197931. lajstromszámú szabadalom • Eljárás magas antitrombotikus aktivitású mukopoliszacharid kompozíciók előállítására

197931

7

8

Frakciói

2

3

k

5

6

7

'di

n

>o

I’ol Ímerizáció- f ok

diszacharíd

te íra - szachar id

hexa - s/aermr i tí

oktaszachar id

dekaszachar i ü

dodekaszacharid

dodekaszacharidnál

hoszszabb

'O

M

Irt

•3

:Z3

Tömeg (g)

1 , 2

5,6

12

9,8

8

6,2

4 ,3

u_

Ossz tömegre vonatkoztatott \

2 , 54

11,8

2 5,4

20,8

16,9

13,1

9,1

‘J /.

u l tót / k ;j r b u x i. 1 arány

0,9

0,97

1,15

1,33

1,45

1,48

1 , 55

Tömeg (g)

0

0,42

1,8

4 , 6

6,6

6,9

28

O

Ossz tömegre vonatka? t a t o 11 \

0

0,86

5,7

9,5

13,7

14,3

58

vO

CSI

>~

O

Szulfát/karboxil

arány

/.

1 ,2

1 ,34

1,45

1 , 54

1 ,61

1 , 82

Következtetések

A táblázat adataiból látható, hogy

1) a FelüIúszó folyadékfázisban lényegében tetra-, hexa-, okta- és dekaszacharidok, míg a CY 216 D termékben főleg dékaszacharidnál hosszabb termékek találhatók, vagyis az etanolos frakcionálás a molekulák hossza vonatkozásban is szelektál, és

2) ugyanazon polimerizációfok esetében a CY 216 D-ből képződött oligoszacharidok esetében a szulfát/karboxilarány magasabb, mint a felülúszó folyadékból elkülönített oligoszacharidok esetében, vagyis mindegyik, homogén polimerizációfokú oligoszacharid esetében az etanolos frakcionálás a szulfatálási fok vonatkozásában szelektálást végez.

2. példa

5000 g injektálható heparint feloldunk 18°C-on 45 liter ionmentesített vízben. Az 1. példában isim .letett módszerhez hasonló módon járunk el, azonban a reagensek mennyiségét tízszeresére növeljük, vagyis

— 150 g nátrium-nitrit 3 liter vízzel készült oldatát adagoljuk,

— a reakcióelegy térfogatát 50 literre állítjuk be,

— 50 g nátrium-bór-tetrahidridet használunk,

— 100 liter etanollal végezzük a kicsapást,

— 90 liter '. ízzel végezzük az újraoldást,

— 1000 g nátrium-kloridot adagolunk,

— a végtérfogatot 100 literre állítjuk be és

— végül 100 liter etanolt adagolunk.

A nátrium-bór-tetrahidriddel végzett kezelés, illetve etanolos kicsapás után kapott termék USP-titere 38 lU/mg. Yin-Wessler titere 35 1 78 lU/mg, így az arány 4,68.

Ilyen módon 2230 g mennyiségben a következő paraméterekkel rendelkező terméket kapjuk:

USP-titer = 54 lU/mg 40 Yin-Wessler titer = 232 IU/mg

YW/USP titerek aránya = 4,3

átlagos molekulatömeg = 4000—5000

dalton

45 3. példa

a) Az 1. példában ismertetett módon járunk el, de a nitrites lebontás után a reakcióelegyből a terméket elkülönítjük, és ebből 43 g-ot feloldunk szobahőmérsékleten 1200 ml desz~ 50 tillált vízben. A kapott oldathoz intenzív keverés közben 7 g kálium-bór-hidridet adagolunk. A kapott reakcióelegyet 2 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd ecetsavat adagolunk a pH 4,0-ra beállításához szükséges mennvi- 55 ségben, a fölös kálium-bór-hidrid elbontása céljából.

Ezután a reakcióelegyet 30 percen át keverjük, majd a pH-t 7.5-re beállítjuk 5N vizes nátrium-hidroxid-oldattal és ötszörös térfogatgQ mennyiségű etanolt adagolunk. A kivált csapadékot elkülönítjük, az anyalúgot leszívatjuk, a csapadékot tiszta etanollal mossuk és 60°C-on vákuumban szárítjuk.

46,5 g mennyiségben 2,5-anhidro-mannit végcsoportokat tartalmazó terméket kapunk 65 a következő jellemzőkkel:

5