197989. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új, primicin-gél-alapú készítmény előállítására
197989 gentamicin — és/vagy doxiciklinoldatot reagáltatunk egymással, 40°C hőmérsékleten. A gélképzés nem változtatja meg a két hatóanyag egyikének sem a kémiai összetételét, vagy a mikrobiológiai aktivitását. Tárolás folyamán sem változik meg a gélszerkezet, sem pedig kémiai, biológiai tulajdonságai a hatóanyagoknak. Megvizsgáltuk a találmányunk szerint előállított primicin tartalmú vegyes alapgélek antibakteriális hatását, összehasonlítva a fermentációs úton előállított primicin-szulfát antibakteriális hatásával. A hatóanyagokat sztöchiometrikus arányban összehasonlítva, arra az eredményre jutottunk, hogy antibakteriális hatékonyságuk között nincsen lényeges különbség. Vizsgálandó anyagok: 1. minta: 1. példa szerint előállított vegyes alapgél. összetétele: 50% primicin-3-NMP alapgél (20%-os) +50% gentamicin vizes oldat (40%-os) 2. minta: 2. példa szerint előállított vegyes alapgél. összetétele: 50% primicin- 5 -NMP alapgél (20%-os) +50% doxiciklin vizes oldat (40%-os) 3. minta: fermentációs úton (153.593 l.sz. magyar szabadalom szerint) előállított primicin-szulfát. 10 Az antibakteriális hatás mértékét a minimális gátló koncentráció (továbbiakban MIC) mérése adta. A méréseket — tekintettel a főként állatgyógyászati felhasználásra — tőgy- 15 -patogén mikroorganizmusokon végeztük (in vitro). A meghatározási módszer leírása a 194.493 l.sz. magyar szabadalmunk leírásának 6. oldalán található. Vizsgálati eredményeinket az I. táblázat-. 20 ban foglaltuk össze: 4 I. táblázat Primicin tartalmú vegyes alapgélek, illetve primicin-szulfat MIC értékének mérése tögypatogén törzseken Mikroorganizmus neve Streptococcus uberis Streptococcus agalactiae Streptococcus dysgalactiae Staphylococcus aureus MIC-érték (pg/ml) minta 2. minta 3. minta 0,2 0,12 0,15 0,25 0,5 0,5 0,15 0,15 0,2 0,12 0,25 0,25 A találmányunk szerinti eljárással előállított stabil, kettős hatóanyagú vegyes alapgél hatóanyagul szolgálhat primicin és egyéb antibiotikum tartalmú gyógyszerek, ill. állatgyógyászati készítmények előállítására. Fontos felhasználási területe a kettős hatóanyagú vegyes alapgéleknek a mastitis (tőgy-gyulladás) elleni állatgyógyászati készítmények, pl. primicin+gentamicin tartalmú pasztaszerü készítmények, melyek laktációs időszakra, vagy szárazra állítás időszakára alkalmazhatók, vagy a primicin+gentamicin tartalmú tőgyinfúziók. A találmányunk szerinti eljárással előállított primicin tartalmú vegyes alapgél, ill. azt hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítmények farmakológiai vizsgálatakor egyrészt vizsgáltuk a lokális irritációt, speciálisan a szemirritatív hatást, másrészt a felszívódást vérbe, ill. kifejt tejbe, in vivo. 1 1. Lokális irritáció és felszívódás vizsgálata, (in vivo). Vizsgálandó anyagok: 1. minta: 3. példa szerint előállított gyógyászati készítmény 2. minta: 6. példa szerint előállított gyógyászati készítmény 3. minta: 1. példa szerint előállított vegyes alapgél 4. minta: gyógyászati segédanyag (unguenturn simplex), hatóanyag nélkül (kontroll) (előállítását a 4. példászerint végeztük). Vizsgálathoz felhasznált állatok: 40 db 50 Üj-Zélandi nyúl, 1:1 ivararányban, megfelelő körülmények között tartva, etetve, beállított hőmérséklet és világítás mellett. Vizsgálat menete: a) az állatok hátbőrének depilálása, egyes csogg portok scarifikálása b) kezelés dermálisan a vizsgálati mintával, dózis: 0,5 g minta/állat/nap, időtartam: 5 nap c) vérvétel és a vérszérum antibiotikum tartalmának meghatározása: a vérvétel a kezelés után 3 órával történt, marginális fülvénából. A vérszérum primicin koncentrációjának meghatározása agardiffúziós mikrobiológiai módszerrel történt, teszt-organizmusként Bacillus subtilis ATCC 6633-t 65 alkalmazva. Primicin-standardként fermen-3
