196202. lajstromszámú szabadalom • Eljárás N-(4-[2,3-d]-pirimidin-6-il)-alkil-benzoil-L-glutaminsav származékok és e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 196 202 2 A találmány az N-(4-[2-(pindo [2,3-d] pirimidin- 6-il)-aIkil]-benzoiI)-L-glutainsav neoplasina ellenes hatású új származékainak az előállítására vonatkozik. Az aminopterin és amethopterin (vagy más nevein 10-metil-aminopterin vagy metotrexát) daganat ellenes hatású szerek és a fólsav metabolikus származékainak enzimes átalakítását gátolják (antimetabolitok). így például az amethopterin a dihidrofolát reduktáz enzimet gárolja, amely timidilát szintetáz enzim hatására a 2-dczoxi-uridilát —» timidilát átalakulásnál képződő dihidrofolátnak tetrahidrofoláttá történő redukciójához szükséges. A fólsav és aminopterin számos származékát állították elő és vizsgálták a metabolizmusra gyakorolt hatásukat. Többek között különböző „deaza’-vegyületek előállítása történt meg, amelyekben az imino- vagy nitrilcsoport helyett metilcnvagy mctilidéncsoport van a molekulában. Ezek a vegyületek különböző mértékben hatottak a meta^ bolitok átalakulására. A 10-deaza-aminoptcrin rendkívül hatásos volt [Sirotak és munkatársai: Cancer Treat. Rep. 62,1047. (1978.)], ugyanakkor a 10-dcaza-fólsav nem mutatott szignifikáns hatást [Struck és munkatársai: J. Mcc. Chem. (1971.), 14, 693.]. Az 5-deaza-fólsav gyenge citotoxicitást, az 5-dcaza-amino-ptcrin az amethopterinéhez hasonló hatást mutatott [Taylor és munkatársai: J. Org. Chem., 48., 4852. (1983.)]. A 8,10-dideazafólsav elhanyagolható mértékben gátolja a dihidrofolát reduktázt [De Graw és munkatársai: Chemistry and Biology of Pteridines, Elsevier, 1979. 229.], ugyancsak kevéssé hat az 5, 8, 10-trideazafólsav L1210 egér leukémiával szemben [Oatis 6s munkatársai: J. Med. Chem., 20. 1393. (1977.)]. Hatásosnak bizonyult a 8,10-dideaza-a, inopterin (4460591. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás), L1210 egér leukémiával szemben aktív az 5, 8,10-trideaza-aminopterin [Yan és munkatársai: J. hetcrocycl. Chem., 16, 541. (1979.)]. A találmány tárgya eljárás (ia) az (IA) általános képletú pirido [2,3-d] pirimidinek — ebben a képletben R1 amino- vagy hidroxilcsoportot és R3 hidrogénatomot, metil- vagy etilcsoportot jelent és a * — jelzett szénatom L-konfiguráciőjú — ; (ib) az (IB) általános képletú 5,6,1, 8-tetrahidropirido-[2,3-d] pirimidinek — ebben a képletben R1 amino- vagy hidroxilcsoportot és R3 hidrogénatomot, metil- vagy etilcsoportot jelent és a * — jelzett szénatom L-konfigurációjú — ; (ii) a fenti vegyületek tautomer alakjai; és (iii) a fenti vegyületek gyógyászatiig elfogadható fémsói, így alkálifém-, alkáliföldfém-, sóinak az előállítására. A pirido [2,3-d] pirimidin heterociklusos gyűrűrendszert cs számozás módját a (XII) képlet mutatja. Az R1 helyén hidroxilcsoportot tartalmazó (IA) és (IB) általános képletú vegyületek pirido [2,3-d] pirimidin gyúrúrcndszcre tautomer egyensúlyban van a megfelelő 3,4-dihidro-4-oxo-vegyületekkel, mint azt az 1. ábra mutatja. Egyszerűség kedvéért a leírásban mindenütt a 4-hidroxi-vegyületet rajzoltuk fel, illetve az ennek megfelelő nomenklatúrát használtuk, minden esetben beleértjük azonban a 3,4-dihidro-4-kcto tautomer alakot is. A glutaminsavoldalláncban az* —jelzettszénatom abszolút konfigurációja L, vagyis abszolút konfigurációja megegyezik az alanin megfelelő a-szénatomjának abszolút konfigurációjával. Ha R3 hidrogénatomtól eltérő jelentésű, akkor a molekula még egy királis centrumot tartalmaz, amely esetben d,Lésl,Ldiasztereomerck képződnek. Ezeket fizikai módszerekkel, például kromatográfiás módszerrel választhatjuk el egymástól. Az (IB) általános képletú 5, 6, 7, 8-tctrahidrovegyületek esetében a pirido [2,3-d] pirimidin gyúrúrcndszcr 6. helyzete is királis; ha R3 hidrogén atom, akkor d,L cs 1,L diasztereomerek, illetve ha R3 hidrogénatomtól eltérő jelentésű, akkor d,l,L-, d,d,L-, 1,1,L- és l,d,L- diasztereomerek keletkeznek . A fenti izomerek előállítását is a találmány tárgyához tartozónak tekintjük. A találmány kiterjed a gyógyászatiiag elfogadható alkálifém-, alkáliföldfém-, nem toxikus fém-, ammónium és szubsztituált ammónium-sókra, mint amilyenek például nátrium-, kálium-, lítium-, kalcium-, magnézium-, alumínium-, cink-, ammónium-, trimetil-ammónium-, trietil-ammónium-, trietanol-ammónium-, piridinium-, szubsztituált piridinium-sók, és hasonlók. A találmány szerinti vegyületek olyan enzim(ek)re hatnak, amcly(ek) fólsavat, vagy főként a fólsav metabolitikus származékaitszubsztrátként hasznosítják. A hatásos vegyületek főbb képviselői a következők: 1. számú vegyidet: N-/4-[2-(2,4-diamino-pirido [2,3-d] pirimidin-6-i!)-etil]benzoil/-L-glutaminsav. 2. számú vegyület: N-/4-[2-(2-amino-4-hidroxi-pi-rido [2,3-d] pirimidin-6-il)ctil]-benzoil/-L-glutaminsav. 3. számú vegyület: N-/4-[2-(2,4-diamino-5,6,7,8-tetrahidro-pirido [2,3-d] piri-midin-6-il)-etil]-benzoil/-L-glutaminsav. 4. számú vegyület: N-/4-[2-(2-amino-4-hidroxi-5, 6, 7, 8-tetrahidro-pirido [2,3-d] pirimidin-ó-il)-etil]-benzoil/-L- glutamiusav. A vegyület dihidrofolát reduktázra (DHFR) gyakorolt hatását a következő módszerrel vizsgáltuk: Kaufman és munkatársai: Methods in Enzymology, lacobs and Wilcheck, Eds., Academic Press, New York, 1974. 272-281. Az eredményeket az alábbi 1. táblázat mutatja. 1. táblázat A vegyület száma ICWM i. 4,3x10-* 2. 4,9x10-5 3. 7,1x10-* 4. 5,6x10-* A vegyületek timidilát szintetázra gyakorolt hatását Wahba és munkatársai módszerével vizsgáltuk [J. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
