196422. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antraciklin származékok és az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
3 196122 4 A találmány tárgya eljárás (I) általános képletü új antraciklin-származékok és az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására. Az (l) általános képletben Rí és Rz különböző jelentésű, és (a) képletü, -Roa jelű cukorcsoportot vagy (b) képletű, -Roa-dF=CinB jelű cukorkombinációt jelent. Roa = L-rodózamin dF - 2-dezoxi-L-fukóz CinB = L-cinerulóz. A találmány szerinti eljárásra jellemző, hogy az Y-1L472 jelű, DSM 2658 szám alatt a Német Mikroorganizmusgyü jteménynél 1983. május 24-én letétbe helyezett mikroorganizmusnak a 0 131 181 sz. alatt publikált európai szabadalmi leírás szerint végzett fermentálása, a micélium és a tenyészlé szerves oldószerrel történő extrahálása útján kapott maradékot híg savval kezeljük. A fenti módon előállított vegyületek erős citostatikus hatással rendelkeznek. Az említett szabadalmi bejelentés szerint az Y-11472 jelű Streptomyces purpurascens törzset tápközegben, mintegy 24-40 °C-on 6,5 és 8,5 közötti pH-érték mellett aerób körülmények között ismert módon fermentálják. A micéliumból az antraciklin-vegyületeket például vizes acetonnal 3,5 pH érték mellett végzett extrahálással kioldják, az acetont eltávolítják, és a vizes fázist 7,5 pH érték inellett előnyösen etil-aeetéttal extrahálják. A micéliumból nyert etil-acetátos extraktumot és a szürlet extraklumát egyesitik, szárazra párolják. Az |gy kapott maradék a találmány szerinti módon savval kezelhető, de általában az említett bejelentés leírásában leirt módon dolgozzák fel. A feldolgozás során a maradékot toluolban oldják, 3,5 pH-jú acetátpufferrel extrahálják, és a vizes fázist dolgozzák fel oly módon, hogy a pH-értéket 7,5-re állítják, a vizes fázist etil-acetáttal extrahálják, és a szerves fázist betöményítik, aminek során úgynevezett citorodin nyersterméket kapnak. Az említett szabadalmi bejelentés szerint a nyerstermékből kromatográfiai módzserekkel eitostatikusan ható antraciklin-származékok izolálhalók. Meglepő módon azt találtuk, hogy új, szintén eitostatikusan ható antraciklin-származékok állíthatók elő, ha a fenti nyers maradékot vagy az úgynevezett citorodin nyersterméket erős vagy közepesen erős sav híg oldatával kezeljük. Alkalmas savak például az alábbiak: sósav, kénsav', foszforsav, hangyasav, ecetsav, trifluorecetsav és egyéb savak, amelyek adott esetben vízzel elegyedő szerves oldószert, például metanolt vagy etanolt is tartalmazhatnak. A savas kezelés erősen savas, H-formájú ioncserélővel l pl. Dowcx 50x8 (H')J is végezhető. Ez esetben a terméket például sóoldattal kell az ioncserélőről eluálni. A savas kezelést szobahőmérsékleten vagy enyhén emelt hőmérsékleten, előnyösen 3" °C-on végezzük. A reakcióidő 30 perctől néhány óráig terjedhet. Semlegesítés után a 5 kívánt vegyúleteket extrahálással izoláljuk, és oszlopkromatográfiás módszerrel, előnyösen Kieselgélen szétválasztjuk. A találmány szerinti eljárásban az alábbi vegyúleteket állíthatjuk elő. 10 S-citorodin 15 20 25 30 Vörös, amorf anyag, metanolban, etil-acetátban, kloroformban és toluolban jól oldódik, vízben és hexánban oldhatatlan. Vékonyréteg-kromatográfia: Kieselgél 60 F::54 .Merck': Bl rendszer: kloroform/metanol/jégecet/ víz = 70 : 20 : 10 : 2 Rr UV-maximumok: NMR-szinkép: összegképlet: 0,67 236, 252 (váll), 293, 497, 563 nm (metanol és 10% IN HC1 elegyében) lásd 1. ábra C4aH64NzOl7 M simított = 940 (FAB-MS-színképpel igazolva). Az S-citorodin olyan (I) általános képletü vegyület, amelyben Rí jelentése -Roa és R; jelentése -ROa-dF=CinB. T-citorodin 35 40 45 50 55 60 65 Vörös, amorf anyag, metanolban, etil-acetátban, kloroformban és toluolban könynyen oldódik, vízben és hexánban oldhatatlan. Vékonyrétegkromatográfia: Kieselgél 6OF254 .Merck' B; rendszer: Rí UV-maximumok: NMR-szinkép: összegképlet: A T-citorodin olyan (I) általános képletü vegyület, amelyben Rí jelentése -RoadF = CinB és R2 jelentése -Roa. Az új citorodinok mellett az ismert Q- rcdomicin II (rodomicin A, H. Brockmann et al , Naturwiss. 37, 492, 1950, valamint 42, 154, 1955) is képződik, azaz olyan (I) általános képletü vegyület, amelyben Rí és R2 jelentése egyaránt -Roa. A találmány szerint előállítható citorodinck erős citostatikus hatással rendelkeznek, és L, 1210 jelű leukémia-sejtekkel végzett sejtproliferációs tesztben az alábbi eredményeket adták: IC5o(jug/ml) S-citorodin 3 x 10-4 kloroform/metanol/jégecet/ víz = 70 : 20 : 10 : 2 0,53 236, 252 (sch), 293, 496, 563 nm (metanol és 10% IN sósav elegyében lásd 2. ábra C48H64N2O17 MaTamitott —940 (FAB—MS— színképpel igazolva). 3
