197586. lajstromszámú szabadalom • Eljárás bestatin előállítására
197586 lyosítás után. Olvadáspontja 161,0—161,5°C (irodalmi adat: 154—155°C). IR-spektrum: 3300, 1705 és 1638 cm-1. (2) /(2S, 3R)-3-(Benziloxi-karbonil-amino) -2-hidroxi-4-fenil-butanoil/-L-leucin-benzilészter 10 ml tetrahidroíuránban feloldunk 406 mg (1,24 millimól), a példa (1) részében ismertetett módon előállítható (2S, 3R) - (benziloxi-karbonil-arnino) -2-hidroxi-4-fenil-vajsavat, 609 mg (1,48 millimól, 1,2 mólekvivalens) L leucin-benzilészter-toluolszulfonátsót, 200 mg (1,48 millimól, 1,2 mólekvivalens) 1-hidroxi-benztriazolt és 206 pl (1,48 millimól, 1,2 mólekvivalens) trietil-amint. Az így kapott oldathoz keverés közben hozzáadjuk 281 mg (1,36 millimól, 1,1 mólekvivalens) diciklohexil-karbodiimid 10 ml metiién-kloriddal készült, jéghideg oldatát, majd a keverést egy éjszakán át folytatjuk és ezután a reakcióelegyet bepároljuk. A maradékhoz etil-acetátot adunk, majd a kapott elegyet gyapotrétegen átszűrjük. Az etil-acetátos fázist egymás után 1 n kénsavval, vízzel, 2%-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és ismét vízzel extraháljuk, majd vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk és bepároljuk. A maradékot etil-acetát és hexán elegyéből átkristályosítva 630 mg (1,18 millimól) mennyiségben 95%-os kitermeléssel, a cím szerinti vegyületet kapjuk. Olvadáspontja: 127,0—127,5°C (irodalmiadat 122_123°C) IR-spektrum: 3400, 1740, 1710, 1655, 1635 és 1510 cm-'. (3) /(2S, 3R)-3-Amino-2-hidroxi-4-fenil-butanoií/-L-leucin (bestatin) 309 mg (0,58 millimól) /(2S, 3R)-3-(benziloxi-karbonil-amino)-2-hidroxi-4-fenil-butanoil/-L-leucin-benzi!észter és 30 mg palládiumkorom keverékéhez hozzáadunk metanol és víz 2:1 térfogatarányú elegyéből 15 ml-t, majd az így kapott reakcióelegyet hidrogénatmoszférában egy éjszakán át keverjük. A reakcióelegyet ezután Celite márkanevű szürőanyagból készült rétegen átszűrjük, majd a szűrletet bepároljuk. Így 179 mg (0,58 millimól) menynyiségben kvantitatív hozammal a cím szerinti vegyületet kapjuk. Olvadáspontja: 232—233°C (irodalmi adat: 233_236°C) IR-spektrum: 3200, 2950, 1690, 1635 és 1533 cm-'. Tömegspektrum: 308 (M+), 217 (M+-pHCH2)+. Referenciapélda (1)3 (R) -Benziloxi-karbonil-amino-4-fenü-butén Argongáz-atmoszférában 63,6 g (0,158 mól) metil-trifenil-foszfónium-jodid 300 ml tetrahidrofuránnal készült, jéghideg szuszpenziójához 23,5 mg (0,135 millimól) kálium-hidridet adunk 23%-os ásványolajos szuszpenzió formájában, majd a reakcióelegyet szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. A reakcióelegyhez ezután 150 ml vízmentes 4 5 toluolt adunk, majd állni hagyjuk, amikor a metilén-trifenil-foszforán tetrahidrofurán és ■oluol elegyével alkotott oldata képződik. Argongáz-atmoszférában 200 ml vízmentes toluoiban feloldunk 15,4 g (47 millimól) N(benziloxi-karbonil)-fenil-alanin-etil-észtert, majd a kapott oldatot szárazjégből és etanolból álló fürdőben —78°C-ra lehűtjük. Az így lehűtött oldathoz ezután 30 perc leforgása alatt intenzív keverés közben cseppenként hozzáadunk 100 ml 1,0 mólos toluolos diizopropil-alumínium-hidrid-oldatot. További 30 perces keverést követően a reakcióelegyhez 200 ml 2 n sósavoldatot adunk, majd az ekkor kapott elegyet szobahőmérsékletre melegedni hagyjuk. Ezután 300—300 ml etil-acetáttal az elegyet háromszor extraháljuk, majd az egyesített extraktumot vízzel mossuk és vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk. Miután a megszárított szerves fázist 40°C alatti hőmérsékleten bepároltuk, a maradékhoz 200 ml vízmentes toluolt adunk argongáz-atmoszférában,és a kapott oldatot szárazjégből és etanolból álló fürdőben —78°C-ra lehűtjük. Az így lehűtött oldathoz hozzáadunk az előző bekezdésben ismertetett módon előállított metil én-trif en il-foszforán-oldat bői 340 ml-t 1 óra leforgása alatt intenzív keverés közben, majd a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 30 percen át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyhez 200 ml telített vizes ammónium-klorid-oldatot adunk. Az ekkor kapott elegyet 300—300 ml etil-acetáttal háromszor extraháljuk, majd az egyesített extraktumot telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk és bepároljuk. A maradékot szilikagélen kromatográfiásan tisztítjuk, először metilén-klorid és n-hexán 1 : 1 térfogatarányú elegyével, majd ezután ugyanezen oldószerek 2 : 1 térfogatarányú elegyével eluálva. Az eluátumot bepároljuk, majd benzol és hexán elegyéből átkristályosítjuk, 8,44 g (3,00 millimól) menynyiségben 64%-os kitermeléssel fehér tűkristályok alakjában a cím szerinti vegyületet kapva. Olvadáspontja: 92,6—93,0°C. IR-spektrum (KBr) : 3330, 1680, 1525 és 1250 cm-1. (2) 3 (R) - (N-Benzil-N-benziloxi-karbonil)-amino-4-fenii-butén 5,7 ml 23%-qs ásványolajos kálium-hidrid-diszperziót (32;8 millimól) argongáz-atmoszférában ismételten vízmentes hexánnal mosunk az ásványolaj eltávolítása céljából. Ezután a káli.um-hidridhez 20 ml vízmentes benzolt adunk, majd a kapott elegyet jeges fürdőben keverjük. Ezt követően cseppenként hozzáadjuk 7,71 g (27,4 millimól) 3 (R)-benziloxi-karbonil-amino-4-fenil-butén 20 ml dimetil-formamiddal készült oldatát, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 30 percen át keverjük. Ezután a reakcióelegyhez jeges hűtés közben hozzáadunk 3,91 ml (32,9 millimól) benzil-bromidot, majd az adagolás befejezése után a reakcióelegyet szoba-6 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
