197517. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vírusfertőzések kezelésére alkalmas terápiás készítmény előállítására
A találmány tárgya eljárás vírusfertőzések kezelésére alkalmas terápiás készítmény előállítására, mely hatóanyagként attenuált Newcastle vírust tartalmaz. Vakcinákat világszerte alkalmaznak a legkülönbözőbb vírusok által okozott betegségek megelőzésére. így ismert többek között a Newcastle vírus legyengített (attenuált) vagy elölt formáját tartalmazó vakcina is. A Newcastle betegség (NDV) a szárnyasok idegrendszerének, emésztő- és légzőrendszerének vírusos betegsége. A Newcastle betegség, másképpen baromfipestis okozója a Myxovirus multiforme. A vakcinát önmagában ismert módszerekkel állítják elő, így a vírus például jól tenyészthető embrionált tojásban és több féle szövettenyészetben. A vakcinák bizonyos vírusok által okozott megbetegedések elleni védelmet szolgálnak. Ugyanakkor, a legtöbb esetben nem megoldott vírus által okozott megbetegedések esetén a terápia, mivel az általánosan alkalmazott kemoterápiás szerek csak mérsékelt hatást nyújtanak, és terápiára az illető betegség ellen előállított vakcinák nem alkalmasak. Világszerte nagy erőfeszítéseket tesznek vírusellenes készítmények kidolgozására, melyek terápiásán alkalmazhatók. Á találmány célkitűzése ezért olyan gyógyászati készítmények előállítása, melyekkel vírusok által okozott megbetegedések terápiája, lehetőleg minél szélesebb hatásspektrummal végezhető. Meglepő módon úgy találtuk, ha a Newcastle vakcinák, illetve a Newcastle betegség legyengített (attenuált) formáját alkalmazzuk a legkülönbözőbb vírusfertőzések kezelésére, meglepően jó eredményeket kapunk. A találmány tárgya tehát eljárás herpesz, rákellenes és veszettség elleni, valamint AIDS- ben szenvedő betegek kezelésére alkalmas terápiás készítmény előállítására, melynek során Newcastle vírust legalább egy, gyógyászatilag elfogadható hordozóanyaggal keverünk. Megkívánjuk ugyanakkor jegyeznini, hogy vizsgálataink szerint a találmány szerinti készítmény hatékony más, a fentiekben nem említett, vírusos jellegű megbetegedések kezelésére is. Humán vakcinák esetén azok általában elölt vírusokat tartalmaznak. A találmány szerinti készítményben azonban célszerűen a vírus attenuált formáját kell alkalmazni. A készítmény alkalmazásánál feltehetően vírusinterferencia lép fel; azaz az adagolt vírus igyekszik kiszorítani a fertőző vírust. A találmány szerinti készítményeket önmagukban ismert módon állítjuk elő úgy, hogy a vakcinát, illetve a legyengített vagy elölt vírust valamely gyógyászatban általánosan alkalmazott hordozóanyaggal keverjük. Adagolhatok a készítményhez különböző potencirozószerek, például trankvillánsok is. A vakcinák, illetve maga a legyengített vírus előállítása a szakirodalomban általá1 2 nosan ismert, és gyakorlatban alkalmazott módszerekkel történik. így például 10—11 napos előkeltetett csirkeembrióból készített primer vagy szekunder fibroblaszt tenyészetet alkalmaznak, és a szövettenyészetben elszaporított, csökkentett virulenciájú vírusból készítik a liofilizált vakcinát. Más módszer szerint az Avian bursa vagy Avian bronchitis vírust előkeltetett tojásokba juttatják, és a tojásokat 37°C hőmérsékleten inkubálják. A csirke embriókat ezután feldolgozzák, és a kinyert, csökkentett virulenciájú vírusból készítik a liofilizált vakcinát. A vakcina készítéséhez például a VI. Gyógyszerkönyv előírása szerint vizsgált, steril és legalább 106 TCID50/0,1 ml titerű vírusanyagot használnak. A steril vírusanyaghoz 50%-os arányban steril sovány (fölözött) tejet kevernek, és ebből 2 ml-enként 10 ml-es liofilizálható üvegben liofilizálnak. A Marék-vírust például célszerűen LIBDV szövettenyészeten passzálják, majd 7—10 magas SPF előkeltetett tojásembriókból ké szített sejttenyészeten szaporítják. A fenti vakcinák a találmány szerinti készítmény hatóanyagaként alkalmazhatók. Természetesen alkalmazhatók maguk a legyengített vírusok, vagy azok bármilyen, például fiziológiás oldatai is. A készítmény előnyösen liofilizátum, mely ben a vírus és a hordozóanyag egyaránt jelen van. Ugyancsak állhat a készítmény oldat, kúp, kapszula, emulzió, szuszpenzió, kenőcs, stb. formában is. A találmány szerinti készítmények dózisa mindenkor a kezelendő személytől, a készítmény összetételétől, a betegség stádiumától és a vírus-törzstől függ. A találmány szerinti készítményeket számos állatkísérletben és humán kísérletben vizsgáltuk, és azok során igen kedvező terápiás hatást kaptunk, mind a fentiekben említett vírusfertőzésekkel, mind egyéb vírusfertőzésekkel szemben. A találmány szerinti készítmények toxikus mellékhatást nem mutattak. Tüneti kezelésen kívül a találmány szerinti készítmények alkalmasak voltak preventív védelemre is. 1. példa Különböző heterológ vírus-vakcinák hatását vizsgáltuk a veszettség vírusa ellen egereken. Az állatokat hét csoportba osztottuk, és az alábbi vakcinák 0,5 ml-ével kezeltük intraperitoneálisan: 1. csoport: Newcastle vírus (NDV), 2. csoport kacsa hepatitis vírus (DHV), 3. csoport: Avian encephalitis vírus (AEV), 4. csoport: Avian bursa vírus (ABuV), 5. csoport: Avian bronchitis vírus (ABV), 6. csoport: kutya hepatitis vírus (CHV), 7. csoport: kutya szopornyica vírus (CDV). Három nap elteltével minden csoportból húsz állatot és a 8. (kezeletlen) csoportból ugyancsak húsz állatot patogénként veszettség vakcinával (RV) inokuláltunk intrace-2 197517 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
