroxid-oldatban. Ezután az oldatot mintegy 5 °C-ra hűtjük, és erélyes keverés közben hozzácsepegtetünk 76,4 ml benzaldehidet. A reakcióclegy először megzavarosodik, majd a kiváló fehér csapadéktól bcsűrűsödik. Ekkor a maradék benzaldehidet, hogy a keveredést elősegítsük, 300 ml toluolban oldva csepegtetjük az elegyhez. Az adagolás végeztével a keverést tovább folytatjuk három órán át, miközben a hőmérsékletet hozzávetőlegesen 5 °C-on tartjuk. Ezután az elegyet egy durva üvegszűrőn megszűrjük, a szűrőn maradt anyagot 50 ml jéghideg vízzel, majd kétszer 155 ml jéghideg etanollal és végül vízmentes dietil-étcrrel alaposan kimossuk. A terméket 16 óra hosszat vákuumban szárítva fehér port kapunk, amely 196-200 °C-on olvad, és amely kémiailag (S)-2-amino-6-(benziliden-amino)-hexánsav. A fenti hexánsav 50 g-nyi mennyiségét (0,2136 mól) 350 ml víz és 30 ml tömény kénsav clcgyében feloldjuk, és egy háromnyakú, felülről benyúló keverővei, hőmérővel és adagolótölcsérrel ellátott egyliteres lombikba töltjük. Felmelegítjük 80 °C-ra, és mintegy 4 óra időtartam alatt hozzácsepegtetjük 44 g nátrium-nitrit 150 ml vízzel készített oldatát. Az adagolás végeztével a reakcióelegyet további 16 órán át kevertetjük 80 °C-on, majd szobahőmérsékletre hűtjük, kimossuk kétszer 200 ml etil-acetáttal, és 0 °C-ra hűtve, 44%-os nátrium-hidroxid-oldattal 10— 11 pH-ig lúgosítjuk. Ezután részletekben 33,4 ml benzil-(klór-formiát)-ot adunk hozzá, majd mintegy 1,5—2 órán át az oldat pH-ját, szükség szerint további nátrium-hidroxid-oldat hozzáadásával 10 körüli értéken tartjuk. Ezt követően a reakcióelegyet kétszer 200 ml etil-acetáttal kimossuk, tömény sósavval pH 1—2-re savanyítjuk, és háromszor 200 ml etilacetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázist magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot etil-acetát és hexán hozzávetőlegesen 1 :1 arányú keverékéből kristályosítva 32,5 g terméket kapunk. Az anyaglúgból további 1,96 g terméket lehet ismételt kristályosítással kinyerni, és így összesen 35,46 g (S)-6-[[(benziloxi)-karbonil]-amino]-2-hidroxi-hexánsavat kapunk, amelynek olvadáspontja 79—81 °C. [aJD = +3,9°; laJ36S = +23,7° (c = 1, kloroform). Vékonyréteg-kromatográfiás Rf értéke 0,53 (szilikagél; metilén-diklorid-metanol-ecetsav = 17 :1,5 :1,5). b) (SJ-2-Hidroxi-6-[(trifluor-acetil)-amino]-hexánsav 20 g (72,2 mmól) (S)-6-[[(benzil-oxi)-karboniljamino]-2-hidroxi-hexánsavat egy Parr-féle palackban 100 ml metanolban feloldunk, apránként 50 ml vizet adunk hozzá, majd argont buborékoltatunk át az oldaton és egy Parr-féle rázógépbe helyezve, 1,5 g 20%-os palládium-hidroxid katalizátor jelenlétében hidrogénezzük. Amikor a reakció lejátszódott, a katalizátort kiszűrjük, és az oldatot vákuumban bcpároljuk, aminek eredményeképpen 10,62 g nyers színű (S)-6-amino-2-hidroxi-hexánsavat kapunk. 5 g (0,34 mmól) (S)-6-amino-2-hidroxi-hexánsav és 17,1 ml metil-(trifluor-acetát) elegyéhez szobahőmérsékleten, argongáz atmoszférában 1,1,3,3-tetrametil-guanidint adunk. Az elegy eközben felmelegszik, amit jeges fürdővel ismét szobahőmérsékletre hűtünk, majd így kevertetjük 60 órán át. Ezután 25 ml vizet adunk hozzá, telítjük nátrium-kloriddal, majd pH 1-re savanyítjuk és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist bcpárolva olajat kapunk, amelyet vízben feloldunk, az oldatot mossuk metilén-dikloriddal, hogy az apoláros szennyezéseket eltávolítsuk, majd ismét bepároljuk. A maradékot most etil-acetátban oldjuk, kimossuk 1 N sósavval, hogy megszabaduljunk a visszamaradt 1,1,3,3-tetrametil-guanidintól, és végül bepárolva 7 g (S)-2-hidroxi-6-[(trifluor-acetil)-amino]hexánsavat kapunk, amelynek vékonyréteg-kromatográfiás Rf értéke 0,64 (szilikagél; izopropanol-ammónium-hidroxid-víz = 7:2:1). c) (S)-l-[2-Hidroxi-l-oxo-6\(trifluor-acetil-amino]-h exil]-L-prolin -etil-ész tér 1,36 g (5,58 mmól) (S)-2-hidroxi-6-l(trifluor-acetil)-amino]-hexánsavat és 1 g (5,58 mmól) L-prolinetil-észtert 10 ml tetrahidrofuránban szuszpendálunk, lehűtjük 0 °C-ra, és hozzáadunk 0,93 ml (657 mg; 6,68 mmól) trietil-amint, 800 mg (5,92 mmól) 1-hidroxi-benzo-triazol-hidrátot, valamint 1,6 g (7,76 mmól) diciklohexil-karbodiimidct. A reakcióelegyet ezután 3 óra hosszat 0 °C-on majd 2 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük, szűrjük és összerázzuk 5%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldat és etil-acetát keverékével. Az etil-acetátos fázist mossuk nátrium-hidrogénkarbonát-oldattal, nátrium-klorid-oldattal, nátriumszulfáton szárítjuk és végül bcpároljuk. A maradék olajat EPS—1 szilikagélen, etil-acetát és hexán 2:1 arányú elegyét alkalmazva eluensként.kromatografáljuk. A megfelelő frakciókat bepárolva 1,35 g (S)-l[2-hidroxi-1-oxo-6-[(trifluor-acetil)-amino]-hexíl]-L- prolin-etil-észtert kapunk. d) l-[(S)-2-[[[}-[[(BenzU-oxi)-karboml]-amino]-pen-iil]-hidroxi-foszjinil\-oxi\-l-oxo-6-[(trijluor-acetil)-amino]-hexil\-L-prolin-etil-észter 1,35 g (3,7 mmól) (S)-l-[2-hidroxi-l-oxo-6-[(trifluor-acctil)-amino]-hexil]-L-prolin -etil-észtert és 1,16 g (4,06 mmól) az 1. példa e) pontja szerinti eljárással kapott [l-[[(benzil-oxi)-karboníl]-amíno]pentilj-foszfinsavat 10 ml metilénkloridban, argongáz atmoszférában szuszpendálunk, és hozzáadunk 991 mg (4,81 mmól) diciklohexil-karbodiimidet, valamint 50 mg (dimetil-amino)-piridint, majd 2 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük. Ezután az elegyet megszűrjük, etil-acetát és 5%-os kálium-hidrogénszulfát-oldat keverékére öntjük, majd az etil-acetátos fázist elválasztva telített nátrium-hidrogén-karbonátoldattal és nátrium-klorid-oldattal mossuk, végül vákuumban bepároljuk. A visszamaradó olajat feloldjuk 10 ml 1,4-dioxánban, és 980 mg (4,6 mmól) nálrium-perjodát 10 ml vízzel készített oldatát hozzáadva éjszakán át kevertetjük. Másnap etil-acetát és 5%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldat keverékével összerázzuk, az etil-acetátos fázist nátrium-hidrogénszulfit-oldattal mossuk, hogy az oldat elszíntelenedjék, majd nátrium-klorid oldattal kimossuk. Ezután az oldatot nátrium-szulfáton szárítjuk, amelyet 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 13
