196806. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 6H-izoxazolo[3,4-d]pirazolo[3,4-d]piridinek és ezen vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
3 196 806 4 70 mikroliter 0,5 mól trisz-puffer, p = 6,9 50 mikroliter 3H-flunitrazepám, 20 mikroliter oldószer teljes kötéshez vagy 0,1 nimól klónazcpílm nem specifikus kötéshez vagy megfelelő gyógyszerkoncentrációk, 300 mikroliter szövetszuszpenzió 3 H-flunitrazepámot, puffert és gyógyszereket, valamint 112 O-t tartalmazó kémcsöveket jégfürdőben 0—4 °C-on inkubálunk. A szövetszuszpenzió 300 mikroliteres részét hozzáadjuk 10 másodpercenként a kémcsövek tartalmához. A stoppert az első kémcsőhöz történő adagoláskor indítjuk be. Ezután a kémcsöveket 20 percig 0-4 °C-on inkubáljuk és a kísérletet a minták vákuumszűrésével állítjuk le. A szűrés Whatman GF/B szűrőkön keresztül történik. Ezt is 10 másodperces intervallumonlént végezzük. Mindegyik szűrőt azonnal átöblítjük 3X5 ml-es jéghideg trisz-puffer-mosófolyadékkal pH = 6,9 értéken. A szűrőket 10 ml Liquiscint számolókeverékben számláljuk meg. A fajlagos kötődést 1X10'6 mól klónazepám jelenlétében definiáljuk. A fajlagos kötődés az összesen megkötött ligandum kb. 97 %-a. Minden egyes gyógyszerkoncentrációnál a gátlási % a háromszoros meghatározás átlaga. A IC50 számításokat iog-probit-analízissel végezzük. I. táblázat Szorongásoldó hatás Vegyület 3 H-flunitrazcpám-kötó'dés ICS0, mól 6-etil-3-fenil-6H-izoxazoIo[3,4-d]-pirazolo[3,4-b]piridin 4,7X10"'' 3-(3-klór-fenil)-6H-izoxazolo[3,4-d]pirazolo[3,4-b] piridin 4,4X10"6 3-(4-klór-fenil)-6II izoxazolo[ 3,4-d] pirazolo[ 3,4-b ] piridin 4.0X10"7 6-etil-3-(3 fluor-fenil)-6H-izoxazolo [3,4-d]pirazolo[3,4-b]piridin 2.3X10"6 6-etil-3-(4-fuor-fenil)-6H-izoxazolo[ 3,4 -d] pirazolo[ 3,4 -b] piridin 5.3X10"7 6-etil-3 -(4 -tolil)-6H -izoxazolo-[3,4-d] pirazolo[3,4 b]piridin 9,9X10"7 6-etil 3 (4-metoxi fenil)-6H-izoxazolo[3,4-d]pirazolo[3,4-b]piridin 1.2X10"6 6-etil-3 (2-metoxi-fenil)-6H-izoxazolo[3,4 d]pirazo!o[3,4 bjpírídín 2,0X10"6 Ismert vegyület Klórdiazepoxid 3.4X10'7 A találmány szerint előállított vegyületek hatékony mennyiségét bármilyen módszerrel adagolhatjuk n betegeknek, például orálisan kapszula vagy tabletta formájában, parcntcrálisan, steril oldat vagy szuszpenzió formájában, és bizonyos esetekben Intravénásán steril oldat formájában. A végtermékek szabad bázis formájában is hatékonyak, de elvileg előállíthatok és adagolhatok gyógyászatiig elfogadható savaddíciós sóik formájában stabilitás, jobb kristályosodás, jobb oldékonyság és egyéb jobb tulajdonságok céljából. A hatóanyagokat adagolhatjuk orálisan, például inert hígítóval vagy más ehető hordozóval összekeverve, vagypedig zselatin kapszulákba zárva, vagy tablettákká préselve. Az orális gyógyászati adagolás céljából a hatóanyagokat segédanyagokkal keverhetjük össze, és tabletta, pirula, kapszula, elixir, szuszpenzió, szirup, ostya, rágógumi, vagy egyéb formákban alkalmazhatjuk. A készítmények legalább 0,5 % hatóanyagot tartalmaznak, de ez az adag változhat, és rendszerint 4—70%-ig változnak az egység tömegére vonatkoztatva. Az ilyen készítményekben a hatóanyag mennyisége olyan, hogy megfelelő dózist kapjunk. Az előnyös készítményeket úgy állítjuk elő, hogy az orális dózisegység 1—300 mg hatóanyagot tartalmazzon. A tabletta, pirula, kapszula stb. tartalmazhat még egyéb komponenseket is, például kötőanyagot, például mikrokristályos cellulózt, tragantmézgát vagy zselatint, további segédanyagként keményítőt vagy laktózt, szétesést elősegítő szert, például algénsavat, Primogélt, kukoricakeményítőt stb; kenőanyagot, pl. magnézium-sztearátot vagy Sterotexet; csúszást elősegítő szert, pl. kolloid szilícium dioxidot; édesítőszert, pl. szacharózt vagy szacharint, vagy ízesítőszert, pl. fodormentát, metil-szalicilátot vagy narancsízesítést. Ha a dózisegységforma kapszula, tartalmazhat még a fenti típusú anyagokon kívül még folyékony hordozót, pl. zsírolajat. Más dózisegységformák további anyagokat tartalmazhatnak, amelyek a dózisegység fizikai formáját módosítják, pl. bevonatokat. Így a tablettákat vagy pirulákat cukorral, sellakkal és bélben oldódó bevonattal vonhatjuk be. A szirup a fenti anyagokon kívül tartalmazhat még szacharózt édesítőszerként, és tartósítószereket, festékeket, színező és ízesítőanyagokat. A különböző készítmények előállításához használt anyagok természetesen gyógyászatilag tiszták és nem toxikusak a használt mennyiségben. A parenterális adagolás céljából a hatóanyagokat oldatba vagy szuszpenzióba foglalhatjuk. A készítmények legalább 0,1 % hatóanyagot, de előnyösen 0,5-30 t% hatóanyagot tartalmaznak. A hatóanyag mennyisége itt is olyan, hogy megfelelő dózist kapjunk. Az előnyös készítmények a parenterális dózisegységre vonatkoztatva 0,5-100 mg hatóanyagot tartalmaznak. Az oldatok vagy szuszpenziók a következő komponenseket is tartalmazhatják: steril hígítószert, például injekciós vizet, fiziológiai sóoldatot, fixált olajokat, etilén-glikolokat, glicerint, propllén-gllkolt vagy más szintetikus oldószereket, antibakteriális szereket, például benzilalkoholt vagy metil-parabéneket, antioxidánsokat, például aszkorbinsavat vagy nát5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
