196424. lajstromszámú szabadalom • Eljárás policiklusos éter-antibiotikumok és ilyen hatóanyagot tartalmazó állattáp előállítására
7 196424 8 szerinti 0-4 fokozatú kérosodási skála szolgált [Lásd az .A Név Method for the Primary Evaluation of anticoccidial Activity' ,Am. J. Vet. Res., 22 324-326 (1961) szakirodalom helyen], egyéb fajok esetén a J. Johnson és W. H. Reid [Anticoccidial Drugs. Lesion Scoring Techniques in Battery and Floor Pen Experiments in Chicks', Exp. Parasit., 28, 30-36 (1970)] módosításával kidolgozott 0-3 fokozatú értékelési rendszert használtuk. Bármely kezelt csoport károsodását jelölő skálaértékét a fertőzött kontroll károsodást jelölő skálaértékével elosztva állandó arányt kapunk. Azt találtuk, hogy az Uk-61 689. jelölésű antibiotikum és kationos sói kiváló hatást gyakorolnak baromfi coccidiumfertózésével szemben. Ezek a vegyületek csirkék tápjába 15-120 ppm mennyiségben bekeverve, alkalmasak Eimera tenella, E. acervulina, E. maxima, E. brunetti és E. necatrix okozta fertőzések leküzdésére. Az állattápok értékét általában közvetlenül, az állat etetésével határozzák meg. Az 1 197 826. számú nagy-britanniai szabadalmi leírásban olyan in vitro emésztési eljárást f.bendő eljárás") ismertetnek, amely éllattápok értékelésénél könnyen megvalósítható és nagy pontosággal mérhető általa a tápban a mikroorganizmusok által okozott változás. A tápot, bendó-inokulumot és különféle nóvekedésserkentő anyagokat gondosan szabályozott körülmények mellett laboratóriumi egységbe viszik be, majd abból visszanyerik, és kritikusan és folyamatosan tanulmányozzák a változásokat az alatt a folyamat alatt, amíg a mikroorganizmusok elfogyasztják a tápot. A bendőfolyadék propionsavtartalménak növekedése azt jelzi, hogy a tápkombinációhoz adott növekedésserkentó a kívánt hatást váltja ki az általános kérődzöteljesitményben. A propionsavtartalom változását a kontroll bendöfolyadékához viszonyítva százalékban fejezzük ki. A bendőfolyadék propionsavtartalmának növekedése és az állat jobb gyarapodása közötti megbízható korreláció meghatározására hosszú tartamú in vívó etetési vizsgálatokat végzünk. A bendófolyadékot fisztulával ellátott, kereskedelmi forgalomban kapható hizlaló táppal és száraz szálastakarmánnyal etetett tehenekből nyerjük. A kinyert bendófolyadékot szűrőszöveten azonnal átszűrjük, és a szürletböl 10 ml-t 400 mg standard szubsztrátot, 10 ml pH = 6,8-as puffert és a vizsgálandó vegyületet tartalmazó 50 ml-es kónikus lombikba mérünk. A szubsztrát összetétele 68% kukoricakeraényitó, 17% cellulóz és 15% extrahált szójaliszt. A lombikon körülbelül két percig oxigénmentes nitrogéngázt vezetünk át, majd 16 órán át 39 °C-os rázóvizfürdőben inkubáljuk. Minden vizsgálatot három párhuzamos mérésként végzünk. Az inkubációs idő letelte után 5 ml mintát 1 ml 25%-os metafoszforsavval elegyítünk, majd az elegyhez 10 perc múlva 0,25 ml hangyasavat adunk, és 1500 fordulat/perc fordulatszám mellett 10 percig centrifugáljuk. A mintákat ezután gáz-folyadék-kromatográfiás eljárással vizsgáljuk D. W. Kellog módszere szerint [J. Dairy Science, 52, 1690 (1969)]. Az ecetsavnak, propionsavnak és vajsavnak megfelelő csúcsok magasságét mind a kezeletlen, mind a kezelt lombikból vett mintából meghatározzuk. A fenti in vitro eljárással végzett vizsgálat szerint az UK-61 689 jelölésű antibiotikum 20 ug/ml mennyiségben 80%-kal növeli a propionsavtermelést az antibiotikum nélküli kontrolihoz képest. A bendő-propionsav-termelést fokozó vegyületekról tudott, hogy ezek javítják a kérődzők, igy marha és birka téphasznosításét, és hasonló hatást gyakorolhatnak egy-gyomrú állatokra, például sertésre is. Az UK-61 689. jelölésű antibiotikum beadható az állatnak szabad sav vagy só, például nátrium- vagy káliumsó vagy ezek elegye formájában a tápba keverve. Más megoldás szerint a kívánt hatásnak megfelelő koncentrációban bekeverhető a tápba az Uk-61 689 jelölésű antibiotikumot tartalmazó nyers vagy szárított fermentlé. Adagolható az Uk-61 689 jelölésű antibiotikum a kívánt dózisban olyan megfelelő, az antibiotikum elnyújtott felszabadulását biztositó eszköz alkalmazásával is, amely az antibiotikumot állandó szinten bocsátja ki. Baromfi coccidiózisának kezelésére a találmány szerint előállított vegyületet megfelelő hordozóanyagban orálisan adagoljuk. Célszerűen a gyógyszert egyszerűen az ivóvízbe vagy a baromfitápba keverjük, olyan mennyiségben, amelyben a szükséges dózist a napi víz- vagy tápadag tartalmazza. A szert adagolhatjuk közvetlenül az ivóvízbe mérve, előnyösen folyékony vízoldható koncét,trátuni formájában (például egy vizoldható só vizes oldataként) vagy adhatjuk közvetlenül a tápba önmagában, premix formájában vagy koncentrátumként. Az antibiotikumnak a tápba való bevitelét szokásosan premix vagy hordozóanyaggal alkotott koncentrátum formájában végezzük. Megfelelőek a folyékony vagy szilárd hordozóanyagok, például viz, különféle lisztek, például szójabab olajos-liszt, lenmag olajos-liszt, kukoricacsutka-liszt és a baromfitápokban szokásosan alkalmazott ásványi keverékek. Különösen hatásos hordozó maga a baromfitáp, azaz a baromfitáp egy kis hányada. A hordozóanyag alkalmazása megkönnyíti a hatóanyagnak a kész tápban - amellyel a premixet elegyítjük - való egyenletes eloszlatását. Ez azért fontos, mert a hatóanyagból csak kis mennyiség szükséges. Fontos, hogy a vegyületet gondosan keverjük be a premixbe, majd ez utóbbit a tápba. Ebből a szempontból fontos, hogy a hatóanyagot megfelelő olajos hordozóanyagban, például szójaolajban, kukoricaolajban vagy gyapotmagolajban vagy illékony szerves oldószerben diszpergáljuk vagy oldjuk, 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
