196226. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új, antiamnéziás hatású, tripeptid származékok, valamint ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 196226 2 3. példa Z-D-Pip-Leu-Gly-NHi 2,23 g (5 mmól) Z-D-Pip-Leu-Gly-OCH3 védett tripeptid-észtert feloldunk 20 ml vízmentes metanolban, az oldatot 0 °C-ra hűtjük, majd 12 órán át ammónia gázt vezetünk át rajta. Ekkor az edényt lezárjuk, és a reakcióelegyet egy napon át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd vákuumban bepároljuk, és a bepárlási maradékot éterrel kristályosítjuk. A kristályos terméket 15 ml 1:1 arányú metanol-éter elegyből átkristályosítjuk. így 1,94 g (90%) cím szerinti védett tripeptid-amidot kapunk. Op.: 142—144 °C. Rr^O.7,Ri® = 0,35. . í«]24°= +9,35° (c = 1, etanolban). Nagynyomású folyadékkromatográfiás vizsgálat szerint a termék tisztasága nagyobb, mint 90%. Aminosav analízis: Gly=l,0, Leu = 1,02, D-Pip = 0,98. 4. példa D-Pip-Leu-Gly-NHr l/2H2Ö 648 mg (1,8 mmól) Z-D-Pip-Leu-Gly-NEh védett tripeptid-amidot feloldunk 5 ml etanolban, és 2 mól ekvivalens hidrogén-klorid jelenlétében 10%os palládium/aktív szén katalizátor segítségével hidrogénezzük. A reakció lefutása után a katalizátort kiszűrjük, a szűrletet vákuumban szárazra pároljuk, a higroszkópos bepárlási maradékot 25 ml kloroformban oldjuk és az oldatot ammónia gázzal telítjük. 1 óra eltelte után a kivált ammóniumklorid sót kiszűrjük és a szűrletet vákuumban bepároljuk. A maradékot éterrel kristályosítjuk, szűrjük, szárítjuk. így 331 mg (72%) cím szerinti tripeptid-amid-hidrátot kapunk. Op.: 150—152 °C. Aminosav analízis: Gly = l,0, Leu =1,08, D-Pip = 0,96. RiB = 0,95, R^ = 0,77. 5. példa Fmoc-D-Pip- Val-Gly-OCHj a) Z- Val-Gly-OCH} 35,1 g (150 mmól) Z-Val-OH védett valint feloldunk 225 ml vízmentes kloroformban, 16,5 ml (150 mmól) vízmentes N-metil-morfolint adunk hozzá, majd keverés közben —15 °C-ra hűtjük az oldatot. Ekkor 19,5 ml (150 mmól) klór-hangyasav-izobutilésztert csepegtetünk a reakcióelegyhez, amelyet ezen a hőmérsékleten további 5 percig keverünk. 18,6 g (150 mmól) glicin-metilészter-hidrokloridot 25 ml dimetil-formamidban melegítés közben oldunk, az oldatot visszahűtjük, majd 16,5 ml (150 mmól) vízmentes N-metil-morfolint adunk hozzá. Az oldatot lehűtjük 0 °C-ra, majd összekeverjük a fentiek szerint készített vegyes anhidrid-oldattal. A reakcióelegy keverését —10 °C-on 2 órán át, majd szobahőmérsékleten 6 órán át folytatjuk. A reakcióeíegy feldolgozását a 2.a. példában megadottak szerint végezzük. 27 g (55,9%) cím szerinti védett dipeptid-észtert kapunk. Op.: 157—159 °C. Rr* =0,70, RrB = 0,89. [o]24D= —24° (c = 1, metanolban). b) Val-Gly-OCHj-aceíát 4,83 g (10 mmól) Z-Val-Gly-OŒL védett dipeptid-észtert feloldunk 30 ml 2:1 arányú metanolecetsav elegyben, majd 1 g 10%-os palládium/aktív síén katalizátor jelenlétében hidrogénezzük. A reakciót vékonyréteg-kromatográfiával követjük. Amikor befejeződik, a katalizátort kiszűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk. A cím szerinti szabad dipeptid-észter-acetátot bepárlási maradékként olaj alakjában kapjuk. Kitermelés: 3,5 g. RfA = 0,22, RrB = 0,10. c„ Fmoc-D-Pip- Val-Gly-OCH} 3,5 g (10 mmól) Val-Gly-OCHj-acetátot és 1,65 ml vízmentes N-metil-morfolint feloldunk 25 ml dirr etii-formamidban, szobahőmérsékleten az oldathoz adunk 4,45 g (10 mmól) Fmoc-D-Pip-OSu védett N-D-pipekolil-oxi-szukcinimidet, majd a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 3 napon át keverjük. Ezt követően vákuumban bepároljuk, a maradékot 100 ml etil-acetátban feloldjuk, az oldatot 50 ml 10%-os vizes sósav-oldattal, majd háromszor 50 ml vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáttal megszárítjuk, szűrjük, végül vákuumban bepároljuk. A bepárlási maradékot éterrel kristályosítjuk és etanol-víz elegyből átkristályosítjuk. 3,5 g (68%) cím szerinti védett tripeptid-észtert kapunk. Op.: 106—108 °C. Rr* = 0,69, RrD = 0,89. [a]24D= —4,25° (c= 1, metanolban). Aminosav analízis: Gly=l,0, Val = l,03, D Pip = 0,85. 6. példa BOC-HPro-Leu-Gly-OCHi 2,29 g (10 mmól) BOC-HPro-OH védett homo- P 'olint feloldunk 10 ml vízmentes kloroformban, hozzáadunk 1,1 ml (10 mmól) vízmentes N-metil-morfolint, majd az oldatot állandó keverés mellett lehűtjük —15 °C-ra. Közvetlenül ezután a reakcióelegyhez csepegtetünk 1,34 ml (10 mmól) klór-hangyasav-izobutilésztert, és a reakcióelegyet ezen a hőmérsékleten keverjük 5 percen át. Közben 2,0 g (10 mmól) Leu-Gly-OCH3-acetátöt feloldunk 10 ml vízmentes kloroformban, hozzáadunk 1,65 ml vízmentes N-metil-morfolint, és az oldatot 0 °C-ra hűtjük. Az így kapott 0 °C-os oldatot hozzáadjuk a fenti módon elkészített vegyes anhidrid-oldathoz, majd a reakcióelegyet előbb —10 °C-on 2 órán át, majd szobahőmérsékleten 3 órán át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk és a bepárlási maradékot 100 ml etil-acetátban oldjuk. Az etil-acetátos oldatot 50 ml 20%-os vizes kénsav-oldattal, 50 ml vízzel, 50 ml 10%-os vizes nátrium-karbonát-oldattal, végül ismét 50 ml vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáttal vízmentesítjük, szűrjük és a szűrletet vákuumban bepároljuk. A bepárlási maradékot éterrel kristályosítjuk, majd 15 ml etanol és 15 ml víz elegyéből átkristályosítjuk. 2,97 g (72%) cím szerinti védett tripeptid-észtert kapunk. Op.: 95—97 °C. RrA = 0,85, RfD = 0,65. [a]24D= —44,24° (c = 1, etanolban). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
