195971. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nagytisztaságú lanatozid C előállítására
3 195971 4 A találmány tárgya eljárás 97% feletti hatóanyagtartalmú Lanatozid C előállítására, szárított Digitalis lanata drog vagy a friss növény metanolos kezelése, vizes-mctanolos drog-extrakciója, kloroformos totál-extrakciója, az extraktum besűrítése, tisztítása, a primer glikozidkeverék kinyerése, a komponensek megosztással történő elkülönítése, a nyers Lanatozid C termék kinyerése és tisztítása útján. A korszerű gyógyászatban az egységes és jól definiálható hatÓB elérése érdekében a glikozidkeverékek használatát kerülik, ezért egyre inkább előtérbe kerülnek az egy glikozidot tartalmazó készítmények. Gyógyászati szempontból különösen a Lanatozid C-t tisztán - kísérő lanatozidoktól mentesen - tartalmazó készítmények előállításának van nagy jelentősége. Ismeretes, hogy a szárított Digitalis lanata drogból, vagy a friss növényből a digilanidáz enzim hatásának kiküszöbélése esetén lanatozid-keverék izolálható, amely főként Lanatozid A-t, B-t és C-t tartalmaz. A digilanidáz enzim működésének leállítását követően a drogból a primer glikozidokat az enzimgátláshoz használt oldószerrel kiextrahálják. A 41 820 lajstromszámú NDK-beli szabadalmi leírás szerint az etilacetátos extraktum besűritése során a glikozidokat a ballasztanyagokkal együtt poliamid-porra szárítják, amelyről vizes-alkohollal végzik a glikozidok leoldását. Az 50 990 lajstromszámú román szabadalmi leírás szerint az enzimgétlást, majd a drogextrakciót 70%-os vizes etilalkohollal, vagy 80%-os vizes roetilalkohollal végzik, majd az oldat besűrítése után a vizes alkoholos oldatot benzollal mossák a klorofil és egyéb színezőanyagok eltávolítása céljából. A tisztított vizes alkoholos oldatból diklór-metánnal vonják ki a glikozidokat, majd lúgos vízzel (pH: 8-8,5), ferri-szulfát-oldattal, végül magnézium-oxiddal továbbtisztitják a glikozidkeveréket, majd vizes alkoholból kristályosán kinyerik a Lanatozid A, B, C keveréket. A 156 753 lajstromszámú magyar szabadalmi leírásban a Digitalis drog kivonatainak ballasztanyagoktól és színezékektől történő mentesítésére 8-12 pH-értékre lúgosított közegben szervetlen redukáló anyagokat, mint nátrium-ditionitot, vagy nátriumborohidridet használnak. A glikozidkeverék komponenseinek szétválasztására, a Lanatozid C kinyerésére több módszer iBmert az irodalomban. A glikozidkeverék frakcionált kristályosításával nyerik ki a Lanatozid C-t a 156 638 lajstromszámú magyar szabadalmi leírás szerint. Néhány százalék vizet tartalmazó tetrahidrofuránban oldják a glikozidkeveréket, majd kloroform hozzáadásával az elegyet C-lanatozidra túltelítetté teszik, majd a kristályokat leválasztják. A műveletet a megfelelő tisztaságú termék kinyeréséig megismétlik. Hasonló eredményeket értek el más oldószer-rendszer, például 30-66 tf% alkanolt tartalmazó kloroform és alifás, aliciklusos, vagy aromás szénhidrogén alkalmazásával is. Elvileg más megoldást ismertet a 149 426 lajstromszámú magyar szabadalmi leírás, mely szerint vizes-metanol és kloroform között osztják meg a glikozidkeveréket, és a Lanatozid C-t a vizes metanolból nyerik ki. Elvileg azonos, de összetettebb rendszert használnak a 94 987 lajstromszámú NDK-beli szabadalmi leírás szerint, aholis kevés nátrium-kloridot tartalmazó víz, metanol és aceton elegye az egyik fázis; kloroform és Bzéntetraklorid vagy benzin elegye a vízzel nem elegyedő fázis, melyek között a glikozidkevercket megosztják. Az irodalomban található izolálóéi és tisztítási eljárások közös hibája, hogy egy-egy konkrét probléma megoldására, bizonyos típusú szennyezések eltávolítására alkalmas ugyan, de nem képesek egy eljáráson belül egydejűleg megoldani a ballasztanyagok és a kísérő glikozidok oly mértékű eltávolítását, hogy a termék, megfelelő kihozatallal, a jelenlegi egyre szigorodó minőségi követelményeknek is megfeleljen. A találmány célja gazdaságos, korszerű módszer kidolgozása, mellyel kitűnő minőségű, tiszta Lanatozid C állítható elő. A találmány egyik alapfelismerése, hogy az eddig alkalmazott 70-80% alkoholt tartalmazó vizes extrahálószer helyett mindössze 20-10 térfogat% metanolt tartalmazó vizes extrakciól kell alkalmaznunk. Igen fontos az a megfigyelésünk is, hogy a drogextrakció elvégzése után a kloroformos totól-extrakció előtt - 50-50 térfogat% (±3%) víz-metanol-rendszert kell kialakítanunk. A további feldolgozás során megállapító! .uk azt is, hogy a primer glikozid-keveréket benzol-metanol-víz elegyében kitűnően lehet tisztítani. A találmány a fentieken kívül azcn a felismerésen alapul, hogy a nyers Lanai ozid C egy aránylag szűk intervallumban definiálható térfogatarányú speciális diklórme.án-etanol-elegyből eredményesen tisztítható. A fentiek alapján a találmány tárgya eljárás 97% feletti hatóanyagtartalmú Lanatozid C előállítására, szárított Digitalis lanata drog vagy a friss növény metanolos kezelése, vize r>-metanolos drog-extrakciója, kloroformos totál-extrakciója, az extraktum besűritése, tisztitása, a primer glikozid-keverék kinyerése, a komponensek megosztással történő elkülönitése, a nyers Lanatozid C termék kinyerése és tisztítása útján, olyan módon, hogy a metanollal kezelt drog vagy friss növény vizes-metanolos extrakciójához 20- -4 3 tf% metanolt tartalmazó vizes elegyet használunk, az így kapott extraktum metanrl-tartalmát metanol-adagolással 50 ±2 tf% értékre állítjuk, a kloroformos totál-extrakció 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
