196592. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új benzolszk és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására

13

196 592

14

dást aeroszol formájában lévő OA (1 %) vagy sóoldatban lévő 0,1— 0,3 mg/kg OA intravénás beadásával váltjuk ki. A légzéstérfogat változását kalibrált dugattyúval mérjük, amelynek ; elmozdulását lineáris transzduklor közvetítésével Bcckman Dynograph regisztrálókészüléken regisztráljuk. A maximális hörgőösszehúzódási térfogatot a légcsőnek a kísérlet végén való lekötésével határozzuk meg. Az átáramló térfogatokat az I., 3. és 5. percben olvassuk le a regisztrálóról.

Az átáramlási görbe alatti területet (AUC) az 1.,

3. és 5. perces átáramlási értékek alkalmazásával, a maximális átáramlás %-os értékeként az 1) egyenlet alapján számítjuk ki:

l)%maxAUC =

kiváltott, az arachidonsav lipoxigenidáz oxidációjának endogén termékei által közvetített hörgőgörcs gátlásra.

5 20. példa

A találmány szerint előállított vegyületeknek az arachidonsav lipoxigenáz és/vagy ciklooxigenáz útjának gátlására kifejtett képességét vizsgáltuk In vivő 10 arachidonsav (AA) 12-0-tetradekanoilforbol-acetát íTPA) által kiváltott fülödéma teszttel egéren.

Körülbelül 8 hetes nőstény Swiss Webster egereket (Buckshire) 6-os csoportokban műanyag dobozokba helyezünk. Nyolc csoport állatot a jobb fülén helyileg

+ 4(3 perc)+ 2(5 perc) _ 10(nax)

A vizsgált szerek gátló hatását a % max AUC értéknek megfelelő, a kontroll állatoknál mért adatok alapján a 2) egyenlet alapján számítjuk:

kezelünk AA-val, másik nyolc csoportot pedig TPA- al kezelünk ugyancsak helyileg a jobb fülén. Az AA-t 25 es a TPA-t acetonos oldalban, 100 mg/ml, illetve

2) % gátlás

% max AUCkontroii _ % max AUCkczdt % max AUt'konlroll

■ 100

A statisztikus szignifikancia meghatározására student t-tesztet alkalmazunk nem párosított adatokból. Elkészítjük a dózis-hatás görbét és a regressziós egyenesből interpolálunk az EDS0 dózisokra. Alii. táblázatban megadjuk a találmány szerint előállított egyik vegyületre az OA-val kiváltott hörgőgörcs vizsgálatban kapott eredményeket.

III. táblázat 45

A vegyületet 10 perccel a hatást kiváltó ovalbumin intravénás beadása előtt adagoljuk.

A vegyület száma

Dózis, mg/kg

max AUC

(előállítási példa)

intraduodenális

%-os gátlása

1.

50

>50

Az eredményekből látható, hogy a vizsgált vegyület jelentős in vivo hatást gyakorol az ovalbuminna!

OOpg/ml koncentrációban alkalmazzuk. A gyullalást keltő anyagokat automata pipettával visszük fel a jobb fülre. 10 jul mennyiséget alkalmazunk a fül óelső és külső felületére. Az egyes egereket 2 rng/fül AA-val vagy 4 pg/fül TPA-val kezeljük. A bal fülre kontroll) azonos módon acetont viszünk fel. A vizsgált szerek orális és helyi adagolásának rendje a következő:

1) a szert 30 perccel az AA kezelés előtt adjuk be,

2) a szert 30 perccel a TPA kezelés után adjuk be.

A méréseket 0—lOmin-es, 0,01-es beosztású Odi:cst tapintókörzővel végezzük. A jobb fület a gyullalásnak AA-val való kiváltása után 1 órával és TPA-val /aló kiváltása után 4 órával mérjük.

Kiszámítjuk a jobb és a bal fül vastagsága közötti különbséget és a szigniflkanciát egy utas variancia malízissel, a kontrolihoz Dunett-módszere szerint hasonlítva (P = 0,05) határozzuk meg.

A szerek hatását a kontroll értékhez viszonyított változás százalékában fejezzük ki:

Kontrolihoz viszonyított változás %

(jobb fül—bal fül) • szer — (jobb fül -bal fül) • kontroll o jobb fül—bal fül) kontroll

8