196228. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az L 17046 antibiotikum észter származékainak és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
196228 2 1 , Egy másik megoldás szerint az aktív komponens por alakú lehet és a felhasználás időpontjában állítható elő a folyékony készítmény egy megfelelő vivőanyaggal, pl. steril vízzel. A beviendő aktív komponens mennyisége különböző tényezőktől függ, amilyen a kezelendő beteg testsúlya és állapota, a bevitel módja és gyakorisága és a szóbanforgó kórokozó minősége. A találmány szerinti készítmények általában kb. 0,5—kb. 30 mg aktív komponens/testsúly-kg napi dózisban hatékonyak; ezt a mennyiséget előnyösen 2—4 alkalomra osztjuk fel a nap folyamán. Különösen előnyösek az adagolási egységek alakjában előállított készítmények, amelyek egységenként kb. 20—kb. 300 mg aktív anyagot tartalmazhatnak. A gyógyszerkészítmények előállítására néhány jellemző példát a következőkben mutatunk be: Parenterális bevitelre alkalmas oldatot állítunk elő oly módon, hogy 100 mg L 17046 antibiotikum etilésztert — hidroklorid alakban — 2 ml steril pro inj. vízben oldunk. Parenterális bevitelre szolgáló készítményt állítunk elő oly módon, hogy 250 mg L 17046 antibiotikum butilészter-hidrokloridot 3 ml pro inj. steril vízben oldunk. Helyi alkalmazás céljából kenőcsöt állítunk elő oly módon, hogy 200 mg L 17046 antibiotikum 4- -klór-butilészter-hidrokloridot, 3,6 g polietilénglikolt (4000 USP) és 6,2 g polietilénglikolt (400 USP) összekeverünk. A következő példák azt mutatják be, hogy a találmány a gyakorlatban hogyan alkalmazható. Mint ilyenek azonban a példák nem tekinthetők az oltalmi kör terjedelmét korlátozóknak. A kiindulási anyagok előállítása a) Az L 17054 antibiotikum előállítása 5 g teikoplanint erőteljes keverés közben hozzáadunk 60 ml, 80 °C-ra előmelegített 0,5n vizes sósavhoz. A keverést folytatjuk és a hőmérsékletet 30 percen át kb. 80 °C-on tartjuk. A keveréket ezután gyorsan szűrjük, a szűrletet 0—5 °C-ra hűtjük le és 10 ml 6n sósavat adagolunk. A kapott szuszpenziót kb. 15 percen át keverjük, miközben a hőmérsékletet 0—5 °C-on tartjuk. A csapadékot összegyűjtjük, 20 ml hideg In sósavval, majd etiléterrel mossuk és csökkentett nyomáson szobahőmérsékleten szárítjuk. 4,5 g nyers L 17054 antibiotikum-hidrokloridot kapunk. 3 g, az előbbiek szerint előállított nyers L 17054 antibiotikum-hídrokloridot 150 ml 95:5 (térf./ térf.) 0,2%-os vizes ammóniumformiát/acetonitrii elegyben oldunk. A pH-t In NaOH-dal kb. 7,5-re állítjuk be és a terméket feloldjuk. A kapott oldatot felvisszük egy oszlopra, amely 150 g 0,06—0,2 mm-es szilanizált szilikagélt (Merck) tartalmaz, ugyanezzel az oldószerrel elkészítve. Az oszlopot lineáris grádiens elucióval fejlesztjük ki (5—21%, térf ./térf., acetonitril 0,2%-os vizes ammóniumformiátban) és 20 ml-es frakciókat szedünk, amelyeket HPLC-vel követünk. Az L 17054 antibiotikumot tartalmazó frakciókat (70.—96.) egyesítjük és az acetonitrilt vákuumban eltávolítjuk. A visszamaradó vizes oldatot felvisszük egy oszlopra, amely 10 g szilanizált szilikagélt tartalmaz desztillált vízben. Az oszlopot a sók teljes eltávolításáig desztillált vízzel mossuk, majd a terméket 1:1 (térf./térf.) acctonitrihvíz eleggyel eluáljuk. Az összegyűjtött oldatot vákuumban kis térfogatra töményítjíik be és az antibiotikumot acélon hozzáadásával kicsapjuk. Szobahőmérsékleten való szárítás után 0,9 lényegében tiszta L 17054 antibiotikumot kapunk. b) Az L 17046 antibiotikum előállítása 10 g teikoplanint keverés közben hozzáadunk 150 ml sósavhoz, amelyet 80 °C-ra előmelegítünk. Kb. 45 perc elteltével a reakcióelegyet 0—5 °C-ra hűtjük és hozzáadunk kb. 30 ml 37%-os sósavat. A keverést kb. 10 percen át folytatjuk, majd a kivált szilárd anyagot szűréssel kinyerjük, 20 ml 2n sósavval, majd etil-éterrel mossuk és egy éjjelen át káliumhidroxid pasztillák felett szobahőmérsékleten szárítjuk. így 8,3 g nyers L 17046 antibiotikum hidrokloridot kapunk. 6,2 g előbbi nyers terméket 500 ml 80%-os metanolban oldunk és hozzáadunk 30 g szilikagélt (Meick, 0,06—0,2 mm). 200 ml n-butanol hozzáadása után az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A maradékot felvisszük egy kromatográfiás oszlopra, amely acetonitrilben 300 g szilikagélt tartalmaz. Az oszlopot úgy fejlesztjük ki, hogy egymásután a következő oldószerelegyeket alkalmazzuk, 300-300 ml mennyiségben: acetonitril; 95:5 acetonitrikvíz; 90:10 acetonitrikvíz; 85:15 acetonitrikvíz. Az eluátumokat kiöntjük és az oszlopot lineáris grádiens elucióval fejlesztjük ki, amelyet úgy érünk el, hogy 375 ml/óra sebességgel elegyítünk 3,5-3,5 liter következő oldószerelegyet: 83:17 acetonitrikvíz és 70:30 acetonitrikvíz. 25 ml-es frakciókat szedünk és ezeket HPLC-vel vizsgáljuk. Az L 17046 antibiotikumot tartalmazó frakciókat (170.—200.) egyesítjük. Az egyesített frakciókhoz 400 ml n-butanolt adunk és a kapott elegyet kis térfogatra töményítjük be. A zavaros oldathoz ezután acetont adagolunk és 10 °C-ra való lehűtés után azt észleljük, hogy csapadék kezd kiválni. A kicsapódás teljessé válása után a szilárd anyagot szűréssel összegyűjtjük, acetonnal, majd éterrel mossuk, szobahőmérsékleten vákuumban szárítjuk és így 1,9 g, cím szerinti vegyületet kapunk, lényegében tiszta alakban. 1. példa Al L 17046 antibiotikum-metilészter-hidroklorid előállítása a) L 17046 antibiotikumból 3 g L 17046 antibiotikumot 90 ml 0,35 mólos, 99,9%-os metanollal elkészített, vízmentes sósavban szuszpendálunk és a szuszpenziót kb. 2 órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk (fürdő-hőmérséklet kb. 80 °C). A reakcióelegyet ezután 0—5 °C-ra hűtjük le és a csapadékot összegyűjtjük, 100 ml dietilétet/el mossuk és egy éjjelen át szobahőmérsékleten vákut mban szárítjuk. 2,41 g nyers, cím szerinti észtert kapunk. A nyers terméket 100 ml vízben szuszpendáljuk és a kapott szuszpenzió pH-ját 8,3-re állítjuk be 0,ln NaOH-dal, majd háromszor 200 ml n-butanollai extraháljuk. A szerves rétegeket egyesítjük és ehhez az elegyhez hozzáadunk 200 ml vizet és 100 ml etilacetátot. A szerves 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
