196228. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az L 17046 antibiotikum észter származékainak és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
196228 2 1 X és az elegyet szobahőmérsékleten még egy napig keverjük. Ezután a reakcióelegyet 200 ml dietiléterbe öntjük, a kivált szilárd anyagot összegyűjtjük, dietiléterrel mossuk és vákuumban egy éjjelen át szobahőmérsékleten szárítjuk. 1,2 g nyers, cím szerinti terméket, 2-klór-etilésztert kapunk. Ezt a nyers terméket a 2.a) példa szerinti módon feldolgozva — amely 1,87 g nyers L 17046 antibiotikumetilészter-hidroklorid tisztítására vonatkozik — 0,25 g L 17046 antibiotikum 2-klór-etilészterhidrokloridot kapunk. 5. példa Az L 17046 antibiotikum-4-klór-butilészter-hidroklorid előállítása a) teikpplaninból 10 g teikoplanint 200 ml száraz tetrahidrofuránban szuszpendálunk és a szuszpenzión keverés közben száraz sósavat buborékoltatunk át 12 órán keresztül, miközben a hőmérsékletet 45—50 °C-on tartjuk. A keletkező tiszta oldatot 900 ml dietiléterbe öntjük és a kicsapódó szilárd anyagot szűréssel összegyűjtjük, dietiléterrel mossuk és vákuumban, szobahőmérsékleten egy éjjelen át KOH pasztillák fölött szárítjuk. 9,5 g nyers, cím szerinti 4-klór-butilésztert kapunk. Ezt a nyers terméket 1,5 liter 3:2:1 (térf./térf./térf.) n-butanol:metanol:víz elegyben oldjuk, az oldathoz hozzáadunk 20 g szilanizált szilikagélt (0,06—0,2 mm, Merck Inc.) és az oldószereket vákuumban kb. 45 °C-on sztrippeléssel eltávolítjuk. A maradékot 400 ml 9:1 (térf./térf.) acetonitrihviz elegyben szuszpendáljuk és felvisszük egy kromatográfiás oszlop tetejére, amelyet úgy készítettünk el, hogy 1,4 kg ugyanilyen szilanizált szilikagélt 1 liter pH 4,2 1%-os ammóniumfoszfáttal előzetesen egyensúlyba hoztunk és 200 ml 1:9 (térf./térf.) acetonitrihviz eleggyel stabilizáltunk. Az oszlopot ezután 1 liter 1:9 acetonitrikviz eleggyel mossuk, majd lineáris grádiens alkalmazása mellett — 10—50% (térf./térf.) acetonitril vízben —, 400 ml/óra sebességgel 20 óra alatt kifejlesztjük. Kb. 20 ml-es frakciókat szedünk és ezeket HPLC-vel vizsgáljuk meg. Az L 17046 4-klór-n-butilésztert tartalmazó frakciókat (241.—320.) egyesitjük és 2,5 liter n-butanol és 4 ml 1 n sósav hozzáadása után kis térfogatra (kb. 50 ml) töményítjük be. Kb. 300 ml dietilétert adagolunk és a keletkező csapadékot összegyűjtjük, dietiléterrel mossuk és vákuumban szobahőmérsékleten egy éjjelen át szárítjuk KOH pasztillák és P2O5 fölött. 2,1 g L 17046 antibiotikum 4-klór-butilészter-hidrokloridot kapunk. Lényegében az 5.a) példa szerinti eljárást követve, de kiindulási anyagként a teikoplanin komplexet teikoplanin Aj 2. komponenssel, L 17054 antibiotikummal, L 17046 antibiotikummal vagy ezek valamely keverékével helyettesítve ugyanezt a cím szerinti vegyületet kapjuk, lényegében azonos kitermeléssel (a reagensek ugyanolyan moláris mennyiségét alkalmazva, mint a példában). 6. példa Az L 17046 antibiotikum N-BOC származékának előállítása 3,8 g (2,42 mmól) L 17046 antibiotikumot 60 ml desztillált DMF-ban oldunk és az oldathoz hozzáadunk 1,02 g (3,3 mmól) 2,4-5,-triklór-terc-butilkarbonátot és 2,12 ml trimetilamint. A keveréket 48 órán át szobahőmérsékleten tartjuk és a reakció lezajlását HPLC-vel követjük. A reakcióelegyet ezután 240 ml vízzel hígítjuk, a pH-t 1 n HC1 hozzáadásával 4-re állítjuk be és az elegyet (összesen 300 ml) n-butanollal extraháljuk. A szerves fázist 40 ml vízzel mossuk és csökkentett nyomáson kb. 40 ml maradék-térfogatra töményitjük be. Ezt a maradékot 300 ml éterrel hígítjuk és egy éjjelen át hűtjük. A kicsapódó szilárd anyagot szűréssel összegyűjtjük, éterrel mossuk és vákuumban 50 °C-on szárítjuk. Kitermelés: 4,2 g tiszta, cím szerinti vegyület. Képlet: CjjHjíChNsO» Molekulasúly: 1664,52 Számított: C 55,56 H 4,6 N 6,7 Cl 4,25 % Talált: 54,18 5,40 8,18 4,12 % 7. példa Az L 17046 antibiotikum N-BOC származéka benzilészterének előállítása 500 mg (0,333 mmól) L 17046 antibiotikum NBOC származékot, 50 mg (0,49 mmól) KHC03-ot és 80pl (0,66 mmól) benzilbromidot 7 ml desztillált DMF-ban oldunk és a reakcióelegyet 24 órán át keverjük. A reakcióelegyet 60 ml vízzel hígítjuk, a pH-t ecetsavval kb. 5-re állítjuk be és a reakcióterméket kétszer extraháljuk 50-50 ml 2:1 (térf./térf.) etilacetátm-butanol eleggyel. A szerves réteget elkülönítjük, 30 ml vízzel mossuk és csökkentett nyomáson 10 mt-re töményítjük be. Ezt a terméket a továbbiakban 100 ml etiléterrel hígítjuk. A kicsapódó szilárd anyagot szűréssel összegyűjtjük, etiléterrel mossuk és egy éjjelen át vákuumban szárítjuk. 450 mg tiszta, cím szerinti vegyületet kapunk. 8. példa Az L 17046 antibiotikum benzilészter-trifluoracetátjának előállítása 450 mg L 17046 antibiotikum—BOC származékbenzilésztert — amelyet a 7, példa szerint állítottunk elő — 2,5 ml trifluorecetsavban oldunk'és az oldatot 15 percen át szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet 100 ml etiléterrel hígítjuk és a kicsapódó szilárd anyagot összegyűjtjük, éterrel mossuk és vákuumban egy éjjelen át 50 °C-on szárítjuk. 400 mg cím szerinti tiszta vegyületet kapunk. Képlet: C73Hm023N8C12C2HF302 Molekulasúly: 1606,3 Sí ámított: C 56,08 H 4,04 N 6,97 Cl 4,41% Talált: 54,58 4,3 7,03 4,17% 9. példa Az L 17046 antibiotikum N-BOC származéka 4- metil-benzilészterének előállítása 500 mg (0,333 mmól) L 17046 antibiotikum NBOC származékot 50 mg (0,499 m-egyenértéknyi) KOH-da! és 90 pl p-metil-benzilkloriddal együtt 7 ml desztillált DMF-ban oldunk és az oldatot egy éjjelen át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután to-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 10
