196226. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új, antiamnéziás hatású, tripeptid származékok, valamint ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
196226 2 1 -A nagynyomású folyadékkromatográfiás vizsgálat eredménye szerint a termék tisztasága nagyobb, mint 90%. Aminosav analízis: Gly =1,0, Leu = 0,92, HPro = 0,9. 7. példa BOC-HPro-Leu-GIy-NHs 413 mg (1 mmól) BOC-HPro-Leu-Gly-OCH3 védett tripeptid-észtert feloldunk 5 ml metanolban, és az oldaton 12 órán át ammónia gázt vezetünk át 0 °C-on. Az ammóniával telített oldatot ezután légmentesen lezárjuk, és szobahőmérsékleten 1 napon át állni hagyjuk. Az edényt óvatosan felnyitjuk, és tartalmát vákuumban bepároljuk. A bepárlási maradékot éterrel kristályosítjuk, és 5 ml 1:1 arányú metanol-éter elegyből átkristályosítjuk. 329 mg (90%) cím szerinti védett tripeptid-amidot kapunk. Op.: 145—146 °C. RfA = 0,64, RrB = 0,36. [a]2«D = —27,2° (c = 1, etanolban). Nagynyomású folyadékkromatográfiás vizsgálat szerint a termék tisztasága nagyobb, mint 90%. Aminosav analízis : Gly =1,0, Leu = 1,0, HPro = 0,86. 8. példa Z-D-Pro-D-Leu-Gly-CHi a) Z-D-Pro-D-Leu-OH 1,17 g (9 mmól) D-leucint feloldunk 9 ml In vizes nátrium-hidroxid-oldatban, és az oldatot állandó keverés közben 0 °C-ra hütjük. Keverés közben hozzáadjuk 4,14 g (8 mmól) Z-D-Pro-OPCP 15 ml dioxánnal készített oldatát, majd a keverést 0—5 °C hőmérsékleten 48 órán át folytatjuk. A reakcióelegyet ezután 0 °C-ra hűtjük, a kivált feleslegben levő D-leucint kiszűrjük, a szűrletet közel 10 ml-re bepároljuk (eltávolítjuk belőle a dioxánt), végül a visszamaradó vizes oldatot háromszor 10—10 ml etíl-acetáttal kirázzuk. A vizes fázist ezután 1:1 arányban hígított vizes sósav-oldattal 3 pH-ra beállítjuk, háromszor 50—50 ml etil-acetáttal kirázzuk, az etil-acetátos fázist vízzel mossuk, majd vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk, szűrjük, végül bepároljuk. A bepárlási maradékot 20 ml 2:1 arányú etil-acetát — n-hexán elegyből átkristályosítjuk. 2,20 g (76%) cím szerinti védett dipeptidet kapunk. Op. : 128—130 °C. Rr* = 0,80, Rfc = 0,35. [or]24D = + 680 (c = 1, metanolban). b) Z-D-Pro-D-Leu-Gly-CHs 725 mg (2 mmól) Z-D-Pro-D-Leu-OH védett dipeptidet feloldunk 5 ml vízmentes kloroformban, az oldatot —15 °C-ra hűtjük, majd hozzáadunk 0,3 ml (2,2 mmól) trietil-amint és 0,286 ml (2,2 mmól) klór-hangyasav-izobutilésztert. A reakcióelegyet ezen a hőmérsékleten 5 percen át keverjük, majd állandó keverés közben 220 mg (2 mmól) l-amino-propán-2-on (H2N-CH2-CO-CH3) 1 ml vízmentes dimetil-formamiddal készített oldatát, és ezt követően további 0,3 ml (2,2 mmól) trietil-amint adunk a reakcióelegyhez. A keverést —15 °C hőmérsékleten még 120 percig folytatjuk, ezután a reakcióelegyet 24 órán át jégszekrényben állni hagyjuk, majd vákuumban bepároljuk. A bepárlási maradékot 50 ml etil-acetátban oldjuk, 25 ml 2n vizes sósav-oldattal, 25 ml 10%-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és 25 ml vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk, szűrjük, végül vákuumban bepároljuk. A bepárlási maradékot 10 ml etanolban oldjuk és éterrel kicsapjuk- így 710 mg (85,1%) cím szerinti védett terméket kapunk. Op.: 142—143 °C. RfA = 0,65, RrB = 0,49. [o]24d = + 80,82° (c = 1, etanolban). A nagynyomású folyadékkromatográfiás vizsgálat szerint a termék tisztasága nagyobb, mint 90%. Aminosav analízis: Gly=l,0, D-Leu=0,91, D-Pro =0,85. 9. példa Z-Glp-Leu-Gly-CHi a) ZGlp-Leu-OH Mindenben a 8. példa a) szakasza szerint járunk el azzal az eltéréssel, hogy D-leucin helyett L-!eucint, Z-D-Pro-OPCP helyett pedig Z-Glp-OPCP-t használunk. A reakcióelegy feldolgozása során kapott olajszerű bepárlási maradékot metanol-n-hexán elegyből átkristályosítjuk. így 80%-os kitermeléssel kapjuk a cím szerinti védett dipeptidet. Op.: 184-185 °C. RfA = 0,55, Rfc = 0,7. [a]24°= —70,6° (c = 1, metanolban). b) Z-Glp-Leu-Gly-CHi 65& mg (2 mmól) Z-Glp-Leu-OH védett dipeptidet a 8. példa b) szakasza szerint reagáltatunk 220 mg (2 mmól) 1-amino-propán-on vízmentes dimetil-formamidos oldatával. A reakcióelegyet a példában megadott módon dolgozzuk fel. A reakcióeleg> bepárlásával kapott maradékot éterrel eldörzsőljük, a kivált szilárd anyagot etilacetát-éter elegyből átkristályosítjuk. így 329 mg (35%) cím szerinti vegyületet kapunk. Op.: 181. °C. RrA = 0,79, R,B = 0,8. [o]24D = —25,5° (c = l, dimetil-formamidban). A nagynyomású folyadékkromatográfiás vizsgálat szerint a kimutatható szenynye/.ések 7% alatt maradnak. Aminosav analízis: Glu = 0,96, Leu=l,03, Gly =1,0. 10. példa Z-Pro-Leu-Gly-CH3 v) Z-Pro-Leu-OH Mindenben a 8. példa a) szakasza szerint járunk el azzal az eltéréssel, hogy D-leucin helyett L-Ieucint használunk. A reakcióelegy feldolgozása során a kapott szilárd bepárlási maradékot aceton-n hexán elegyből kristályosítjuk át. így 82,8%-os ki'emeléssel kapjuk a cím szerinti védett dipeptidet. Op.: 134-136 °C. RfA = 0,67, Rfc = 0,8. [ö]24D= —63,8° (c = 1, metanolban). b) Z-Pro-Leu-Gly-CHj 724 mg (2 mmól) Z-Pro-Leu-OH védett dipeptidet a 8. példa b) szakasza szerint reagáltatunk 220 mg (2 mmól) i-amino-propán-on vízmentes dime-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
