195944. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 2-hidroxi-4- és/vagy 5-(szubsztituált)-fenil-cikloalkanolok előállítására
13 19594-1 14 (MPE = „maximum possible effect”; MPEso = a lehetséges legnagyobb hatást kiváltó dózis fele). b) Fájdalomcsillapító hatás vizsgálata egérfarok-remegési próbával A farok-remegési próbát egereken D’Amour és Smith [J. Pharmacol. Exp. Ther. 72, 74-79 (1941)] eljárásának módosításával hajtjuk végre szabályozott, nagy intenzitású hót adva a farokra. Az egeret szorosan illeszkedő fémhengerbe tesszük, melynek egyik végén át az egér farka kinyúlik. A hengert úgy helyezzük el, hogy a farok laposan fekszik egy besüllyesztett lámpa felett. A próba megindításakor elmozdítjuk a lámpa felett elhelyezett alumíniumlapot, úgyhogy a fénysugár áthalad a résen és a farok végére fókuszálódik. Egyidejűleg bekapcsoljuk az időmérő berendezést. Megállapítjuk a hirtelen megremegésig eltelt időt. Kezeletlen egerek általában 3-4 másodperc múlva reagálnak a lámpának való kitevés után. 10 másodperces védelmi periódusokat alkalmazunk. Mindegyik egéren fél és 2 óra múlva végezzük el a próbát morfinnal és a vizsgálandó vegyülettel való kezelés után. A morfin MPEso értéke 3,2-5,6 mg/kg. c) Farok-bemerítési próba Az eljárás a Benbasset és munkatársai által leírt tartály-próba [Arch. Int. Pharmacodyn. 122, 434 (1959)] módosítása. Charles River CD-I törzsű fehér hím egereket (19-21 g) lemérünk és azonosítás céljából megjelölünk. A kezelt csoportok általában 5 egérből állnak és minden egér a saját kontrolljaként szolgál. Általános szűrési célokra az új vegyületeket először 56 mg/kg dózisban intraperitoneálisan vagy szubkután alakalmazzuk 10 ml/kg térfogatban. A szerrel való kezelés előtt és a kezelés után fél és 2 óra múlva minden állatot a hengerbe tesszük. Minden henger lyukakkal van ellátva a megfelelő szellőzés céljából és kerek nylon-dugóval van lezárva, melyen ót az állat farka kinyúlik. A hengert függőleges helyzetben tartjuk és az állat farkát teljesen bemerítjük az állandó hőmérsékletű vízfürdőbe (56°C). Minden kísérlet végpontja a farok egy erőteljes rángass vagy rángatódzása, amit mozgási reakció kísér. Egyes esetekben a befejezés kevésbé élénk lehet a szer hatására. A nemkívánatos szöveti károsodás megakadályozása céljából a farkat a vízfürdőből 10 másodpercen belül kiemeljük és a próbát befejezzük. A reagálás latenciaidejét másodpercekben jegyezzük fel, legsűrűbben 1/2 másodpercenként. A vizsgálandó új vegyülelekkel párhuzamosan hordozóanyagból álló kontrollt is alkalmazunk, azonfelül standard, ismert hatékonyságú vegyületet is vizsgálunk. Ha a vizsgálandó vegyület aktivitása a 2 órás vizsgálati pontnál nem tért vissza az alapértékre, a reagálás latenciaidőit 4 és 6 óra múlva határozzuk meg. Végső mérést végzünk a 24 órás időpontban, ha a kísérlet napjának végén még aktivitást észlelünk. Kémiai úton kiváltott fájdalomérzetet alkalmazó próbák Fenil-benzokinonnal előidézett vonaglás gá tlása Carworth Farms CF-1 törzsű egerek ötös csoportjait szubkután vagy orálisan előkezeljük sóoldatta], morfinnal, kodeinnel, illetve a vizsgálandó vegyülettel. Szubkután kezelés esetén 20 perc múlva, orális kezelés esetén 50 perc múlva minden csoportot fenil-benzokinon intraperitoneális injekcióval kezelünk, amely hasi összehúzódásokat okozó ingerlő szerként ismeretes. Az ingert kiváltó szer beadása után 5 perc múlva elkezdjük és 5 percen át folytatjuk az állatok megfigyelését a vonaglások létrejötte vagy hiánya szempontjából. Meghatározzuk a vonaglás gátlásához szükséges MPEso-értéket. Nyomás által kiváltott fájdalomérzetet alkalmazó próbák A Haffner-féle farok-becsipési próbára kifejtett hatás Haffner [Experimentelle Prüfung Schmerzstillender. Duutsch. Med. Wach. 55, 731-732 (1929)] eljárásának módosítását alkalmazzuk a vizsgálandó vegyületek azon hatásának kimutatására, amelyet a farok becsípésével előidézett támadó reakciókra gyakorolnak. Charles River (Sprague-Dawley) CD törzsű fehér patkányokat (50-60 g) használunk. A szerre] való kezelés előtt, és a kezelés utón fél, 1, 2 és 3 óra múlva 6,35 mro-es „John Hopkins-bulldog” szorítókapcsot csiptetünk a patkány farkának tövére. A próbák végét a fájdalmat okozó ingerrel szembeni nyilvánvaló támadó magatartás fellépése jelenti, és a támadásig eltelt latencia-időt másodpercekben feljegyezzük. A csiptetöt 30 másodperc múlva eltávolítjuk, ha támadás még nem következett be és a reakció látenciáját 30 másodpercben jelöljük meg. A morfin hatásos dózisa 17,8 mg/kg (intraperitoneális). Villamosság által kiváltott fájdalomérzetet alkalmazó kísérletek „Meghátrálás-ugrás" próba A Teuen által leírt „meghátrálás-ugrás” próba [Psychopharmacologia 12, 278-285 (1968)] módosítását alkalmazzuk a fájdalom-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
