196400. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3-(acil-amino-metil)-imidazo [1,2-a] piridin származékok és az ezeket a vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
21 196400 22 A találmány szerinti vegyűleteken farmakológiái próbákat hajtottunk végié, amelyek terápiás hatékonyságukat igazolták. Heveny mérgezöképesség Egéren határozzuk meg intraperitoneális úton. Az l.Dso-érlékek magasabbak 500 mg/kg-nál. CardiazoP-lal indukált klónusos rángások antagonizalása egérnél A próbát Goodman és munkatársai (J. Pharm. Exp. Ther. 108, 168-176 /1953/) szerint hajtjuk végre. Az egerek vizsgálandó vcgyületeket, vagy csak oldószert kapnak 50 perccel (ip.) 35 mg/kg CardiazolR iv. injekciója után. Ezután az állatokat 1 órán át megfigyelés alatt tartjuk és minden csoportnál feljegyezzük a klónusos rángásokat mutató egerek százalékát (100% klónusos rángás és 10-20% tónusos rángás a kontroll állatoknál). Minden dózisra kiszámítjuk a kontroll állatokhoz viszonyított védelem százalékát, aminek alján grafikusan meghatározható az EDoo-érték, vagyis az a dózis, amely az állatok 50%-át megvédi a Cardiazol" görcsképzö hatásától. A találmány szerinti vegyületek EDso-érLékei 0,1 és >30 mg/kg közé esnek. Mesterségesen lélegeztetett kurarizált patkányok elektvokovtikogramjára gyakorolt hatás A vegyületek nyugtató vagy altató halasat a patkányok eleklrokortikogram jára gyakorolt hatásuk megfigyelése útján határozzuk meg Depoortere H. (Rev. E.E.G. Neurophvsiol. 70/3, 207-214 /1980/) és Depoortere II. és Üecobert M. (J. Pharmacol. /Paris/ 1-1/2, 105-265 /1983/) módszerével. A vizsgálandó vegyületeket íp. úton 1- — tói 30 mg/kg-ig terjedő dózisokban alkalmazzuk. A vegyületek alvási jeleket váltanak ki 0,01-30 mg/kg dózisokban. Nátrium—1-híd roxi-butira tlal indukált .álom ‘ időtartamára kifejtett hatás E hatást a nátrium-4-hidroxi-butiráttal (GUI1.) kiváltott .álom' idejének befolyásolása alapján határozzuk meg kurarizált patkányon. 200 * 20 g-os him Charles River patkányokat használunk. Alloferin 1 mg/kg ip. dózisával kurarizált patkányokat mesterségesen lélegeztetünk az orrukra helyezett maszk segítségével (légzési frekvencia = 50/min; belélegzett térfogat = 14 ml). A nyelőcsövet előzetesen lekötöttük, hogy elkerüljük a levegőnek a gyomorba való jutását. A homlok-koponyafalcsonfi és nyakszirti agykéreg-elektródok lehetővé teszik az elek- Irokorlikográfiás aktivitás regisztrálását 6 mm/sec sebesseggel működő Grass-fele poligráf (79 P modell) segítségével. Az állatokat helyi érzéstelenítés alatt (2% xilokain) készítjük elő. A kísérlet teljes ideje alatt .illand«') hőmérsékleten (37,5 °C) tartjuk őket. A patkányok előkészítése után 10 perccel 200 mg/kg nálrium-4-hidroxi-butirátot fecskendezünk be farki vénájukba. A nátrium-4-hidroxi-butirát beadása után 3 perc múlva 10 mg/kg vizsgálandó vegyületet adunk be ip. úton. A jeleket a GHB injekciója után 75 percen át 15 perces periódusokban értékeljük. Ezen elemzési idő alatt meghatározzuk az .álom" teljes időtartamát. Egy 15 állatból álló standard sorozat lehetővé teszi a .GHB-álom' tartamának pontos meghatározását. Az eredmények statisztikus elemzését Mann-Yvhitney-féle ,U‘ próbával hajtjuk végre. Egyes vegyületek csökkentik a GHB hatását (40%-ig csökkentik az álom idejét 10 mg/kg dózisnál), mig más vegyületek potencirozzák ezeket a hatásokat (25%-ig fokozzák az álom idejét 10 mg/kg dózisnál). Az is megállapítható, hogy a hatások ellentétesek lehetnek attól függően, hogy a vegyületeket nagy vagy kis dózisokban alkalmazzuk. Ital-konfliktus próba patkányon E próbát Vogel J. R., Beer B. és Clody D.E. irta le (Psychopharmacologia 21, 1-7 /19 71/). Wistar (IFFA Credo) patkányokat használunk. Az ivóvizet a próba előtt 24 órával megvonjuk az állatoktól. A próba napján, a találmány szerinti vegyúletekkel való ip. kezelés után 30 per«: múlva, minden patkányt rácsos, villamosítható fenekű, áttetsző műanyag ketrecbe (21 x 20 x 21 cm) teszünk. Az ivóvizet a ketrec egyik falából 2 crn-re benyúló, a ketrec aljától 3 cm-re elhelyezett pipetta segítségével adagoljuk. 16-90 másodperces keresés után az állat meg találja a pipettát és inni kezd. 20 nyelvcsapás után (OMNITECH anxiométerrel regisztrálva) a patkánynak a nyelv szintjén 0,07 mA erősségű villamos sokkot adunk le (anxiométer által), amely megszűnik, amikor a patkány elengedi a pipeLtát. Az első sokk leadását 3 perees időszak követi, mely alatt az állat minden 20 nyelvcsapás után egy sokkot kap; ez az állat ivásanak megszűnéséig, vagy a 3 perces időtartam végéig tart. E kísérleti körülmények között a kontroll állatok átlagosan 3-6 sokkot kapnak. Feljegyezzük a kezelt állatoknak leadott sokkok számát és Dunelt-próba segítségével összehasonlítjuk a kontroll állatokéval. így meghatározzuk az EDM-érték'd, azaz a legkisebb hatásos dózist, amely az állat által ka-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 12
