196424. lajstromszámú szabadalom • Eljárás policiklusos éter-antibiotikumok és ilyen hatóanyagot tartalmazó állattáp előállítására
5 196424 6 Azt találtuk, hogy az UK-58 852 jelölésű antibiotikum gondosan ellenőrzött körülmények között való hidrolizálása az egyik kapcsolódó glükongyürü lehasadásához vezet, és az így keletkező új vegyület igen széles 5 spektrumú coccidium-ellenes hatással bir, és toxicitási profilja jobb, mint az UK-58 852 jelölésű antibiotikumé. A találmány tárgya ezért az (1) képletú, UK-61 689 jelölésű antibiotikum és gyógyá- 10 szati célra alkalmas kationos sóinak előállítási eljárása. Ilyen kationos sók például a nátrium- és káliumsók. A találmány szerint az UK-58 852 jelölésű antibiotikumot vagy kationos sóját ellenőrzött körülmények között 15 hidrolizálják. Az UK-58 852 jelölésű antibiotikum hidrolízisét p-toluolszulfonsavval végezzük acetonitril-viz oldószerrendszerben. Az acetonitril-víz oldószerelegy előnyösen 5-0,5% vizet 20 tartalmaz. A p-toluolszulfonnsavat előnyösen az UK-58 852 jelölésű antibiotikum-nátriumsójának 1 móljára számított 1,1 mólekvivalens mennyiségben alkalmazzuk. A reagáltatást általában szobahőmérsék- 25 létén végezzük és vékonyrétegkromatográfiás vizsgálattal követjük nyomon, míg a kívánt termék optimális hozamát elérjük. A reakcióidő általában 1-3 óra p-toluolszulfonsav és acetorütril-viz oldószerrendszer alkalmazása 30 esetén, de az alkalmazott savtól és oldószerrendszertől függően változó. Miután a reakció lényegében befejeződött, a reakcióelegyet nátrium-hidrogén-karbonát felesleggel semlegesítjük, besűrítjük, dietil-éterrel vagy diklór-metánnal extraháljuk és ismert, szilicium-dioxidos gélkromatográfiás eljárással tisztítjuk. A végterméket ezután szabad savként vagy megfelelő kationos sóként átkristályosithatjuk. Más eljárás szerint az UK-61 689. jelölésű antibiotikumot előállíthatjuk az UK-58 852 jelölésű antibiotikumot tartalmazó nyers fermentációs extraktuinból is. Ennek megfelelően a metil-ízobutil-ketonos (MIBK) fermentációs, extraktumot besűrítjük és előnyösen acetonitril-viz elegyben oldjuk, majd p-toluolszulfonsavval kezeljük. Az előnyös acetonitril-viz elegy 5% vizet tartalmaz, és nyers fermentációs olaj aránya a p-toluolszulfonsavhoz 9:1. Ez az arány csak hozzávetőleges, a fermentációs extraktum összetételétől függően változhat. Az UK-61 689. jelölésű antibiotikum számos Gram-pozitiv mikrooganizmus szaporodását gátolja. Az I. táblázatban erre vonatkozó in vitro vizsgálataink eredményeit ismertetjük. A vizsgálatot úgy végezzük, hogy tápközeget és különböző koncentrációjú UK-61 639. jelölésű antibiotikumot tartalmazó csösorozatot a vizsgálandó organizmussal beoltunk és 24 órán ét tenyésztjük. Megállapítjuk a veg'yületnek azt a minimális koncentrációját (/ug/ml), amely az adott organizmus szaporodását, gátolja. I. Táblázat Antibakteriális aktivitás Organizmus A törzs jele MIC ug/ml Clostridium perfringens 10A006. 25 10A009 3.1 Actinomyces pyogenes 14D002 0.39 14D008 0.39 14D011 0.39 Treponema hyodysenteriae 94A001 6.25 94A002 6.25 94A007 3.12 94A008 3.12 Az Uk-61 689. jelölésű antibiotikumnak és sóinak csirkék coccidium fertőzése elleni hatásosságát a következő módon határoztuk meg: 3-5 db 10 napos, patogénmentes, fehér 55 leghorn kakasokból álló csoportokat egyenletesen bekevert UK-61 689. jelölésű antibiotikumokat vagy nátriumsóját és/vagy káliumsóját tartalmazó keveréktápon tartunk. A táppal való etetés 24. órájának elteltével az 60 állatokat per os megfertőzzük az adott, vizsgált Eimera faj oocisztáival. Más, a fentivel azonos korú és fajú, 3-5 állatból álló csoportokat a fentihez hasonló, de az UK-61 689. jelölésű antibiotikumot vagy sóit nem tártál- 65 mazó keveréktápon tartunk. Az állatokat 24 óra elteltével a fenti módon megfertőzzük. Ezek az állatok szolgálnak kontrollként. A csirkék egy másik, a fentiekhez hasonló újabb 3-5 fős csoportját ugyancsak az UK-61 689. jelölésű antibiotikumot, illetve sóit nem tartalmazó táppal etetjük, de nem fertőzzük meg coccidiummal. Ezek az állatok szolgálnak normál kontrollként. A kezelések eredményét E. acervulina alkalmazásakor 5 nap elteltével, minden egyéb fertőzésnél 6 nap elteltével értékeljük ki. A coccidium-ellenes aktivitás méréséhez E. tenella alkalmazása mellett a J. E. Lynch 4
