196745. lajstromszámú szabadalom • Eljárás immunstimuláns és citosztatikus hatású N-(aminoimino-metil) izotiurónium származékok előállítására
1 2 Találmányunk tárgya eljárás immunstimuláns és citosztatikus hatású, részben ismert vegyületek, valamint az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására. Jelen bejelentésben az általános képletekben a változó jelentésű szubsztituensek mindig a következőket jelentik: R1 jelentése adott esetben hidroxil-, merkapto-, és/vagy halogénatommal helyettesített 1-6 szénatomos alkilesoport, 2-6 szénatomos alkenilcsoport, 1-4 szénatomos alkilcsoporttal helyettesített fenilcsoport, vagy glícidilcsoport, R1 jelentése hidrogénatom, 1-5 szénatomos alkilcsoport, vagy ciklohexilcsoport, X jelentése halogenid-ion —, Y jelentése az alkilezés során kilépő csoport, előnyösen halogén. Találmányunk közelebbről az (I) általános képletű vegyületek és az azokat tartalmazó gyógyszerek előállítására vonatkozik. Az (I) általános képletű vegyületek közül ismertek azok, amelyekben R1 jelentése metil-, etil- vagy benzil-csoport, akkor, amikor R2 jelentése hidrogénatom (788. 429. sz. francia szabadalmi leírás, 2426683. sz. NSZK-belí szabadalmi közzétételi irat). A vegyületeket általában intermedierként ismertették. más vegyületek előállításánál. Az általunk felismert hatásokat és a gyógyszerként ezek alapján történő alkalmazást nem írták le. A találmányi leírásban szereplő alkil kifejezés magában foglalja az egyenesláncű és az elágazóláncú alkilcsoportokat. Ilyen alkilcsoportok például a metil-, etil-, n-propil-, i-propü-, n-butil-, i-butil és hasonló csoportok. 2-6 szénatomos alkenilcsoportok lehetnek a vinil-, allil-, és hasonló csoportok. A helyettesített alkilcsoportok közül jellemzőek például a 2-klór-etil-, a 3-bróm-propil-, a 2-hidroxi-etil-, a 3-klór-2-hidroxi-propilcsoportok. Azt tapasztaltuk, hogy a találmány szerinti I általános képletű vegyületek immunstimuláló hatással rendelkeznek. A hatás mértéke, iránya és a toxieitás a helyettesítések függvénye. Ismeretes, hogy a találmányunk szerinti vegyületekkcl rokon gutimint, mint antihipoxiás hatású anyagot (C. A. 66 : 45292, 1972 Pathol Fiz. F.xp. Tér. 10.) 6), állat és humán kísérletekben, mint mikrocirkulációs zavart rendező anyagot vizsgálták. (Gcmatol. Transfusiol. 1984, 29 (1), 49—52.) Vizsgálataink alapján a (I) képletű anyagok visszaállítják a szervezet lecsökkent természetes védekező rendszerének aktivitását, illetve a normális szint fölé emelik azt. így például az állati és az emberi szervezet rendelkezik védekező - így például tumor-elimináló — rendszerrel, Ha ennek aktivitása lecsökken vagy megszűnik különféle betegségek, daganatok jelennek meg, illetve manifesztálódnak. Anyagaink hatása a természetes védekező rendszerek aktiválásával például minden olyan esetben eredményes lehet, ahol jelentőséggel bír az immunrendszer lecsökkent aktivitásának fokozása, illetve a normál aktivitás további növelése. Fzen túlmenően kedvező egyéb biológiai hatások is tapasztalhatók, • például mikrocirkulációs zavar gyógyítása, káros gyökök lekötése, oxigén-hiányos állapotban lévő sejtek funkciójának javítása, élettartamának növelése. Találmányunk tárgyát képezi az (I) általános képletű vegyületek előállítása oly módon, hogy II általános képletű vegyület sóját R csoport bevitelére alkalmas alkilező szerrel, előnyösen R*-Y általános képletű vegyülettel reagáltatjuk, majd HX általános képletű savval sót képezünk. A reakció során izotiurónium sók keletkeznek. Az eddig ismert eljárások során a (II) általános képletű vegyületeket szabad bázis formájában reagáltatták alkilezőszerekkel. Ekkor a bázis nemcsak a kénen, hanem a nitrogénen is alkilálódhat. Az N-alkilezett melléktermékek képződése igen komoly tisztítási nehézségeket jelent, ami jelentősen megdrágítja és bonyolulttá teszi az eljárást. Vizsgálataink során azt tapasztaltuk, hogy a fenti hátrányok kiküszöbölhetők, ha a (II) általános képletű vegyületeket nem szabad bázis, hanem valamely alkalmas sójuk, előnyösen karbonátjuk formájában reagáltatjuk alílezőszerekkel. Tapasztalataink szerint az (1) általános képletű vegyületnek ez az egyetlen sójuk, amely közvetlenül felhasználható alkilálásra. A karbonát egyfelől könnyen ős nagy tisztaságban nyerhető, másfelől így visszaszorul az N-alkilezett származékok keletkezése, feltehetően azért, mert a felszabaduló széndioxid az erősen bázikus közeg kém hatását tompítja. Alkilezó'szerként alkil-halogenidet, dialkilszulfátokat vagy más alkilezőszert használhatunk. A reagenseket ekvimoláris arányban vagy az alkilezőszer feleslegének jelenlétében rcagáltathatjuk egymással. A reakció közegeként szerves oldószereket, előnyösen alkohol, alifás keton, alifás nitril, éter oldószereket alkalmazunk. A reakciót légköri nyomáson, 20 80°C hőmérséklete^ valósítjuk meg. így eljárásunk egyik előnyös megvalósításakor úgy járunk el, hogy a reagenseket 1 :1 — 1,8 mólarányban vízmentes etanolban, acetonitrilben, dimetil-formamidban, acetonban, éterben reagáltatjuk 20-30°C hőmérsékleten. A kiindulást N-(aminoiminometil)-tiokarbamid származékok ismertek vagy az irodalomból ismert módszerekkel előállíthatok. így az N-(aminoiminometil)-tiokarbamid könnyen előállítható diciándiamid és kénhidrogén reakciójával (Houben Weyl VIII., 214.) Guanidin bázist reagáltatva a megfelelő alkilizotiocianáttal N-(am)noiminometil)-N’-alkil-tiokarbamídokat kapunk (4 009 163. sz. USA-beli szabadalmi leírás). A termékeket farmakológiailag elfogadható szerves vagy szervetlen savval, sóvá alakíthatjuk. Szerves savként előnyösen hangya-, ecet-, tej-, citrom-, maleinsavat, szervetlen savként kén-, só-, foszfor-savat vagy brómhidrogén-savat alkalmazhatunk. A találmányunk értelmében előállított vegyületek biológiai aktivitását az alábbi teszteken mutatjuk be, a nélkül, hogy az igen aktív hatóanyagok valamennyi hatását ismertetnénk. Specifikus hatások vizsgálata I. Immunológiai vizsgálatok: Limfociták: A limfocitákat Ficoll-Uromiro (Böyum 1968) grádiensen szeparáltuk egészséges véradók, valamint malígnus lymphomában ill. metasztatizáló szolid daganatban szenvedő betegek vénás véréből. 196 745 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 2
