196229. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az A 40926 antibiotikum N-acilamino-glukuronil-aglikonjai és az A 40926 antibiotikum aglikonjai, valamint az ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására

1

196229

szorpciós maximumokkal:

lambdam ax (nm)

a) 0,1N HC1 282

b) pH 7,4 foszfát puffer 282, 310 (váll)

c) 0,1N KOH 302

B) IR abszorpciós spektrum a kővetkező abszorpciós maximumokkal (cm-1):

3700—3000; 3000—2800; 1650; 1585; 1505; 1460 (nujol); 1375 (nujol); 1295; 1230; 1210; 1150; 1070; 1060; 1010; 845; 820; 720 (nujol)

C) az ’H—NMR spektrum a következő jel-csoportokat mutatja (ppm-ben) 270 MHz-en DMSO— ds-ban (hexadeutero-dimetilszulfoxid) felvéve, belső standardként (0,00 ppm) TMS-t alkalmazva (delta, ppm):

0,85, t (terminális CH3); 1,0—1,3 (alifás CHrk);

1,42, m (OC—C—CH2); 2,00, t (CO—CH2); 2,35, s (n-CHj); 2,49, s (DMSOds); 2,82, m (Z2);

2,8—3,8 (cukor protonok és Z'21); 4,12, m (X6); 4,56, s (XI); 4,34, d (X5); 4,41, d (X7); 4,96, m (X2); 5,08—5,12 (4F és Z6); 5,40, d (az acilaminoglukuronsav anomer protonja); 5,58, d (X4); 5,74, s (4B); 6,05, d (X3); 7,75, s (6B); 6,25—8,40, s, d és m (aromás CH-k és pepiid—NH-k).

D) a retenciós idő (Rt) 1,20 a teikoplanin A2 2 komponenshez viszonyítva (Rt = 20,3 perc), az elemzést fordított fázisú HPLC-vel a következő körülmények között végezve:

oszlop: Ultrasphere ODS (5 pm/Altex/Beckman)

4,6 mm (belső átmérő) x 250 mm elő-oszlop: Brownlee Labs RP 18 (5 pm)

A eluálószer:

CH3CN

10%

NaH2P04H20 (2,5 g/1)

90%

pH 6,0-ra beállítva

eluálószer:

CH3

CN

70%

NaH2P04-H20 (2,5 g/1)

30%

pH 6,0-ra beállítva

eluálás: lineáris grádiens (5%—60% B eluálószer A eluálószerben), 40 perc alatt áramlási sebesség: 1,8 ml/perc UV detektor: 254 nm

belső standard: teikoplanin A2 2 komponens (Gruppo Lepetit S. p. A.)

E) molekulatömeg kb. 1554, FAB—MS-sel meghatározva

F) sóképzésre képes savas-csoportok

G) sóképzésre képes amino-csoport

H) a maghoz nem kapcsolódik mannóz-egység.

A 40926 antibiotikum N-acilaminoglukuronil-ágiikon B0 faktor (a nem-addíciós só alakban):

A) UV abszorpciós spektrum a kővetkező abszorpciós maximumokkal:

lambdamax (nm)

a) 0,1N HC1 282

b) pH 7,4 foszfát puffer 282; 310 (váll)

c) 0,1N KOH 302

B) IR abszorpciós spektrum a következő abszorpciós maximumokkal (cm-1);

3700—3100; 3000-2800 (nujol); 1650; 1585; 1505; 1460 (nujol); 1375 (nujol); 1295; 1230; 1210; 1150; 1060; 1010; 980; 840; 820; 720 (nujol);

C) az ‘H—NMR spektrum a következő jel-csoportokat mutatja (ppm-ben), 270 MHz-en, DMSO—

?

d6-ban (hexadeutero-dimetilszulfoxid) felvéve, belső standardként (0,00 ppm) TMS-t alkalmazva (delta, ppm);

0,84, d (ízopropil—CH3-ek); 1,10—1,3 (alifás CHrek); 1,3—1,6 (OC—CH2 és izopröpil—CH);

2,00, t (OC—CH2); 2,32, s (NCHj); 2,49, s (DMSOds); 2,82, m (Z2); 2,9—3,8 (cukor protonok); 4,12, m (X6); 4,44, s (XI); 4,33, d (X5);

4.37, d (X7); 4,95, m (X2); 5,06—5,10 (4F és Z6);

5.38, d (az acilaminoglukuronilsav anomer protonja); 5,59, d (X4); 5,72, s (4B); 6,05, d (X3); 7,74, s (6B); 6,27—8,5 (aromás és peptid —NH-k)

D) a retenciós idő (R,) 1,30 a teikoplanin A2 2 komponenshez viszonyítva (R, = 20,3 perc) az elemzést fordított fázisú HPLC-vel a következő körülmények között végezve: oszlop: Ultrasphere ODS (5 pm/Altex/Beckman)

4,6 mm (belső átmérő) x 250 mm elő-oszlop: Brownlee Labs RP 18 (5 pm)

A eluálószer:

CHjCN 10%

NaH2P04 • H20 (2,5 g/1) 90%

pH 6,0-ra beállítva B eluálószer:

CH3CN 70%

NaH2PQ4 ■ H20 (2,5 g/1) 30%

pH 6,0-ra beállítva

eluálás: lineáris grádiens (5%—60% B eluálószer A eluálószerben), 40 perc alatt áramlási sebesség: 1,8 ml/perc UV detektor: 254 nm

belső standard: teikoplanin A2 2 komponens (Gruppo Lepetit S. p. A.)

E) molekulatömeg kb. 1568 FAB—MS-sel meghatározva

F) sóképzésre képes savas-funkciók

G) sóképzésre képes amino-funkció

H) a maghoz nem kapcsolódik mannóz-egység.

A 40926 antibiotikum N-acilatninoglukuronii-aglikon Eh faktor (a nem-addíciós só alakban): molekulatömege kb. 1568 FAB—MS-sel meghatározva és lényegében azokkal a fizikokémiai tulajdonságokkal rendelkezik, amelyeket az előbbiekben az A 40926 antibiotikum N-acilaminoglukuronil-aglikon B0 faktorra vonatkozóan ismertettünk, a következő eltérésekkel:

0,84 ppm-nél az előbbiekben leírt NMR-rendszerben triplettet mutat, amely egy n-propil-csoport metilcsoportjának tulajdonítható; retenciós ideje az előbbiekben leírt rendszerben a teikoplanin A2 2 komponenshez viszonyítva 1,32.

A 40926 antibiotikum ágiikon (a nem-addíciós só alakban):

A) UV abszorpciós spektrum a következő abszorpciós maximumokkal:

lambdam^ (nm)

a) 0,1N HCI 280

b) pH 7,4 foszfát puffer 280; 310 (váll)

c) 0,1N KOH 299

B) ÍR abszorpciós spektrum a következő abszorpciós maximumokkal (cm-1):

3700—3100; 3000—2800 (nujol); 1655; 1620— 1550; 1500; 1460(nujol); 1375 (nujol); 1300; 1205; 1145; 1010; 970; 930; 840

C) 8.Z •H—NMR spektrum a következő jel-cso-5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

23