197870. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gyógyászati hatású 8-(rövidszénláncú alkil)-biciklo [4,2,0]-oktán származékok, valamint ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
31 197870 3. példa Trombocita-aggregáció gátlása Egészséges, gyógyszermentes önként jelentkezők vénás vérét 15 ml-es vákuum-edényekbe gyűjtöttük és 0,5 ml 11,4%-os nátrium-citrát antikoagulánst adtunk a vérhez. Azután a vért Sorvall GLC-28 centrifugával 15 percig szobahőmérsékleten centrifugáltuk 150 g-vel és a felszínen úszó, trombocitában dús plazmát leszivatással elkülönítettük. A trombocitában szegény plazmát abból a vérből nyertük ki Eppendorf centrifugával 3 percig szobahőmérsékleten 12 800 g-vel történő centrifugálással, amelyből a trombocitában dús plazmát már eltávolítottuk. A trombocita-aggregációt Bőm módszerével [J. Physiology 168, 178 (1963)], Payton aggregométerben végeztük. A trombocita-aggregáció megindítására I ml trombocitákban dús plazmához a vizsgált vegyület 10 pl különböző koncentráció oldatát illetőleg ugyanennyi hatóanyag nélküli vívőanyagot, valamint 2—5 nmól adenozin-difoszfátot adunk és ezt az elegyet az aggregométer-küvettában 37°C-on 5 percig inkubáltattuk, percenként 500 fordulattal történő keverés mellett. Azután minden egyes vizsgált vegyületre vonatkozólag megrajzoltuk fél-logaritmikus papíron a százalékos gátlásnak a koncentrációval való szembeállításából adódó görbét és az 50%-os gátlásnak megfelelő koncentrációt tekintettük az illető vegyület IC50 értékének. Valamennyi vizsgált vegyületből (1—2 mg mennyiségből) 0,01 mól koncentrációjú törísoldatot készítettünk 59 mmól nátrium-karbonátot tartalmazó 10%os etanolban. Ebből vízzel készítettük a vizsgálatokhoz alkalmazott hígításokat. A kapott vizsgálati eredményeket az alábbi táblázatban foglaltuk össze. Vegyület IC50 (pM) PGE, 0,02—0,05 (Z)-(3'S, ÍR, 2R, 3S, 6R)-4-- [2- (3’-hidroxi-3’-ciklohexil-prop-1 ’-inil) -3-hidroxi-8-endo-metil-biciklo [4.2.0] okt-7--ilidén] -vajsav 0,024 (Z)-(3’S, IS, 2S, 3R, 6S)-4-- [2- (3’-hidroxi-3’-ciklohexil-prop-l’-inil) -3-hidroxi-8-endo-metil-biciklo [4.2.0] okt-7--ilidén]-vajsav 0,0082 (E) - (3’S, IS, 2S, 3R, 6S) -4-- [2- (3’-hidroxi-3’-ciklohexil-prop-1 ’-inil) -3-h'idroxi-8-endo-metil-biciklo [4,2,0] okt-7--ilidén] -vajsav 0,0068 4. példa Vérnyomáscsökkentő (antihipertenzív) hatás A prosztaglandin-jellegű vegyületek antihipertenzív hatását spontán hipertenzív (SHR/NCrlBR) törzsű patkányokon értékeltük. Éterrel történő altatás után combi artériás és vénás kanült impregnáltunk és a patkányokat hátukon fekvő helyzetben rögzítettük. Az altató hátás megszűnése után lidokainnal kezeltük a patkányokat. A vérnyomást a combi artériás kanül útján mértük és Beckmann R 611 poligráffal regisztráltuk. Mindegyik vegyület hatását 4 patkányból álló csoporton vizsgáltuk. A kísérlet elején csak vívőanyagot adtunk be az állatoknak, a vizsgált vegyületet ezután 30 perces időközökben intravénásán adagoltuk növekvő, 1, 3, 10, 30 és 100 pg/kg adagokban. Átlagos artériás alap-vérnyomásnak közvetlenül az első vizsgálati adag beadása előtt mért vérnyomást tekintettük. Az ED20 értékeket a vizsgált vegyület egyes adagjainak beadása utáni százalékos vérnyomáscsökkenés lineáris regressziója alapján számítottuk. A kapott eredményeket az alábbi táblázatban foglaltuk össze: Eredmények Vegyület___________________ED20 (pg/kg) (Z) - (3’S, IS, 2S, 3R, 6S)-4-- [2- (3'-hidroxi-3’-ciklohexil-prop-1 ’-inil) -3-hidroxi-8-endo-metil-biciklo [4.2.0] okt-7--ibdén]-vajsav 41 (E) - (3’S, IS, 2S, 3R, 6S)-4-- [2- (3’-hidroxi-3’-ciklohexil-p "op-1 ’-inil) -3-hidroxi-8-endo-metil-biciklo [4.2.0] okt-7--ilidén]-vajsav 13 9. példa Toxicitás 350—550 g súlyú Guineái sertéseknek 1 mg/kg adagolásban (Z)-(3’S, ÍR, 2R, 3S, 6R) -4- [2- (3’-hidroxi-ciklohexil-prop-1 ’-inii-3- -h idroxi-8-en do-metil-biciklo [4.2.0] okt-7-Midén] -vajsavat adtunk oldatban orálisan. Semmilyen toxikus hatást nem észleltünk. A találmány szerinti más vegyületek sem mutattak semmilyen toxikus hatást. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás az (1), (2) vagy (3) általános képletű biciklo [4.2.0] oktáp - származékok — ebben a képletben Y jelentése exo- vagy endo-helyzetű 1 — 4 szénatomos alkilcsoport; n jelentése 2 vagy 3; R2 jelentése hidrogénatom; R3 jelentése 5 vagy 6 szénatomos cikloalkilcsoport előállítására, azzal jellemezve, hogy a) valamely (XIV) vagy (XV) általános képletű vegyületet — ezekben a képletekben Y, R2 és R3 a fent megadott jelentésűek — valamely a kívánt terméknek megfelelően választott (LIV) általános képletű stabilizált anionnal vagy iliddel — ahol P’ az olefinezési reakciókban szokásos maradékot képviseli; n jelentése 2 vagy 3 — vagy ennek védőcso32 17 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
