196845. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A-21978C-származékok előállítására
1 2 A találmány tárgya javított eljárás az A-21978C (I) általános képié tu ciklusos pepiid antibiotikumok származékainak előállítására, ahol az általános képletben R jelentése 5 -14 szénatomszámú alkanoil-csoport. Részletesebben a találmány tárgya eljárás, mely szerint a) Streptomyces reseosporus NRRL 15998 vagy NRRL 11379 törzset, vagy azok valamely mutánsát vagy variánsát asszimilálható szén- és nitrogénforrást és szervetlen sókat — valamint egy vagy több 5-14 szénalomos alkánkarbonsavat, ezek valamely észterét vagy sóját — tartalmazó tápközegben süllyesztett, levegőztetett körülmények között tenyésztjük, vagy b) a Cq Cr faktorok és ezek komplexének előállítására a Streptomyces reseosporus NRRL 15598 törzset vagy annak valamely mutánsát vagy variánsát asszimilálható szén- és nitrogénforrást és szervetlen sókat tartalmazó tápközegben, süllyesztett, levegőztetett körülmények között tenyésztjük, a kapott antibiotikumot és/vagy komplexet izoláljuk, és kívánt esetben az egyes faktorokat kinyerjük a komplexből. A találmány szerinti eljárás előnyei: 1. Az NRRL 15998 törzs esetén a komplexet és faktorokat magas hozammal nyerjük, 2. a korábbi eljáráshoz képest kevesebb lépést tartalmaz, és 3. kevesebb időt igényel. Az A-21978C antibiotikum család kiváló baktériumellenes hatással rendelkezik. Különösen fontos csoportjuk az olyan A-21978C származékok, amelyek az (I) általános képlettel írhatók le (lásd még Bernard J, Abbot, Davis S. Fukuda és Manuel Debono, 4 537 717 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás). Korábban ezeknek a származékoknak az előállítása soklépéses folyamatot igényel, amely időigényes, nem jó termelésű és drága volt. A találmány tárgya javított eljárás az A-2I978C származékok közvetlen előállítására. A korábbi eljárás az (I) általános képletű származékok, mint például az A-21978C dekánoil-származéka előállítására, az alábbi: 1. Az A-21978C termelő kultúra fermentációja. a, Folyékony nitrogénben tárolt törzzsel történő iniciálás. b, Első inokulum stádium (48 óra) c, Második inokulum stádium (24 óra) d, Harmadik inokulum stádium (24 óra) e, Fermentálás (140 óra). 2. Szűrés, ioncserélő gyantán való adszorpció és cluálás, majd betöményítés. 3. t-Butoxi-karbonil-védőcsoporttal ellátott komplex előállítása, 4. A védett komplex betöményítése. 5. A dezacílczó, például Actinoplanes utahensist alkalmazó kultúra tenyésztése. a, Folyékony nitrogénben tárolt törzzsel való iniciálás, b, Első inokulum stádium (72 óra) c, Második inokulum stádium (48 óra) d, Fermentáció (67 óra), 6. A komplex dezacilezése a dezacilező tenyészettel. 7. Szűrés, adszorbeió ioncserélő gyantán és eluálás, majd betöményítés. 8. Rcacilezés. 9. A védöcsoport hidrolízise. 10. Végső tisztítás. A találmány szerinti új eljárás során célszerűen egy 5-14 szénatomszámú alkán-karbonsavat (R-OH) vegyületet, amelyben R a fenti) vagy ennek észterét vagy sóját, adagoljuk az A-911278C termelő tenyészethez a fermentáció termelési állapotában (1. e lépés) és így a megfelelő (I) általános képletű vegyületet kapjuk termékként. Ebben az eljárásban a 3., 4., 5., 6., 7., 8. és 9. lépés elhagyható. Ezen túlmenően az új eljárás jelentősen megnöveli a kívánt termék termelését. A Streptomyces roseosporus NRRL 11379 (A-21978.6) és NRRL 15988 (A-21978.65) törzs, amely az NRRL 11379 egy mutáns törzse A-219- -78C termelő kultúrák. Ezek a kultúrák a Northern Regional Research Center, US. Departement of Agriculture, Agricultural Service, Peoria, Illinois 61604, kultúra gyűjteményében megtalálhatók és a NRRL 11379 és NRRL 15998 számok alatt állnak az érdeklődök rendelkezésére. A S. roseosporus NRRL 11379 kultúrát és A-21978C antibiotikumok termelésére való felhasználásának körülményeit Robert L. Hamill és Marvin M. Hoehn leírták az 4,331, 594 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban, amelyet itt mint szakirodalmi utalást idézünk. A természetes A-21978C faktorokat a 4,331,594 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban leírták, és ezek: C0, Cj, C2, C3, C4 és C5 . A Cj, C2, C3, C4 és C5 faktorokban az (I) általános képletben R jelentése speciális 10-12 szénatomszámú alkanoil-csoport. A CQ faktort korábban egy adott elágazó 10 szénatomszámú alkanoil-oldalláncot tartalmazó komponensnek tulajdonították, később kimutatták, hogy két komponens 2 : 1 arányú keverékéből adódik. A nagyobb komponens egy 10 szénatomszámú elágazó oldalláncot tartalmaz, a kisebb komponens egy 10 szénatomszámú egyenes oldalláncot tartalmaz. A találmány szerinti eljárás leírásában az egyszerűség kedvéért a találmány szerinti eljárással előállított (I) általános képletű vegyületet A-21978C faktornak is nevezzük. A természetes faktorok kivételével a faktor ,megnevezésére az oldallánc hosszát alkalmazzuk. így például egy olyan (I) általános képletű vegyületet, amelyben R jelentése oktanoil-csoport, amennyiben a találmány szerinti eljárással állítottuk elő, A-21978Cg faktornak nevezzük. A találmány szerinti eljárásban alkalmazott 5—14 szénatomszámú alkán-karbonsav, észtere vagy sója (a szubsztrát, egyenes vagy elágazó szénláncú lehet. A Cj, C2 vagy C3 természetes faktorok előállítására egy s-metil-dekánsavat, 10-metil-dodekánsavat vagy 10-metil-undekánsavat illetve ezek észterét vagy sóját kellene alkalmazni. A találmány szerinti eljárásban az egyenes szénláncú 5-14 szénatomszámú savak, észterek vagy- sók alkalmazását javasoljuk, mert ezek könnyebben és olcsóbban rendelkezésre állnak. Különösen előnyös a találmány szerinti eljárásban alkalmazható szubsztrát a dodekánsav, ennek észterei vagy sói. Amennyiben a találmány szerinti eljárásban 5-14 szénatomszámú alkán-karbonsav-észtert alkalmazunk, az 14 szénatomszámú alkil-alkán-karbonsav-észterek alkalmazása előnyös. Az ilyen észterekben az 14 96 845 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 2
