197928. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gonadorelin és gonadorelin-analóg hormonszintézis peptid köztitermékének racemátszegény előállítására
197928 65%-os hozammal 174,8 g cím szerinti termeket nyerünk. A kapott termék olvadáspontja 202—208°C (bomlik).-13,2° (c=l, dimetil-acetamid). 4. referencia példa Szeril-iiroziíi (H-Ser-Tyr-OH) előállítása 4 literes négynyakú lombikban szobahőmérsékleten 2,0 1 metanolban és 1,0 1 dimetil-formamidban 177,0 g benzil-oxi-karbonil-szeril-tirozin-p-nitro-benzil-észtert (Z-Ser-Tyr-ONb) oldunk. Az oldathoz 10,0 g, vízzel nedvesített aktívszénhordozós palládiumkatalizátort adunk, és az elegyet szobahőmérsékleten keverés közben 2 órán át hidrogénezzük. Ezután az elegyet leszűrjük, 2:1 arányú metanol, DMF eleggyel kétszer mossuk. A szűrletet vákuumban szárazra pároljuk. A visszamaradó anyagot diizopropil-éterben felvesszük, miközben a termék pelyhes, gyorsan ülepedő csapadék formájában kiválik. A csapadékot kiszűrjük, majd vákuumban szárítjuk. Ily módon 87%-os hozammal 100,3 g terméket nyerünk. [a] p-'=-f-33,2° (c— 1, metanol). 5 referencia példa Z-Trp-Ser-Tyr-OH előállítása 500 ml DMF-ban 100,3 g 77%-os szeril-tirozint szuszpendálunk. A szuszpenziót 249 g 50%-os, dimetil-formamidos Z-Trp-ONSu-oldattal és 35 ml N-etil-morfolinnal reagáltatjuk. Körülbelül 2 óra alatt keverés közben szobahőmérsékleten a szuszpenzió feloldódik. Ezután az elegyből az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a visszamaradó anyagot 500 ml etil-acetátban felvesszük. Az etil-acetátos fázist 1 1 85%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal keverjük össze, majd a szerves fázist DC eljárással történő ellenőrzést követően elöntjük, a vizes fázishoz ismét 1 liter etil-acetátot adunk és 1,4 liter 10%os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal óvatosan magsavanyítjuk. A szerves fázist elkülönítjük, 1 liter vízzel mossuk és vákuumban körülbelül 300 ml-re bepároljuk. A bepárlás közben a termék kristályosodása már megkezdődik. A kristályosodást 1,5 titer diizopropil-éter hozzáadásával teljessé tesszük. A kristályokat, majd 40°C-on vákuumban szárítjuk. Ily módon 75%-os hozammal 126,7g terméket nyerünk. A kapott termék olvadáspontja 165—172°C. [a]p2=-j-6,2° (c—1, metanol). 4. példa Z-T rp-Ser-Tyr-D-Ser( But)-Leu-Arg-Pro--NHEt-Tos-OH előállítása 100 literes keverős tartályba 60 kg (63 liter) DMF-t töltünk, majd ebben egymás után 10,34 kg (11,5 mól) H-D-Ser(But)-Leu-Arg-Pro-NHEt-2Tos-OH-t, 6,77 kg (11,5 mól) Z-Trp-Ser-Tyr-OH-t oldunk, és az oldatot -|-5°C-ra hűtjük. Adagoló edénybe 10,13 kg (11,12 1) N-etil-morfolint töltünk, és ebből 8 13 először 1,5 litert folyatunk a reakcióelegybe. Ezután +5—10°C hőmérsékleten kb. 1 óra alatt a maradék N-etil-morfolinnal együtt 15,3 kg (11,1 1) n-propil-foszfonsavanhidridet adunk 50%-os metilén-kloridos oldat formájában a reakcióelegyhez. Az adagolás befejezése után a reakcióelegy hőmérsékletét 25°C körüli hőmérsékletre emeljük és az elegyet 5 órán át keverjük. A reakcióoldatot ezután vákuumban kb. 25 I térfogatra pároljuk be. A visszamaradó bepárolt anyagot 250 literes keverős tartályban 150 liter n-butanollal keverjük össze. A tartálynak a fázisok elválasztására alkalmas edénye is van. Az elválasztott butanolos fázist egymás után a következő vizes oldatokkal extraháljuk: nátrium-karbonát-oldat, hátrium-klorid-oldat, nátrium-karbonát-oldat, víz, kálium-hidrogén-szulfát-oldat, és nátrium-klorid-oldat. A szerves fázist ezután kb. 50 1 térfogatra pároljuk be. A bepárolt oldatot a keverős adagoló tartály edényébe visszük át, a keverős tartályba 165 kg (230 1) diizopropil-étert töltünk, és ebbe a folyadékba 1 óra alatt keverés közben beadagolunk 25 liter butanolos koncentrátumot. A keletkező csapadékot még egy órán át keverjük, majd lecentrifugáljuk. A butanolos koncentrátum másik felét ugyanígy dolgozzuk fel. A terméket vákuumban 35—40°C-os hőmérsékleten szárítjuk. Ily módon 90%-os hozammal 13,5 kg cím szerinti terméket nyerünk. [ct]p2=—33,7° (c=l, dimetil-acetamid). SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás az (I) általános képletű pép tidek előállítására— a képletben Z jelentése benzil-oxi-karbonil-csoport, A4 jelentése Gly vagy D-Ser(But) és X jelentése OBut, Arg-Pro-Gly-NH2 vagy Arg-Pro-NFI (1—3 szénatomos alkil) —, azzal jellemezve, hogy a (II) képletű tripeptidet — ahol Z jelentése a tárgyi körben megadott — egy (III) általános képletű pepiiddel — ahol A4 és X jelentése a tárgyi körben megadott — vagy annak savaddíciós sójával reagáltatunk poláros oldószerben, előnyösen dimetil-acetamidban, dimetil-formamidban, dimetil-szulfoxidban, foszforsav-trisz (dimetil-amid)-ban, N-metil-pirrolidinben, vízben vagy e megnevezett oldószerek vízzel, kloroformmal, metilén-kloriddal vagy etil - -acetáttal alkotott elegyében —10°C és szobahőmérséklet között, kondenzálószer jelenlétében. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás az X helyettesítőként OBut-t, Arg-Pro-NHC2H5-t vagy Arg-Pro-Gly-NH2-t tartalmazó (I) általános képletű vegyületek előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfelelően helyettesített (III) általános képletű peptjdet vagy savaddíciós sóit alkalmazzuk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás az A4 helyettesítőként Gly-t, X helyén Arg-Pro-Gly-14 5 10 15 20 25 30 35 40 46 50 56 60 06
