196455. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gyógyhatású peptideket adó transzformánsok előállítására
4 196455 5 amely eljárás a kővetkező lépésekből áll: (1) a peptideket kódoló szálat tartalmazó hibrid kettős szálú DNS fragmenst beiktatjuk egy sokszorozódásra képes, kifejeződést közvetítő hordozóba, (2) baktériumot, élesztőt vagy állati sejtet transzformálunk a hordozóba beépített DNS fragmensekkel, ilyen módon transzformánsokat képezve, (3) az ilyen módon képzett transzformánsokat elkülönítjük a szülősejtektöl az említett DNS fragmens által kiváltott fenotípus jellemzők alapján. A jelen találmány szerinti módszerrel előállított új, fiziológiailag aktiv peptidek (a továbbiakban .a találmány szerinti peptid") aminosav szekvenciája hasonló a pro-IFN-x, IFN-í és az IFN-K-szerű peptid aminosav szekvenciájához, de fiziológiai aktivitásban jelentősen eltérnek ezektől, amint ezt a későbbiekben ismertetjük. A pro-IFN-? aminosav-szekvenciája megfelel egy olyan peptid aminosav-szekvenciájának, amely bizonyos (I) általános képletű - ahol B jelentése hidrogén-atom - új, fiziológiailag aktív, jelen találmány szerinti peptidek körébe tartozó peptidek N-terminálisához 12 aminosav hozzákapcsolásával keletkezik. Mig azonban a találmány szerinti pepfiziológiailag aktív peptid vírusellenes, setjburjánzást gátló és NK sejt aktivitást növelő hatást mutat, a pro-IFN-í nem mutat ilyen tulajdonságokat. Az IFN-^-szerü peptid aminosav szekvenciája megfelel egy olyan peptid aminosav-szekvenciájának, amely bizonyos (I) általános képletű - ahol B jelentése metionin-csoport új, fiziológiailag aktiv találmány szerinti peptidböl Cys Xi (ahol Cys és Xi jelentése a korábban megadott) képletű peptid-csoport kiiktatásával (deléciójával) keletkezik. Az IFN-k aminosav szekvenciája megfelel egy olyan peptid aminosav szekvenciájának, amely bizonyos (I) általános képletű - ahol B jelentése hidrogén-atom - új, fiziológiailag aktiv találmány szerinti peptidböl Cys Xi (ahol Cys és Xi jelentése a korábban megadott) képletű peptid-csoport kiiktatáséval keletkezik. Az IFN-x-szerű peptid és az IFN-X azonban nem csupán virus-ellenes aktivitásukban, de sejtburjánzást gátló és NK sejt aktivitás növelő hatásukban is gyengébbek az új, fiziológiailag aktiv találmány szerinti peptidekkel összehasonlítva. Amint ez az eddigiekből nyilvánvaló, a jelen találmány szerinti peptidek új, fiziológiailag aktív peptidek, amelyek aminosav szekvenciája hasonló az ismert pro-IFN-x, IFN-x és IFN-^-szerű peptidek szekvenciájához, de fiziológiai aktivitásuk teljesen eltér azokétól. A jelen találmány szerinti fiziológiailag aktiv peptidek és a pro-IFN-x, IFN-x és FIN-y-szerű peptidek közötti fentemlített fiziológiai aktivitásukban mutatkozó jelentős különbség oka még nem teljesen tisztázott. Egyik okét ennek a következőkben véljük: A találmány szerinti (I) általános képletű peptidek Cys Xi Cys X2 Cys peptid-részében található három cisztein-csoport járul hozzá a találmány szerinti peptidek kiváló fiziológiai aktivitásához. Úgy véljük, hogy ha a Cys Xi Cys X2 Cys (ahol Cys, Xi és X2 jelentése a korábban megadott) csoportból a Cys Xi csoportot (ahol Cys és Xi jelentése a korábban megadott) kiiktatjuk, a fiziológiai aktivitás csökken, és ha a Cys Xi Cys X2 Cys csoporthoz (ahol Cys, Xi és X2 jelentése a korábban megadott) 12 aminosav csoportot kapcsolunk az N-terminálishoz, a fiziológiai aktivitás eltűnik. Amint korábban említettük, a jelen találmány szerinti új, fiziológiailag aktív peptidek az (I) általános képlettel lehet jellemezni B Cys Xi Cys X2 Cys X3 (I)- ahol B, Cys, Xi X2 és X3 jelentését korábban megadtuk. Az (I) általános képlettel jellemezhető, jelen találmány szerinti peptidek közül előnyösek az olyan peptidek, amelyekben az (I) általános képletben Xj jelentése 7 amino-savból élló csoport és X3 jelentése 143 aminosav ból álló csoport. Még előnyösebben azok a peptidek, amelyekben Xi jelentése izolencil-valil-leucil-glicil-szeril-leucil-glicin csoport és X2 jelentése tirozin csoport, A legelőnyösebben azok a peptidek, amelyekben Xi jelentése izoleucil-valil-leucil-glicil-szeril-leucil-glicin csoport, X2 jelentése tirozincsoport és X3 jelentése (II) képletű csoport. A (II) képletű csoport: Gin Asp Pro Tyr Val Lys Glu Alá Glu Asn Leu Lys Lys Tyr Phe Asn Alá Gly His Ser Asp Val Ala Asp Asn Gly Thr Leu Phe Leu Gly Ile Leu Lys Asn Trp Lys Glu Glu Ser Asp Arg Lys lie Met Gin Ser Gin He Val Ser Phe Tyr Phe Lys Leu Phe Lys Asn Phe Lys Asp Asp Gin Ser Ile Gin Lys Ser Val Glu Thr Ile Lys Glu Asp Met Asn Val Lys Phe Phe Asn Ser Asn Lys Lys Lys Arg ASp Asp Phe Glu Lys Leu Thr Asn Tyr Ser Val Thr Asp Leu Asn Val Gin Arg Lys Ala Ile His Glu Leu Ile Gin Val Met Ala Glu Leu Ser Pro Ala Alá Lys Thr GLy Lys Arg Lys Arg Ser Gin Met Leu Phe Arg Gly Arg Arg Ala Ser Gin - ahol Gin giutamin-csoportot, Asp aszparaginsav-csoportot, Pro prolin-csoportot, Tyr tirozin-csoportot, Val valin-csoportot, Alá alanin-csoportot, Lys lizin-csoportot, Glu glutaminsav-csoportot, Asn aszparagin-csoportot, Leu Ieucín-csoportot, Phe fenilalanin-csoportot, Ile izoleucin-csoportot Trp trip-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
