198054. lajstromszámú szabadalom • Eljárás repamicin-származékok és hatóanyagként az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 2 A találmány tárgya eljárás a rapamiein vízdolható pro-drug származékainak, különösen glicinát, propionát és pirrolidino-butirát észter-származékainak előállítására, és eljárás a hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására. Az (1) képletű rapamiein a 3 939 922 és 3993749 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásokból ismert. A 4 316 885 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertetett mono- és diacil-rapamicin-származékok acílcsoportként 1 - 10 szénatomos alifás acilcsoportot, adott esetben rövidszénláncú alkiksoporttal, halogénatommal, rövidszénláncú alkoxicsoporttal liidroxilcsoporttal vagy trifluor-metil-csoporttal mono- vagy diszubsztituált benzoilcsoportot, vagy fenilcsoporttal, szubsztituált 2-10 szénatomos alifás acilcsoportot — ahol a fenilcsoport adott esetben rövidszénláncú alkilesoporttal, halogénatommal, rövidszénláncú alkoxicsoporttal, hidroxilcsoportta! vagy trifluor-metil-csoporttal lehet mono- vagy diszubsztítuálva - tartalmaznak. A fenti mono- és diacilszármazékok közül előnyösek a mono- és di(2 6 szénatomos)alifás acil-származékok, amelyeknek gombaellenes hatását is említik, emlősök esetén. Amino-acil-csoportot tartalmazó rapamicin-származékokról nem tesznek említést. A rapamiein a 877 700 számú belga szabadalmi leírás szerint tumorok kezelésére használható. A rapamicin azonban igen rosszul oldódik vízben, oldhatósága 20 /igfml, így a betegeknek való adagolásra speciális injekciós készítményeket fejlesztettek ki, például a 41 795 számú európai szabadalmi leírásban ismertetett készítményeket. Ezek a készítmények számos okból nem megfelelőek, többek között a hordozóanyag toxieitása jelent hátrányt. A fenti okok miatt szükséges olyan rapamiein-származékok vagy pro-drugok előállítása, amelyek viszonylag Jól oldódnak vízben, így belőlük biztonságos injektálható készítmény állítható elő, amelyek a tumorok kezelése során a rapamicinnel azonos hatást fejtenek ki. Tapasztalatainak szerint előállíthatók a rapamidnnek olyan vízoldható pro-drug formái, amelyek humán plazma és állati szövet-homogenizátumok jelenlétében rapamicinné bomlanak le. A rapamiein fenti pro-drugjai értékes hatóanyagai a humán tumorok kezelésére alkalmas injektálható gyógyászati készítményeknek. A találmány szerinti eljárással előállított vízoldható pro-frugok a rapamiein 28-as helyzetű hidroxilcsoportján monoszubsztituált, és a 28-as és 43-as helyzetű hidroxílcsoportjain diszubsztituált származékok. A fenti számozás Findlay és munkatársai (Can. J. og Chem. 58, 579 /1$80/) szerkezet-felderítő munkáján alapul, és az (1) képleten fel is tüntettük a fenti pozíciókat. A monoszubsztituált származékok a rapamiein 28-as helyzetű hidroxilcsoportján egy (a) általános képletű szubsztituenst tartalmaznak, a fenti képletben m értéke 1-3, Rt és Ra jelentése 1 3 szénatomos alkilcsoport, vagy együtt 4-5 szénatomos alkiléncsoportot alkotnak. A diszubsztituált rapamidn-származékok a rapamlcin 28-as és 43-as helyzetű hidroxilcsoportjain tartalmazzák a fenti (a) általános képletű szubsztituenst. A találmány szerinti eljárással úgy állítjuk elő a 28-as helyzetű hidroxilcsoportján (a) általános képletű amino-aeil-esoportta! monoszubsztituált, vagy 28- as és 43-as helyzetű hidroxilcsoportjain a fenti csoporttal diszubsztituált rapamicin-szárntazékokat, bogy a rapamicint a fenti (a) általános képletű amino-acíl-csoportot tartalmazó acilezőszerreí adlezzük. Monoszubsztituált rapamidn-származékok előállítására 1 mól rapamicint közelítőleg 2 mól aeilezőszerrel, míg diszubsztituált származékok előállítására közelítőleg 3 mól adlezőszerrel reagáltatunk. Az acilezést. ismert módon végezzük, előnyösen neutrális reakciókörülményt biztosítva. Acilezőszerként a fenti amino-acil-csoportnak megfelelő savat, savhalogenídet (például savkloridot vagy savbromidot), savanhidridet vagy aktivált észtert használhatunk. Az amino-acil-szubsztituensnek megfelelő savat előnyösen megfelelő kapcsolószer jelenlétében használjuk acilezőszerként. Az adott kapcsolószer leghatásosabban katalizátor és/vagy savmegkötőszer jelenlétében működhet. Kapcsolószerként előnyösen N,N’-diciklohexil-karbodiimidet, 1?1 -karbonil-diimidazolt, dietil-azo-dikarboxilátot, 2,2 -ditio-pirídint és N,N - diizopropil-karbodiimidej használhatunk. A dietil-azo-dikarboxilát és 2,2 ditio-piridin használata esetén katalizátort, például trietil-foszflnt is kell használni. A fenti két kapcsolószer és katalizátorként trifenii-foszfln használata esetén nem klórozott oldószert. például vízmentes étert, így tetrahidrofuránt használhatunk előnyösen. A többi fent melített kapcsolószer használata esetén savmegkötőszert - például 4-(dimetil-amino)-piridint vagy 4-pirrolidino-piridint - használunk előnyösen. Az utóbbi kapcsolószerek és katalizátorok esetén oldószerként például vízmentes metilén-kloridot vagy kloroformot használhatunk. Savhalogenidek előnyösen savkloridok — használata esetén savmegkötőszer-típusú katalizátorként előnyösen egy terder amint, például piridint vagy trietil-amint használhatunk, és oldószerként vízmentes metilén-kloridot vagy kloroformot használhatunk. A találmány szerinti eljárás egyik előnyös megvalósítása szerint a rapamicint egy (III) általános képletű savval - a képletben R,, Rj és m jelentése a fent megadott reagáltatjuk, kapcsolószer, így karbodiímid (például didklohexil-karbodiimid vagy diizopropil-karbodiimid) vagy karbonil-diimidazoí jelenlétében Katalizátorként előnyösen 4-(dirnetil-amino)-píridint vagy 4-pirroHdino-píridint használunk a kapcsolószerrel. A fenti reakdóban az adlezőszer a (III) általános képletű savból és a karbodiimid kapcsolószerből kialakult aktív észter. A kapcsolószerek, így a karbodiimídek és azok használata is például a peptid-kémia területéről jól ismert (például E. Schroeder és K. I-ubke: The Peptides, 1. kötet, Academic Press, New York és London, 1965, és M Bodansky és M.A. Ondetti: Peptide Synthesis 1966, Interscience USA). A rapamiein találmány szerinti vízoldható pro-drugjainak előállítását a példákban alább Ismertetjük. A példákban a rapamldn és pro-drugjai kémiai stabilitásának vizsgálatát 20 gtg/ml koncentrációjú, 0,5 ionerősségű oldatban végezzük. A stabilitási vizsgálatokat pH 3,3 értéken (0,05 mól/l koncentrációjú acetát-puffer) és pH 7,4 értéken (0,05 mólfl koncent198.054 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 2
