198019. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dihidropiridin-származékok és ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 2 5. példa Visszhang-kardiográfjai vizsgálat kutyán Ehhez, a vizsgálathoz 18 kg és 25 kg közötti testsúlyú korcs kutyákat alkalmaztunk, minthogy az ultrahangos kétdimenziós visszhang-kardiográfiai vizsgálat (3DE) ilyen állatokkal tiszta, jól értékelhető képet ad. A fenti állatokból képezett csoportot két különböző modell szerint alkalmaztuk a 2DE vizsgálatban. Az első modellben a kutyákat érzéstelenítettük, a másodikban az állatok éber állapotban voltak a gyógyszer-adagolás folyamán, nyugtatószert sem kaptak. Mindkét esetben a comb-artéria egy kis ágába kanült vezettünk be artéria-bemetszés útján, a kanüit egy vízzel töltött cső kötötte össze egy nyomás-transzduktorral. Az éber állatokkal végzett kísérletben az artéria-bemetszési helyet helyileg érzéstelenítettük 2'/í-os lidokain-oldat szubkután injektálása útján. A transzduktorral követni tudtuk a vérnyomás alakulását a kísérlet folyamán. A vérnyomást és az clcktrokardiogrammot egy kétcsatornás regisztrálókészülékkel regisztráltuk. Az ultrahangos kétdimenziós cciio-kardiografáiai felvételeket egy a szegycsont jobb oldala mellett a negyedik vagy ötödik bordaközi térbe bevitt 3 Mgilz „endfire” transzduktorhoz, kötött ultrahangos időköz-mérővel vettük fel. A felvett képek a baloldali szjvkamra hoss/.tcngelyi nézetet mutatták, amely egyidejűleg mutatta a szívcsúcsot, a nitrális billentyűt és baloldali kerek szívpitvart is. Emellett felvettünk egy rövidtengely-menti képet is a magas papillaris izom szintjében. Az összes felvételeket videoszalagon rögzítettük későbbi részletes vizsgálat céljaira. Az adatok elemzéséhez grafikus ábrázolást megvalósító elektronikus adatfeldolgozó programot alkalmaztunk, amelyet video-rekorderrel és adat-lábhízóval kapcsoltunk óssze. Az. első modellben a kutyákat nátrium-pentobarbitálla! ancsz.tctizáltuk, majd jobb oldalukra fektettük őket, olyan állványon, amely lehetővé tette, hogy egy kismctsz.éscn keresztül hozzáférjünk a szegycsont melletti jobboldali térséghez. Az állatoknak a kísérlet napján 50, 100, 200, illetőleg 500 /zg/kg találmány szerinti hatóanyagot adtunk be intravénás úton. A vcgyülctet desztillált víz és dimetil-acetacuid 2:1 arányú clcgyében oldottuk Mindegyik adagnál kontroll kísérletet is végeztünk és minden adag beadása után 3, 5, 10. 15 és 30 perccel végeztünk további mérést. A második modell szerinti kísérletek előtt a kutyákat gyakoroltattuk, hogy néhány óra hosszat nyugodtan álljanak egy hevederben. Az. állatok szegycsont melletti jobboldali testüregéhez a hevederen létesített legombolható lap helyén fértünk hozzá. A találmány szerinti vegyületeket 200 pg/kg és 250 pg/kg adagokban desztillált víz és etanol 7:1 arányú elegy ében, illetőleg 150 pg/kg és 100 pgjkg adagokban, desztillált víz és dimetil-acetamid 3:1 arányú elegyében oldva adtuk be az. állatoknak. Ezen kívül a találmány szerinti vegyilletek 5, 2, 1 és 0,75 mg/kg adagjainak zselatinkapszulában orális úton történő beadásával is folytattunk kísérleteket. Minden adag beadása előtt meghatároztuk a kontroli-értékeket. Az intravénás beadással folytatott kísérletek során minden adag beadása után 5, 10, 15, 30, 45 és 60 perccel is végeztünk méréseket, mig az orális úton történő beadással folytatott kísérletek során a további méréseket az egyes adagok beadása után 10, 20, 30,45, 60, 75, 90, 105,120 és 180 perccel végeztük. Valamennyi kísérletben pozitív hatást mutattak a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek. 6. példa Kísérletek anesztetizált kutyákon 14 kg és 21 kg közötti testsúlyú korcs kutyákat nátrium-pentobarbital 35 mg/kg i.v. adagjával anesztetizáltunk, majd intubáltuk az állatokat és felnyitottuk mellkasukat a baloldali ötödik bordaközi térnél és a következő paraméterek mérésére alkalmas műszereket alkalmaztuk az állatokon: szisztolés, diasztolés és közepes vérnyomás, szívritmus, nyomás a bal szívkamrában, dp/dt max. a bal szívkamrában, kapilláris ék-nyomás a tüdőben, központi véna-nyomás, s/ív-percvolumcn, szisztémás véredény-ellenáilás, kontrakcióért) és koszorúér-átáramlás. A baloldali szívkamrabeli nyomást Millar-féle rnikrocsücsos katéterrel mértük. A kapott szignál elektronikus differenciálásával kaptuk a dp/dt maximum-értékeket. A szisztolés, diasztolés és közepes vérnyomást, valamint a központi véna-nyomást folyadékkal töltött Stathm-féle nyomás-transzduktorral határoztuk meg. A s/ív-[)ercvolumen és a tüdőbeli kapilláris ék-nyomást a vízzel töltött Statjiam-féle nyomás-transzduktorhoz kapcsolt Swan-Ganz-féle katércrrel és Cíould-félc szív-indcx-számítógéppel határoztuk meg. A kontrakcióerö mérésére a bal szívkamrához varrott Walton-Brodie-féle íves tenzométert alkalmaztunk. A szisztémás véredény-ellenállást a sziv-percvolumen és a vérnyomás mért értékei alapján számítottuk ki. Az. epikardiális koszorúér-átfolyást elektromágneses áramlás-szondával (Carolina Medical Electronics Co.) mértük. A miokardiális véráramhal radioaktív jelzésű mikrogömböcskék (5: ®*Sr, ,4,Ce. 51 Cr, 1'3Sn, 4 6 Se) al kai mazásával határoztuk meg. Az, adatok felvételére Packard „Model 3500" gamma-számlálót és „Canberra Model Multichannel Analyzer" többcsatornás analizátort alkalmaztunk és az analízist a Syntex cég által kifejlesztett programmal egy „HPl 000" számítógépen végeztük. A találmány szerinti vegyületeket intravénás beadás esetén dimetil-acetamid és vizes nátrium-klorid-oidat elegyében, intraduodenáíis beadás esetén pedig dimetil-acetamid és víz elegyében adtuk be az állatoknak. Párhuzamosan kontroli-kísérletet is lefolytattunk. Az állatok egyik csoportjának 25, 50, 100,200 és 500 pg/kg adagokban, intravénás úton adtuk be a találmány szerinti vegyületeket. A fent említett paramétereket minden adag beadása után legalább 30 percig regisztráltuk. Az állatok második csoportjának 5 mg/kg adagban, intraduodenáíis úton adtuk be a vizsgálandó vegyületet. A fent említett paramétereket a hatóanyag beadása után 3-4 óra hosszat regisztráltuk. Egy harmadik állatcsoportnak intrakoronáriás úton adtuk be a találmány szerinti vegyületeket, a közvetlen helyi hatás meghatározása céljából. A fent 108.010 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 14
