197993. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fokozott perkután áthatolóképességű (transzdermális fluxust fokozó) gyógyszerkészítmények előállítására
1 2 % (térf.pertérf.) Piroxicam fluxus Relatív etanol/puffer (ug/cm2 .h) fluxus0 0/100 0,05 0,2 20/80 3,70 5,3 30/70 11,00 15,7 40/60 42,80 61,0 50/50 55,70 80,0 100/0 0,70 1,0 c100% etanol/0,25% (térf. per térf.) Azone vehiku* lummal kapott fluxusra vonatkoztatott értékek. 3. példa Piroxicam prefarmakonok perkután fluxusa Két telített oldatot állítunk elő 4-n-butiril-oxi-2- -metil-N-2-piridil-2H-l,2-benzotiazin-3-karboxamid 1,1 -dioxidból (piroxicam n-vajsavésztere) 55% etanol/45% Sorensen puffer (pH 7,3) térfogat per térfogat) (0,25% térfogat per térfogat) koncentrációban olajsavat adunk. A szőrmentes egérbőrön való áthatolás sebességét az akceptor cella oldatainak piroxicam■elemzésével (HPLC) határozzuk meg, a piroxicamra fentebb megadott eljárás segítségével. Az eredmények a következők: Olajsavat tartalmazó és nemtartalmazó 55/45 (térfogat per térfogat) etanol/puffer vehikulum in vitro áthatolása szőrtelen egérbőrön, 32 °C-on Piroxicam fluxus Relatív Olajsav % (ug/cm2 Ji) fluxus 0,224 tömeg/térf. 4,10 ± 0,40 24 nincs 0,17 ±0,02 1 Ha a fenti eljárásban a piroxicam n-butirátésztere helyett 4-n-pentanoil-oxi-2-metil-N-2-piridil-2H-l ,2- •benzotiazín-3-karboxiamid 1,1-dioxidot használunk, a következő eredményeket kapjuk: Piroxicam fluxus Relatív Olajsav % (ug/cm2 .h) fluxus 0,224 tömeg/térf. 7,93 ± 0,62 14 nincs 0,56 ±0,17 1 4. példa • Különböző zsírsavaknak a szalicilsav disznó stratum corneumon való áthatolására gyakorolt hatása, és infravörös (ÍR) és differenciál kalorimetriai adatok közötti összefüggés Stratum corneum rétegeket készítünk disznóbőréből tripszines kezelés segítségével. Eszerint a teljes Ifastagságú disznóbőr mintákból mlkrotommal 350 /im vastag metszeteket készítünk, és tosztát puflerrel (Sorensen puffer, pH 7,4) pufferezett sóoldatban levő 0,5% nyers tripszinnel telített szűrőpapírra terítjük ki őket (a stratum corneum réteg felfelé essen). Néhány óráig 37 °C-on tartjuk, majd a szaruréteget leválasztjuk, szója-tripszin inhibitorra] és vízzel ,mossuk, és levegőn megszárítjuk. A mintákat felhasználásig szobahőmérsékleten exszikkáttüban tartjuk. A próba előtt az ismert súlyú száraz bőrmintákat 2 óráig 0,15 M megfelelő zsírsavat tartalmazó etanolban inkubáljuk, utána a mintákat 10 sec-ig etanolban mossuk, dróthálóra kiterítjük, exszikkátorban szárítjuk és a száraz mintákat ismét lemérjük. A stratum corneum mintákat nihány napig 22 *C-os, 95% relatív páratartalmú helyiségben tartjuk, miközben a szaruréteg-mintákat 30% (tömeg per tömeg) egyensúlyi koncentrációig vizet vesznek fel. Infravörös spektrum adatok Az IR spektrumokat folyékony nitrogénnel hűtött higany-kadmium-tellurid detektorral felszerelt Fourier transzformációs infravörös spektrométerrel4 (FTIR) vesszük fel. A vízvesztés megakadályozása' céljából a hidratált mintákat cink-szulfid ablakok kö~ zé foglaljuk be, fenntartva a 22 °C-ot és a 95% relatív páratartalmat. A lezárt mintákat behelyezzük a spektrométerbe, ahol minden zsírsavval kezelt mintán átlagosan 127 lépéses letapogatást kapunk mintegy 6 perc alatt. A digitalizált adatokat számítógépbe (Apple He) visszük be a deformált CH-abszorbancia frekvenciájának és sávszélességének meghatározása céljából. Az FFIR készülék digitális természete miatt az abszorbancia és frekvencia adatokat csak nem-folytonos növekmények reprezentálják. A használt készülékkel az egyes frekvenciapontok pontos értéke csak legfeljebb 2,7 cm’1 pontossággal határozható meg. A csúcsok frekvenciája azonban sokkal nagyobb pontossággal adható meg súlyozott közép algoritmust használva, amelyet Cameron és munkatársai digitalizált adatokra írtak le (Applied Spectr. 36, 245-250/1982/). 4 Anaiect model FX-6200, Laser Precision Corp Irvine, CA. Differenciál kalorimetria (DSC) Differenciál kilométert5 használtunk 0,75°C/min letapogatási sebességgel. A fenti FTIR kísérletekhez használt párhuzamos mintákat egyesítettük a DSC mérésekhez, vagy pedig ismert súlyú (körülbelül 20 mg) stratum corneum mintákat a fentebb leírtak szerint kezeltük az egyes zsírsavakkal. A kezelt mintákat néhány napig 95% relatív nedvességtartalmú kamrában 22 C-on hidratáltuk és súlyukat újra lemértük. Az eredmények azt mutatják, hogy a minták körülbelül 30% (tömeg per tömeg) vizet vesznek fel, függetlenül az alkalmazott zsírsavtól. *Microcal model MC-1, Microcal Inc., Amherst, Massachusetts. xdpm = bomlás per perc, dpm = foton beütésszám per perc számlálás hatásfoka Fluxus-mérés A 350 jum vastagságú disznóbőr metszeteket a diffúziós cella két félrésze közé helyezzük el oly módon, hogy a stratum corneum oldal a donor kamra felé nézzen, e kamra 1,0 ml szalicilsavval telített etanolt (0,31 g per ml) tartalmaz és mintegy 105 dpm* x/ml C1 4-jelzett szalicilsavat. A megfelelő zsírsavat azután 0,15 VI végkoncentrációban adtuk hozzá. Az akceptor kamra 1,0 ml Sörensen puffert (pH 7,4) tartalmaz. Mindkét kamrafelet mágneses keverővei keverjük és 32 °C-on tartjuk. 197.993 5 10 15 20 25 30 3& 40 45 50 55 60 6
