197759. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a növekedési hormont felszabadító faktor analógjai előállítására
197759 közzétett 4,105,603. számú amerikai szabadalmi leírása. A klasszikus, oldatban lefolytatott szintézis módszereit részletesen ismerteti a „Methoden der Organischen Chemie (Houben-Weyl): Synthese von Peptiden“ [A szerves kémia módszerei, (Houben-Weyl), A peptidek szintézise, szerkesztette: E. Wunsch, 1974, Georg, Thieme Verlag, Stuttgart, NSZK] című mű. A fragmens-kondenzációs szintézis-módszert például a 3,972,859. számú, 1976. áugusztus 3-án közzétett amerikai szabadalmi leírás ismerteti. További alkalmas módszereket találhatunk a 3,842,067. számú (1974. október 15.) és 3,862,925. számú (1975. január 28.) amerikai szabadalmi leírásokban. E módszerek közös vonása az, hogy a különféle aminosavak oldalláncában szereplő reakcióké^es csoportokat alkalmas védőcsoportokkal megvédjük, e védőcsoportok megakadályozzák, hogy az adott helyen kémiai reakció játszódjék le, mindaddig míg a védőcsoportot véglegesen le nem hasítjuk. E módszereknek általában az is közös jellemzője, hogy egy adott aminosav vagy fragmens a-aminocsoportját megvédjük, és így reagáltatjuk a molekula karboxilcsoportját, majd ezután az a-aminocsoport védőcsoportját szelektíven eltávolítjuk, majd így visszük reakcióba a szabaddá tett aminocsoportot. Ennek megfelelően e módszerek közös vonása, hogy a szintézis egyik lépéseként egy olyan köztiterméket állítunk elő, amely már tartalmazza a peptidláncban valamennyi szükséges aminosavat, a kívánt sorrendben, továbbá az egyes aminosavak oldalláncában szereplő csoportok védőcsoportokat viselnek. A találmány szerint úgy járunk el, hogy X'-Rj (X vagy X2) -R2-Asp (X3) -Ala-Ile-Phe-Thr(X4)-R8(X4 vagy X6)-Ser-(X4)-RI0(X2)■Arg(X6)-R^fX6 vagy X7)-R13-R14-GIy-Gln(X5)-Leu-R18(X2)-Ala-Arg(X6) -Lys(X7) -Leu-Leu-R24(X vagy X?)-R28(X3)-Ile-Nla-Y (II) általános képletű köztitermékről, ahol a fenti általános képletben X, X1, X2, X3, X4, X5, X6 és X7 jelentése egyaránt hidrogénatom vagy a peptidkémiában önmagában ismert védőcsoport, X9 jelentése hidrogénatom, a peptidkémiában önmagában ismert védőcsoport vagy a peptidkémiában önmagában ismert gyanta-hordozó, R|, R2, Rg, Rio. Rl2> Rl3> Ru> Rl8’ ^24" ^28» és R29 a fenti, és Y — NHX9, -R28(X4 vagy X5)-NHX9, R28(X4 vagy X5)-R29(X6-NHX9, -R,8(X4 vagy X5)-R29(X6) -GLN (X5) -Gln(X3)-Gly-NHX9, NHZ, -R28(X4 vagy X5)-NHZ, -R28 (X4 vagy X5) -RTM(X6) -NHZ vagy -R28(X4 vagy X3) -R29(X®) -Gin (X5) -Gln(X3)-Gly-NHZ csoport, ahol Z etilcsoport vagy a peptidkémiában önmagában ismert gyanta-hordozó, a peptidkémiában önmagában ismert módon lehasítjuk a védőcsoportot vagy védőcsoportokat és/vagy lehasítjuk a pepiidet a gyantáról. 3 Az X1 helyén szereplő, az a-aminocsoport védésére alkalmas csoportok a polipeptidek „stepwise„-szintézisében szokásosan alkalmazott védőcsoportók lehetnek. Az a-aminocsoportok védésére használt X1 csoport lehet például 1) aromás uretán-típusü védőcsoport, mint például fluorenil-metoxi-karbonil-csoport, benziloxi-karbonil-csoport vagy helyettesített benziloxi-karbonil-csoport, mint például p-klór-benziloxi-karbonil-csoport, p-nitro-benziloxi-karbonil-csoport, p-bróm-benziloxi-karbonil-csoport vagy p-metoxi-benziloxi-karbonil-csoport; 2) alifás uretán-típusu védőcsoport, mint például tercier-butoxi-karbonil-csoport, diizopropil-metoxi-karbonil-csoport, izopropoxi-karbonil-csoport, etoxi-karbonil-csoport vagy alliloxi-karbonil-csoport; vagy 3) cikloalifás uretán-típusu védőcsoport, mint például ciklopentil-oxi-karbonil-csoport, adamantiloxi-karbonil-csoport vagy ciklohexiloxi-karbonii-csoport. . Az a-aminocsoport védésére előnyösen tercier-butoxi-karbonil-csoportot használunk, még abban az esetben is, ha a peptidlánc 1-es helyén Na-metil-helyettesítő van. X jelentése hidrogénatom vagy a hisztidin imidazolgyűrüje 1-es nitrogénatomjának védésére alkalmas védőcsoport, például p-toluol-szulfonil-csoport. X2 jelentése lehet a tirozin fenolos hidroxilcsoportjának védésére alkalmas védőcsoport, például tetrahidro-piranilcsoport, tercier-butil-csoport, tritilcsoport, benzilcsoport, 2 - karboxi-benzoil-csoport, 4-bróm-2-karboxi-benzoil-csoport vagy 2,6-diklór-benzil-csoport. Előnyös védőcsoport a 2,6- -diklór-benzil-csoport. X2 jelentése lehet hidrogénatom is, ez azt jelenti, hogy az adott helyen lévő aminosav oldalláncát nem védjük. X3 jelentése hidrogénatom vagy az aszparaginsav vagy glutaminsav karboxilcsoportjának védésére alkalmas észteresítő csoport, például benzilcsoport, 2,6-diklór-benzil-csoport, metilcsoport vagy etilcsoport. X4 jelentése lehet a treonin vagy szerin hidroxilcsoportjának védésére alkalmas védőcsoport, például acetilcsoport, benzoilcsoport, tercier-butil-csoport, tritilcsoport, tetrahidro-piranil-csoport, benzilcsoport, 2,6- -diklór-benzil-csoport vagy 2-karboxi-benzoil-csoport. Előnyös védőcsoport a benzilcsoport. X4 jelentése lehet hidrogénatom is, ez azt jelenti, hogy a hidroxilcsoportot nem védjük. X5 jelentése hidrogénatom vagy az aszparagin vagy glutamin oldalláncában lévő amidocsoport védésére alkalmas védőcsoport, és előnyösen xantilcsoport. X6 jelentése az arginin guanidinocsoportjának védésére alkalmas védőcsoport, például nitrocsoport, p-toluol-szulfonil-csoport, 2- -karboxi-benzoil-csoport, adamantiloxi -4 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
